目前藥行的小伙伴們接觸較多的劑型是以片劑、膠囊劑、針劑居多。但是，對于像糖漿劑、貼膜劑，噴霧劑，軟膏劑、栓劑卻不是很常見。

今天我們就換換方向，聊一聊大家見得不多的劑型——軟膠囊（膠丸）。

 

隨著軟膠囊應用越來越廣泛，軟膠囊開始被爭相研發、仿制。軟膠囊參比制劑的逆向解析工作也就成為了軟膠囊研發至關重要一項的工作。

 

什么是軟膠囊

 

軟膠囊指將一定量的液體原料藥物直接包封，或將固體原料藥物溶解或分散在適宜的輔料中制備成溶液、混懸液、乳狀液或半固體，密封于軟質囊材中的膠囊劑。

 

軟膠囊的組成

 

軟膠囊由內容物、囊材兩部分構成。

部分	成分
內容物	1.內容物直接是液體原料
	2.內容物為原料藥與適宜的輔料制成
	3.其他（可能有抗氧劑等）
囊材	1.明膠
	2.甘油
	3.水
	4.其他（可能有防腐劑、遮光劑、色素等）

 

軟膠囊參比制劑的逆向解析

 

對軟膠囊的逆向解析主要包括囊材的逆向解析與內容物的逆向解析：

 

囊材的逆向解析

 

因為對后續工藝和內容物的影響，解析明白囊材的大致成分是非常重要的。囊材基本由膠料、增塑劑、水組成。

 

所以囊材的逆向解析就是為了弄明白這幾種成分的比例。三者重量比例一般為1：0.2~0.4：0.8~1.3。

 

現在我們比較常用的膠料為明膠，增塑劑為甘油；還可以在囊材中加入適宜的防腐劑、遮光劑、色素等。其大小與形態有多種，有球形、橢圓形、圓柱形、魚形、滴形、葫蘆形等。

 

（1）甘油含量的測定

 

參考2015年中國藥典四部附錄-藥用輔料 ，甘油含量測定方法如下：

 

取本品約0.1g，精密稱定，加水45ml，混勻，精密加入2.14%高碘酸鈉溶液25ml，搖勻，暗處放置15分鐘后，加50%（g/ml）乙二醇溶液10ml，搖勻，暗處放置20分鐘，加酚酞指示液0.5ml，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至紅色，30秒內不褪色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于9.21mg的C3H8O3。

 

在測定甘油含量的過程中需要特別注意：軟膠囊的囊材中不僅含有甘油，還有明膠、水，也可能含量少量其他成分（可能有防腐劑、遮光劑、色素），忽略未知的較少量的其他成分，要測得囊材中甘油含量，囊材中的明膠、水則一定不能干擾甘油的測定，所以說需要進行明膠干擾試驗及水干擾試驗。

 

現假設囊材中甘油:明膠：水=0.5:1:1 。

 

明膠干擾試驗

精密稱定明膠0.2g（相當于囊材中0.1g的甘油），置燒杯或三角瓶中，加入45ml水，密封，水浴70℃使溶解，冷卻至室溫，精密加入2.14%高碘酸鈉溶液25ml，搖勻，暗處放置15分鐘后，加50%(g/ml)乙二醇溶液10ml，搖勻，暗處放置20分鐘，加酚酞指示液0.5ml，用氫氧化鈉滴定液(0.lmol/L)滴定至紅色，30秒內不褪色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.lmol/L）相當于9.21mg的C3H8O3。

 

結果：囊材中明膠不會干擾甘油的含量測定。

 

水干擾試驗

精密稱定水0.2g（相當于囊材中0.1g的甘油），置燒杯或三角瓶中，加入45ml水，密封，水浴70℃使溶解，冷卻至室溫，精密加入2.14%高碘酸鈉溶液25ml，搖勻，暗處放置15分鐘后，加50%(g/ml)乙二醇溶液10ml，搖勻，暗處放置20分鐘，加酚酞指示液0.5ml，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定至紅色，30秒內不褪色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于9.21mg的C3 H8O3。

 

