摘要

乳狀滴眼劑作為復雜的滴眼劑型，研發和評價具有一定的特殊性。文章從乳狀滴眼劑仿制藥的處方、生產工藝、質量研究、包材和穩定性研究等藥學方面問題進行初步探討，匯總了國內外文獻中關于乳狀滴眼劑開發過程中的關鍵研究指標，以助于業界對乳狀滴眼劑仿制藥的開發。

關鍵詞

乳狀滴眼劑；眼用制劑；仿制藥；藥學研究；社會管理與藥學

眼用制劑系指直接用于眼部發揮治療作用的無菌制劑，可分為眼用液體制劑、眼用半固體制劑、眼用固體制劑等。目前，市售眼用制劑大部分為溶液型滴眼劑，但其在眼表的滯留時間較短、生物利用度較低。因此，近幾十年來出現了以延長藥物在眼表的滯留時間、增加眼表組織的滲透性和提高眼部靶組織的生物利用度為目的的新劑型，如乳狀滴眼劑等。

乳狀滴眼劑通常由油相、乳化劑和/或助乳化劑及水相組成，包括傳統乳劑、陽離子乳劑、微乳-凝膠等。傳統乳劑的乳滴表面不帶電荷或帶微弱電荷。陽離子乳劑是指采用陽離子乳化劑修飾乳滴表面，使其攜帶正電荷，從而延長其在眼表的滯留時間。微乳-凝膠結合了微乳與親水凝膠2種劑型的優勢，也可延長乳滴在眼表的滯留時間。

近些年來，國內外已有多種乳狀滴眼劑上市，參考FDA、EMA公布的說明書，表1列舉了部分已上市乳狀滴眼劑處方信息[3—8]。

2023年2月，NMPA藥品審評中心發布了《化學藥品仿制藥溶液型滴眼劑藥學研究技術指導原則》，闡述了溶液型滴眼劑藥學研究的要求。相較于溶液型滴眼劑和混懸型滴眼劑，乳狀滴眼劑作為一種熱力學不穩定的乳狀分散體系，藥物分布和釋放特征復雜，且處方、生產工藝、質量研究、包材和穩定性研究也更復雜，與已發布的溶液型滴眼劑有顯著區別。然而，目前我國尚未發布專門針對乳狀滴眼劑的指導原則。

本文參考國內外藥典、相關指導原則，并結合FDA發布的各乳狀滴眼劑個例指導原則，對乳狀滴眼劑仿制藥藥學研究中應關注的內容進行了初步探討。

1處方

FDA發布的二氟潑尼酯眼用乳劑、環孢素滴眼液(Verkazia)、環孢素滴眼液(Restasis和Restasis Multidose)等藥品個例指導原則中，均建議乳狀滴眼劑的仿制藥處方中輔料種類(Q1)和用量(Q2)與參比制劑(reference listed drug，RLD)一致(為RLD相應輔料用量的95%~105%)。此外，參考《化學藥品仿制藥溶液型滴眼劑藥學研究技術指導原則》，也應標注乳狀滴眼劑仿制藥與RLD處方中的滲透壓調節劑用量、緩沖劑用量和pH調節劑的不同之處，闡述理由，并開展研究以證明上述不同不影響產品的質量屬性(如滲透壓摩爾濃度、緩沖容量、pH值等物理化學特性)、安全性和有效性。

在乳狀滴眼劑仿制藥的處方開發過程中，建議基于RLD公開的說明書、專利等信息，結合RLD的關鍵質量屬性(如滲透壓摩爾濃度、pH值、粒徑及粒度分布、ζ電位、黏度、表面張力等)篩選處方中原輔料的種類和用量。同時，應關注輔料的型號，一般情況下應采用與RLD相同的輔料型號。尤其應關注影響滴眼劑關鍵質量屬性的關鍵輔料，如可降低油水界面表面張力、保持產品穩定性的乳化劑/助乳劑，可促進藥物在眼表面停留和暴露的陽離子表面活性劑等。

乳狀滴眼劑中抑菌劑的選擇，可參考RLD處方中所用的抑菌劑。如二氟潑尼酯眼用乳劑說明書中顯示采用0.1%山梨酸作為抑菌劑，拉坦前列素滴眼液說明書中顯示其采用0.47%山梨酸鉀作為抑菌劑，環孢素眼用乳劑(Verkazia或Ikervis)說明書[4—6]中顯示其采用西他氯銨作為抑菌劑。對于抑菌劑的用量，在參考RLD用量的基礎上，還需參照ChP2020年版四部通則1121《抑菌效力檢查法》，考察擬定處方的抑菌效力，以確保抑菌效力符合ChP規定，且在產品整個生命周期均符合質量要求。

