前 言
2025年版《中國藥典》于10月1日起正式實(shí)施，其中非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查作為保障藥品安全性和有效性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，迎來了重要修訂。
本次微生物限度檢查相關(guān)修訂，與國際標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)統(tǒng)一，穩(wěn)妥推進(jìn)現(xiàn)行 ICH Q4B 附錄 4A 等相關(guān)指導(dǎo)原則在《中國藥典》的轉(zhuǎn)化與實(shí)施。并且完善風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的微生物控制體系，強(qiáng)化藥品質(zhì)量全過程控制要求。
下面將針對(duì)2025年版《中國藥典》四部通則1105 非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法以及1106 非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法的主要修訂內(nèi)容進(jìn)行理解和分析。
2025年版《中國藥典》四部通則1105 非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法
1.菌液制備
2025年版《中國藥典》在菌液制備方面進(jìn)行了顯著的優(yōu)化。新增“pH7.2 無菌磷酸鹽緩沖液”作為菌懸液制備的緩沖液，增加了緩沖液選擇的靈活性。同時(shí)，對(duì)黑曲霉孢子懸液的制備步驟進(jìn)行了優(yōu)化描述，將聚山梨酯80的濃度單位從“ml/ml”改為“g/ml”，使得實(shí)驗(yàn)條件更加標(biāo)準(zhǔn)化。
2.培養(yǎng)基適用性檢查
2025版《中國藥典》在培養(yǎng)基適用性檢查方面要求更加嚴(yán)格與規(guī)范。新增規(guī)定明確強(qiáng)調(diào)“每批微生物計(jì)數(shù)用的商品化的預(yù)制培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)符合培養(yǎng)基適用性檢查的要求“，這一規(guī)定與歐美藥典接軌。刪除“每一試驗(yàn)菌株平行制備2管或2個(gè)平板”的描述，使得實(shí)驗(yàn)操作更加靈活，但同時(shí)需注意驗(yàn)證該操作方法的一致性和可靠性。
3.檢驗(yàn)量
2025版《中國藥典》對(duì)供試品檢驗(yàn)量的規(guī)定進(jìn)行了全面細(xì)致的修訂，充分考慮了不同類型產(chǎn)品的特性和實(shí)際生產(chǎn)情況。
對(duì)于膜劑、貼劑和貼膏劑，增加了“10貼”作為檢驗(yàn)量單位，與原有的“100cm²”共同為這類產(chǎn)品的檢驗(yàn)提供了更靈活和全面的選擇。
對(duì)于制劑，明確了批產(chǎn)量與檢驗(yàn)量酌減的關(guān)系：“若批產(chǎn)量少于200的供試品（如臨床研究樣品），檢驗(yàn)量可減少至2個(gè)單位；批產(chǎn)量少于100的供試品，檢驗(yàn)量可減少至1個(gè)單位；貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減，檢驗(yàn)量減少時(shí)需進(jìn)行合理性評(píng)估；氣霧劑的檢驗(yàn)量應(yīng)不少于10個(gè)包裝單位。”
對(duì)于原料藥，也根據(jù)活性物質(zhì)含量制定了詳細(xì)的檢驗(yàn)量標(biāo)準(zhǔn)：“若單劑量（如每片、每膠囊或每支）產(chǎn)品中活性物質(zhì)含量小于或等于1mg，或多劑量產(chǎn)品每1g或每1ml中活性物質(zhì)含量小于1mg時(shí)，原料藥的檢驗(yàn)量應(yīng)不少于10個(gè)劑量單位或10g或10ml產(chǎn)品中所含原料的量。若樣品量有限或批產(chǎn)量極?。ㄈ缧∮?000ml或1000g）的活性物質(zhì)供試品，除另有規(guī)定外，其檢驗(yàn)量最少為批產(chǎn)量的1%。”
4.菌數(shù)報(bào)告規(guī)則
2025版《中國藥典》對(duì)菌數(shù)報(bào)告規(guī)則進(jìn)行了重要的修訂，需氧菌總數(shù)測(cè)定宜選取菌落數(shù)小于250cfu（原為300cfu）的稀釋級(jí)、霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定宜選取菌落數(shù)小于50cfu（原為100cfu）的稀釋級(jí)，作為菌數(shù)報(bào)告的依據(jù)。對(duì)于薄膜過濾法則取消上限100cfu的要求。這一菌落報(bào)告規(guī)則的調(diào)整，與ICH協(xié)調(diào)一致。
2025年版《中國藥典》四部通則1106 非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法