結果：囊材中水不會干擾甘油的含量測定。

 

最終結論：采用此方法測定囊材中甘油含量，囊材中水、明膠不干擾其測定結果。

 

根據上述試驗結果囊材中甘油測定試驗方法優化如下：

 

取軟膠囊數粒，剪開，棄去內容物，用無水乙醇將囊殼上殘留內容物洗凈，揮干，將囊材皮剪碎（此步操作應盡量在較低濕度下完成，且盡量快速操作，以免操作時間過長，導致吸潮），精密稱定處理后囊材約0.3g，精密稱定，置燒杯或三角瓶中，加入45ml水，密封，水浴70℃使溶解，冷卻至室溫，精密加入2.14%高碘酸鈉溶液25ml，搖勻，暗處放置15分鐘后，加50%(g/ml)乙二醇溶液10ml，搖勻，暗處放置20分鐘，加酚酞指示液0.5ml，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定至紅色，30秒內不褪色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于9.21mg的C3H8O3。

 

（2）水分的測定

 

軟膠囊的生產過程中，水分含量是一個重要的控制指標。因為軟膠囊殼中的水分對內含藥物會有影響。

 

同時，也會影響其軟硬程度、彈性、崩解性能；水分過多也會造成粘連、微生物滋生等等。

 

一般認為，膠囊殼含水量與崩解時間呈正比，其水分增多可能加速明膠自身的氧化。

 

所以膠囊殼水分含量的高低會直接影響藥品的質量、穩定性和使用期限。控制好膠囊殼的水分含量至關重要。而解析參比制劑囊材中水分，可以為軟膠囊制備工藝提供參數。

 

常見水分測定方法如下

測定方法	優、缺點
干燥失重法	缺點：測定時間長，樣品烘干過程無法恒重，無法準確判定終點。
鹵素水分測定法	優點：樣品測定時間短； 缺點：設置不同的測定參數，測定結果不同，無法準確判定終點。
卡爾費休法	優點：樣品測定時間短，可準確測定囊材中水分。

 

解析參比制劑的過程還是以準確和快速為主，所以我們一般采用卡爾費休法測定囊材中的水分，具體步驟如下：

 

步驟1：

 

取軟膠囊數粒，剪開，棄去內容物，用無水乙醇將囊殼上殘留內容物洗凈，揮干，將囊囊材皮剪碎（此步操作應盡量在較低濕度下完成，且盡量快速操作，以免操作時間過長，導致吸潮），精密稱定囊材適量；

 

步驟2：

 

選擇可以溶解軟膠囊囊材的溶劑；通常卡爾費休法是采用甲醇作溶劑，溶解樣品進行水分測定，囊材在甲醇中是無法溶解的，所以需要篩選一種溶劑，將囊材溶解，再進行水分測定；

 

可以選擇將甲醇與其他試劑混合作為溶劑，例如：甲醇、二氯甲烷或其他溶劑等混合。

 

步驟3：

 

將處理后囊材及溶劑同置西林瓶或頂空瓶中，加蓋、密封，振蕩使溶解，作為供試品溶液；

 

步驟4：

 

測定溶劑的水分；

 

步驟5：

 

測定供試品溶液的水分，扣除溶劑中的水分，測定結果用溶劑中的水分進行校正，則可以得到囊材的水分。

 

（3）明膠

 

一般情況下，囊材中主要組成為甘油、明膠、水，因此知道囊材水分（%）和甘油含量（%），

 

則可初步推測出大約1粒軟膠囊中明膠的質量。

 

計算公式如下：

 

明膠（%）=100%-水分（%）－甘油含量（%）。

 

（4）其他成分

 

囊材中可能還有少量的其他成分，例如：防腐劑（羥苯甲酯），這里小編給大家分享下羥苯甲酯的測定方法。

 

參考：國家食品藥品監督管理總局藥品評審中心“輔料數據庫”項下“輔料信息詳細”，可知，羥苯甲酯最高含量可達0.1%。

 

 

采用高效液相色譜法，參考專利“一種測定軟膠囊囊材中羥苯乙酯含量的方法”，確定最終色譜條件。

 