2生產工藝

由于乳狀滴眼劑為非均相體系，一般情況下無法像溶液型滴眼劑一樣的常規、相對簡單的最終除菌過濾工藝。根據乳狀滴眼劑的性質可知，其生產過程通常包括油相制備、水相制備、混合(包括可能的高速剪切工藝)、均質化、濕熱滅菌、無菌灌裝等工序。例如，環孢素滴眼劑(Verkazia或Ikervis)的EMA評價報告中顯示，生產工藝中包括高速剪切工序。

乳狀滴眼劑產品中的原料藥通常水溶性較差，因此一般將原料藥與部分輔料作為油相部分進行制備。在油相和水相的制備工藝研究中，應關注原料藥和輔料加入的順序、制備過程中的溫度、攪拌速率及時間等參數。油相和水相分別制備后，混合工序中應關注混合時的溫度、攪拌的速率和時間等參數。均質工序通常為乳狀滴眼劑的關鍵生產工序，應關注均質過程中的溫度、壓力、速率及時間等參數，必要時可考慮對藥液進行多次均質。濕熱滅菌工藝中，通常應關注滅菌的溫度及時間、攪拌速率等參數。同時，由于乳狀滴眼劑的濕熱滅菌工藝與傳統注射劑不同，通常在生產中需要直接對配液罐進行滅菌，因此應關注滅菌過程中因破乳導致的藥液分層和液滴合并。這可能會影響藥液的混合均勻性、產品的液滴粒徑及穩定性。

乳狀滴眼劑的生產較為復雜。在生產工藝的開發過程中、工藝驗證及上市后的工業化生產中，應選擇合理的評價指標來監測工藝的合理性和穩健性。結合乳狀滴眼劑產品的質量控制，通常可考慮選擇性狀、滲透壓摩爾濃度、粒徑及粒度分布、ζ電位、pH值、黏度、表面張力、有關物質、含量及含量均勻度等指標。在滅菌工序中，應控制滅菌前藥液的微生物負荷；同時，在滅菌工序的工藝驗證中，應關注滅菌時溫度監控方式、溫度探頭放置的合理性、升溫和降溫曲線等，以保證熱分布和熱穿透測試等符合要求。

3原料藥和輔料

對于原料藥，除常規控制項目外，應重點關注乳狀滴眼劑的關鍵質量屬性，即粒徑，必要時可考慮對原料藥進行微粉化等前處理。同時，應對原料藥的粒度分布進行考察和控制，可采用激光粒度儀等對原料藥的d(0.1)、d(0.5)和d(0.9)指標等進行測定和相應的控制。如采用微粉化方式對原料藥進行前處理，應關注微粉化后原料藥的晶型變化。如對原料藥的無菌性有要求，可選擇采用無菌工藝生產的原料藥或對原料藥進行滅菌處理。

對于輔料，除進行常規質量控制外，通常應對其微生物限度進行控制。

4質量研究

參考溶液型滴眼劑的質量屬性研究，應考慮對乳狀滴眼劑的性狀、鑒別、溶液澄清度與顏色、pH值、黏度、相對密度、滲透壓摩爾濃度、可見異物、有關物質、元素雜質、無菌、抑菌劑含量、抗氧劑含量、含量測定、裝量/裝量差異等進行研究。此外，參考FDA發布的乳狀滴眼劑產品個例指導原則，還應考慮對粒徑和粒度分布、體外釋放、包封率、滴出量、ζ電位、表面張力、藥物相分布、含量均勻度等進行研究。

4.1 粒徑和粒度分布

粒徑和粒度分布是乳狀滴眼劑的關鍵質量屬性，通常應包含于質量研究和控制項目中。粒度分布可能影響藥物的釋放行為，進而影響藥物的生物利用度。如FDA發布的二氟潑尼酯眼用乳劑個例指導原則建議采用不少于10個數據集，每個數據集來自3批自制樣品與3批RLD的粒度分布對比，并采用群體生物等效性(population bioequivalence，PBE)研究的分析方法對比d(0.5)和跨距(span)(或強度加權平均粒徑和PDI，由粒徑大小、分布強度的累積分析得出)數據，基于95%置信區間上限判定仿制藥與RLD的生物等效性。同時在測試時應選擇一系列的連續稀釋條件來比較粒度分布測定結果，并提供分布數據的直方圖。

考慮到環孢素滴眼液(Restasis和Restasis Multidose)的粒度分布輪廓不是單一峰，基于d(0.5)和跨距的常規PBE分析方法已無法確證生物等效性，FDA發布的個例指導原則提出了一種新方法，即基于推土距離(earth mover’s distance，EMD)來統計和評估分布輪廓的形狀之間的差異。該方法首先計算所有RLD樣品(即RLD中心)的平均輪廓，并作為參考輪廓來計算RLD或仿制藥到RLD中心之間的距離；在獲得每個RLD樣品與RLD平均值之間的輪廓距離，以及每個仿制藥樣品與RLD平均值之間的輪廓距離后，使用統計方法來量化兩類距離之間的差異。為了表征RLD的變異性，應測定足夠數量的樣品并進行多次重復測定。

