技巧一：10倍(10-1)稀釋度的制備

在《GB4789.2-2022食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》中，第6點(diǎn)“菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序”中“檢樣”步驟是25g（mL）+225mL稀釋液，制成10倍稀釋度，也即10-1。在“6.1.5根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì),擇1個(gè)~3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)”在這里說(shuō)明，液體樣品可包括原液。那么問(wèn)題來(lái)了，當(dāng)我們做選取原液、10倍兩個(gè)稀釋度時(shí)，怎么操作呢？是接原液和25mL+225mL稀釋液?jiǎn)幔咳绻@樣操作，原液和10倍兩個(gè)稀釋度的誤差會(huì)很大，操作也比較麻煩。

在實(shí)踐過(guò)程中，當(dāng)我們樣品是液體時(shí)，10倍稀釋度應(yīng)該取1mL+9mL稀釋液，而不是25mL+225mL。這樣既方便，又準(zhǔn)確。只有固體、半固體樣品才需要按照25g+225mL制備10倍稀釋度。

關(guān)于配制10-1稀釋度那個(gè)配制，我們做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候會(huì)明顯覺(jué)得10-1稀釋度的結(jié)果明顯不是10-2稀釋度結(jié)果的10倍，有時(shí)候還會(huì)差得有點(diǎn)明顯，這些都是系統(tǒng)誤差和人的操作造成的，所以我還是建議按照25+225，而且25是1次就量取好不要搞什么10+10+5甚至更多次。如果都是用移液槍的話感覺(jué)可以考慮這個(gè)方法，移液管的就算了，還是按照標(biāo)準(zhǔn)方法來(lái)。

技巧二：選取適宜稀釋度

如何選取適宜稀釋度呢？

在“6.1.5根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì),選擇1個(gè)~3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)”這里說(shuō)了，“對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)”，怎么樣估計(jì)才準(zhǔn)確呢？如果能估計(jì)的話，那還用檢測(cè)嗎？“選擇1個(gè)~3個(gè)適宜稀釋度”，到底選擇1個(gè)，2個(gè),還是三個(gè)呢？很多檢驗(yàn)員未必搞清楚。

在實(shí)踐過(guò)程中，我們總結(jié)了經(jīng)驗(yàn)。這個(gè)“對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)”可以根據(jù)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的要求和企業(yè)內(nèi)控指標(biāo)要求進(jìn)行選取即可。這個(gè)怎么理解呢？根據(jù)GB4789.2-2022,菌落計(jì)數(shù)是選取菌落數(shù)在30-300之間的平皿進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)合產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求，以能出檢測(cè)報(bào)告為依據(jù)。

我們檢測(cè)樣品的菌落數(shù)的目的是看看樣品的菌落總數(shù)是否超標(biāo)。所以，應(yīng)以稀釋度最低的平皿的菌落數(shù)能檢測(cè)超標(biāo)的即可。

例如，某食品菌落總數(shù)要求是：n=5，c=2，m=10000，M=100000。我們假設(shè)最低稀釋度平皿上長(zhǎng)了300。那么，10000/300=33，兩位數(shù)。即最低稀釋度選取10-2即可，這樣稀釋度選10-2、10-3即可。

假如10-2上菌落數(shù)超過(guò)300，即多不可計(jì)了。那么，至少是100*300=30000，已經(jīng)大于m=10000。檢出3個(gè)大于30000的，可判超標(biāo)。

如果最低稀釋度上菌落數(shù)小于30或者無(wú)生長(zhǎng)。那么，檢測(cè)結(jié)果也是合格的。

例如，最低稀釋度上無(wú)菌落生長(zhǎng)，可報(bào)告<100。如果有生長(zhǎng)，直接報(bào)告實(shí)數(shù)即可，結(jié)果也合格。