色譜條件如下：

 

色譜柱：Alltima C18（250mm×4.6mm，5μm）；

 

流動相：甲醇-水=50:50

 

溶劑：流動相

 

波 長：254nm；

 

流 速：1.0ml/min；

 

柱 溫：40℃；

 

進樣量：20μl；

 

對照品溶液：稱取羥苯甲酯酯對照品適量，精密稱定，加溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含羥苯甲酯約0.05μg的溶液，搖勻，即得。

 

供試品溶液：稱取參比制劑軟膠囊處理后囊皮（取本品剪開，除去內容物，用無水乙醇將囊殼上殘留內容物洗凈，揮干，將囊皮剪碎）0.5g，置25ml量瓶中，加溶劑適量，80℃水浴溶解，冷卻至室溫后，加溶劑定量稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

 

內容物的逆向解析

 

軟膠囊的內容物一般有以下幾種情況：

 

（1）內容物直接是液體原料

 

單一的原料解析相對來說比較簡單，現在很多原料的測定方法可以從中國藥典甚至于一些文獻中就可以找到，如果這些中沒有新開發一種含量測定方法也不是比較難。

 

（2）內容物為原料藥與適宜的輔料制成

 

每個項目的輔料不一樣，所以內容物的輔料解析方法是需要根據在研項目的具體輔料情況在進行開發，大家需要先根據資料查出其輔料的大致組成，或者根據藥物性質推測其可能添加的輔料，

 

然后針對某種輔料制定的分析方法來進行逆向解析。

 

例如：有的藥品，為了防止藥液被氧化，會在內容物中增加抗氧劑。

 

在此，我給大家分享一種抗氧劑（二丁基羥基甲苯，簡稱BHT）逆向解析思路。

 

采用高效液相色譜法

 

參考2015年版中國藥典四部“藥用輔料”項下“二丁基羥基甲苯”中含量測定方法；

 

①確定色譜柱

 

選擇一根 C18（250mm×4.6mm，5μm），不指定色譜柱品牌，BHT保留時間合適、與相鄰雜質分離較好、峰形較好即。當然出峰時間主要還是取決流動相的選擇。

 

②流動相的選擇

 

流動相：甲醇-水（9:1），采用甲醇-水體系，此體系就可以將BHT洗脫出來，當然具體比例可根據出峰情況調整。

 

③波長的選擇

 

波長：278nm；可以參考這個波長，或是進行BHT紫外波長掃描試驗；

 

不同的溶劑溶解BHT，波長掃描的結果會略有差別，由于軟膠囊內容大多為油狀液體，也可能為混懸液、乳狀液或半固體，所以對于溶劑選擇也是比較麻煩，可能用到平時不常用到的溶劑.

 

比如，輔料若為大豆油的話，就可以采用適量三氯甲烷進行先溶解，再選用其他合適的試劑進行稀釋。

 

④濃度選擇

 

曾有軟膠囊的專利中提到“藥液油中可加入占藥液油比重0~0.2%二丁基羥基甲苯作為防腐劑”，由此可以看出，二丁基羥基甲苯的加入量實際上是很小的，若以BHT占0.2%計算，供試品濃度達到100mg/ml時，BHT對照品的濃度僅為0.2mg/ml，所以，為確保BHT測定的準確度，應盡量選擇合適的溶劑，增加供試品的濃度。

 

 ⑤專屬性

 

小編在這里強調一下，方法建立以后，不要著急進行測定試驗，需要對此方法進行專屬性試驗；

 

以二丁基羥基甲苯為例：內容物中有主成分、二丁基羥基甲苯，可能還有其他輔料，那么我們就需要對已知的或是推測可能含有的輔料，均進行定位，需確定以下兩點：

 

★ 二丁基羥基甲苯在此條件下，需出峰時間合適、與相鄰雜質均分離較好，且主峰位置無其他輔料或雜質檢出；

 

★內容物中主成分及已確定含有的輔料（若有紫外吸收）均在此條件下需要能洗脫出峰，以確保不會有雜質峰殘留在下一針，影響測定結果。