1.結(jié)果報(bào)告
2025版《中國藥典》將原“供試品檢出控制菌或其他致病菌時(shí)，按一次檢出結(jié)果為準(zhǔn)，不再復(fù)試”的要求修訂為“供試品檢出控制菌或其他不可接受微生物時(shí)，報(bào)告結(jié)果前應(yīng)進(jìn)行充分的調(diào)查和評(píng)估”。此處對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告要求更加嚴(yán)謹(jǐn)，對(duì)檢出控制菌或其他不可接受微生物的結(jié)果，不再是“一刀切”的以“一次檢出結(jié)果”為準(zhǔn)，而是需要經(jīng)過充分的調(diào)查和評(píng)估結(jié)果的準(zhǔn)確性后，才能報(bào)告結(jié)果。
2.菌液制備
同四部通則1105，新增“pH7.2 無菌磷酸鹽緩沖液”作為菌懸液制備的緩沖液，同時(shí)將“沙門菌”修改為“乙型副傷寒沙門菌”，與其他處名稱保持一致。
3.培養(yǎng)基適用性
同四部通則1105，新增強(qiáng)調(diào)“每批控制菌檢查用的商品化預(yù)制培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)符合培養(yǎng)基適用性檢查的要求”。
培養(yǎng)基抑制能力檢查中，刪除對(duì)照培養(yǎng)基要求。抑制能力檢查中，試驗(yàn)菌應(yīng)不得生長，此處修訂刪除對(duì)照培養(yǎng)基的要求，簡化試驗(yàn)，提升效率。培養(yǎng)基指示特性檢查中，控制菌培養(yǎng)時(shí)間由”不大于規(guī)定的最短培養(yǎng)時(shí)間“修改為”在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間范圍內(nèi)培養(yǎng)“。
4.陽性對(duì)照試驗(yàn)
2025版《中國藥典》調(diào)整了控制菌陽性對(duì)照試驗(yàn)的要求，增加“實(shí)驗(yàn)室應(yīng)基于質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理的要求，根據(jù)產(chǎn)品特性、方法適用性試驗(yàn)結(jié)果、人員技能與經(jīng)驗(yàn)、數(shù)據(jù)可靠性、污染控制措施和實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制水平等因素，綜合評(píng)估確定日常檢驗(yàn)過程中陽性對(duì)照試驗(yàn)的必要性、頻次及其他要求。”
此處刪除了對(duì)控制菌陽性對(duì)照試驗(yàn)強(qiáng)制要求，這一變革不僅是法規(guī)的更新，更是對(duì)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理能力的更高要求，需要更加關(guān)注對(duì)此步驟的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估機(jī)制，應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品特性（如成分、劑型、生產(chǎn)工藝、預(yù)期用途、用藥人群）、方法適用性結(jié)果、人員操作水平、數(shù)據(jù)可靠性、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和質(zhì)量控制水平等，多維度綜合評(píng)估陽性對(duì)照試驗(yàn)的必要性、頻次及其他要求。
本次修訂體現(xiàn)了基于風(fēng)險(xiǎn)的科學(xué)管理理念，本質(zhì)上是對(duì)實(shí)驗(yàn)室自身質(zhì)量管理體系有效性、人員能力、數(shù)據(jù)可靠性和風(fēng)險(xiǎn)控制水平的深度檢驗(yàn)。
5.控制菌具體操作步驟以及形態(tài)特征的規(guī)范化描述
耐膽鹽革蘭陰性菌檢查中：供試液預(yù)培養(yǎng)時(shí)間修改為“約2小時(shí)不大于5小時(shí)”（原為約2小時(shí)）；
沙門菌檢查中，調(diào)整選擇性培養(yǎng)基上的形態(tài)特征：三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基的斜面為紅色、底層為黃色或黑色（原為黃色）；
金黃色葡萄球菌檢查中，調(diào)整選擇性培養(yǎng)基上的形態(tài)特征：甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基平板上菌落形態(tài)描述為“外周有黃色環(huán)的黃色菌落或白色菌落”（原為黃色菌落或外周有黃色環(huán)的白色菌落）。
6.培養(yǎng)基及其制備方法
對(duì)培養(yǎng)基增加了“其他經(jīng)過驗(yàn)證的培養(yǎng)基“，以滿足其他致病菌的檢驗(yàn)需要，并調(diào)整了部分培養(yǎng)基的配方。