4.2 體外釋放行為

乳狀滴眼劑的體外釋放速度和累積釋放率可反映處方和工藝的變異程度，進而表征藥物的生物利用度。一般情況下，應考慮將釋放度訂入產品的質量標準，FDA發布的各產品個例指導原則[10—12]中均建議對體外釋放行為進行研究。在體外釋放行為的研究中，應結合藥物自身特性及RLD說明書中的用法、用量對釋放度測定方法進行篩選研究，可通過采用改變處方、工藝的關鍵因素的方法來設計并制備粒徑、包封率等制劑特性不同的系列制劑，再對其體外釋放行為是否存在差異進行驗證，從而篩選出有區分力的釋放度檢測方法。同時，釋放度檢測方法應盡可能模擬實際臨床使用場景(如每日用藥次數、單次用藥劑量等)，并兼顧平臺期，例如釋放介質種類和體積、取樣時間點、溫度的選擇等。

4.3 包封率

乳狀滴眼劑中包封的藥物與游離藥物存在不同的體內外特征，而包封率是評價產品處方、工藝和質量的重要指標，通常應對包封率進行研究。可先采用適當的方法將游離藥物與含藥乳滴分離，再測定藥物含量，通過計算得到包封率。

4.4 相分布

乳狀滴眼劑包括水相部分、油相部分，通常應對不同相中藥物的分布進行考察，并與RLD進行對比，以保證仿制藥在不同相中的藥物分布與RLD一致。

4.5 滴出量

人眼對于滴眼劑的容量有限，過高的滴出量會造成藥物浪費，過低則可能影響藥物療效。FDA發布的《局部用滴眼劑的質量考慮》草案中推薦仿制藥每滴的滴出量應在RLD滴出量的±10%范圍內，且每滴的滴出量應為20~70μL。

4.6 含量均勻度

由于乳狀滴眼劑為非均相體系，一般應考慮對產品的含量均勻度進行測定，如對不同滴眼劑瓶之間的含量均勻度進行考察。對于多劑量滴眼劑，應測定滴眼劑瓶上部、中部和底部的藥物含量，以確證原料藥均勻分散，且在整個有效期內可被均一地遞送。

4.7 其他

應關注質量標準中與常規滴眼劑控制范圍不同的項目，如二氟潑尼酯眼用乳劑說明書顯示其滲透壓摩爾濃度為304~411mOsm/kg，拉坦前列素滴眼劑說明書顯示其滲透壓摩爾濃度約為375mOsm/kg。

5包材研究和穩定性研究

乳狀滴眼劑仿制藥，應根據RLD所用包材和產品特點選擇合適的包裝材料。原則上，所選擇的內包材在對產品的保護性和功能性方面，應不低于RLD所用包材。同時，應考察產品與包材的相容性，并對包材的密封性進行研究。

應結合包材的特點(如半透性包材等)設計相關的穩定性試驗。在穩定性考察期間，除一般質量研究項目外，還應考慮對粒徑和粒度分布、體外釋放、包封率、ζ電位、表面張力、藥物相分布、含量均勻度、抑菌劑含量、抗氧劑含量、失水率等進行考察。穩定性試驗樣品通常應包括直立放置和倒置(或平放) 2種放置方式。

對于乳狀滴眼劑，FDA發布的《局部用滴眼劑的質量考慮》草案中要求，應進行冷凍/解凍熱循環研究，以評估運輸和處理過程中可能遇到的任何高溫和低溫變化的影響。這些溫度變化可能會影響藥品的質量。FDA建議冷凍/解凍熱循環研究應包含3個從冷凍(–20~0℃)到環境溫度(25~35℃)的循環，累計最少3d。如環孢素眼用乳劑(Verkazia或Ikervis)的EMA評價報告中顯示，RLD進行了凍融循環試驗，即在–18℃冷凍24h，然后在60℃熔化4h；為了考察運輸中的穩定性，設置了如下試驗：在50℃條件下保存2周，在5℃下保存2周和4周，以及在–20℃下保存2周(1周后進行1次凍融循環)。在整個研究過程中，以及在預定的周期數結束時，應對樣品的所有質量研究項目進行分析，并與RLD進行比較。

對于多劑量滴眼劑，還應考察其使用中穩定性。

6總結

乳狀滴眼劑仿制藥的開發除遵循一般滴眼劑的開發路徑外，還需關注其特殊性，并結合RLD的質量屬性進行研究。

目前，國內外監管機構暫未發布專門的關于乳狀滴眼劑研究的指導原則，其仿制藥的開發存在一定難度，導致國內上市的乳狀滴眼劑仿制藥較少。本文結合國內外現有的指導原則對乳狀滴眼劑仿制藥開發中相關的藥學問題進行了初步探討，以供業界參考。