摘要：崩解時限是影響口溶膜產品口感和用藥順應性的關鍵指標，目前尚無檢測口溶膜崩解時限的標準方法。本研究對比考察藥典崩解儀法、培養(yǎng)皿法、海綿法、小球法以及改進設計的不附重物式垂直液面崩解法和附重物式垂直液面崩解法這6 種方法，測定4 種不同厚度的西甲硅油口溶膜的體外崩解時限，并評價其與體內崩解時限的相關性。結果表明，藥典崩解儀法和附重物式垂直液面崩解法的重復性和體內外相關性較好；附重物式垂直液面崩解法裝置簡單，崩解試驗終點容易判斷。附重物式垂直液面崩解法能夠較好地模擬口腔內環(huán)境，該法可操作性強，分辨率、重復性及體內外相關性均良好，適用于進行口溶膜的體外崩解評價。本文成人感官味覺評價實驗屬于研究性質的臨床試驗，已按照藥物臨床試驗質量管理規(guī)范的倫理要求，經所有受試者知情同意。
膜劑系指原料藥物與適宜的成膜材料經加工制成的膜狀制劑[1]，其中口溶膜是一種新型的口服制劑，服用時無須飲水即能在口腔中快速崩解、溶化的藥品，服用方式是將口溶膜放在舌頭上、至溶化后吞咽，服用便利，順應性好，尤其是對于兒童和老人等吞咽困難的患者群體[2]。與滴劑、溶液劑、乳劑等液體制劑相比，口溶膜單劑量包裝，劑量準確，質量穩(wěn)定；可塑性較強，不易脆碎，體積小、重量輕，攜帶方便，適合旅行攜帶；所用輔料少，生產工藝簡單，生產成本低[3]。
崩解是指口服固體制劑在規(guī)定條件下全部崩解溶散或成碎粒的過程。在已上市的口溶膜產品中，除了美國上市的酮洛芬口溶膜（商品名Nexcede）的質量標準中包含崩解檢查項之外，其他產品并未將崩解定入質量標準[4]。但崩解是口溶膜產品開發(fā)和質量評價過程中必不可少的研究項目，因為崩解時限是影響口溶膜產品質量及用藥順應性的至關重要的指標[3]。口溶膜用藥時需放置在舌頭上，若長時間內未完全崩解，部分未崩解口溶膜可能會被吸入鼻腔產生窒息風險[5]。因此，口溶膜在口腔內應能適時被唾液浸濕，迅速溶解，隨后吞咽進入胃腸道，從而提高兒童、老年人及吞咽困難患者的接受度及依從性[6]。2022 年國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心發(fā)布的《兒童用藥口感設計與評價的技術指導原則（試行）》將藥品口感界定為與制劑的劑型、質地等相關[7]，對口溶膜來說，其在口腔中崩解的快慢顯著影響其口感。為發(fā)揮其迅速崩解、易于吞咽的劑型優(yōu)勢，選擇合適的體外崩解時限測定方法，對有效保證口溶膜質量至關重要。
但目前尚無測定口溶膜體外崩解時限的標準方法[8]。文獻中報道了各種不同的口溶膜崩解時限測定方法，包括框架法[5,9,10]、培養(yǎng)皿法[5,9,11-13]、海綿法[14]、框架-小球法[6,10,15]、藥典崩解法[16,17]等。其中，培養(yǎng)皿法和海綿法是兩種較為簡單的測試方法，通過觀察口溶膜完全崩解或消失，確定體外崩解時限。Steiner等[15]考慮到舌頭在口腔中引起的機械應力，并實現(xiàn)試驗終點明確化，采用小球法，待小球掉落時測定口溶膜的體外崩解時限。Preis 等[18]發(fā)現(xiàn)在口溶膜上附一3 g 左右的重物，測定體外崩解時限的方法，具有明確的試驗終點及良好的數(shù)據(jù)重復性，且據(jù)實驗結果發(fā)現(xiàn)重物重量的波動并未對崩解時限數(shù)據(jù)產生明顯影響。基于此，本研究對該裝置進行簡化，采用附重物式垂直液面崩解法、不附重物式垂直液面崩解法兩種方法測定口溶膜的體外崩解時限，通過附/不附3 g 重物，觀察浸沒在水中部分的口溶膜掉落底部的時間記為體外崩解時限。
在不同的研究中，這些方法分別被用于測定不同口溶膜產品的崩解時限，但很少有研究同時采用不同的方法來評價口溶膜的崩解時限，因此，尚不清楚哪種方法是口溶膜崩解時限評價的最適合方法。本研究旨在以具有不同崩解時間的口溶膜為研究對象，比較上述多種不同的體外崩解時限測定方法，并分別與體內崩解時間進行相關性分析，討論各種方法的優(yōu)缺點和適用性，優(yōu)選出與體內崩解時限相關性更強、分辨率更高、重復性更好的體外崩解時限測定方法，以期為確立一種口溶膜標準化的體外崩解時限測定方法提供參考。
一、材料與方法
儀器 測厚儀（濟南蘭光機電技術有限公司）；智能崩解時限測定儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）。
藥物與試劑 采用溶劑澆鑄法制備的不同厚度的西甲硅油口溶膜（涂布厚度分別為0.4 mm（尺寸為20 mm×30 mm）、0.5 mm（尺寸為20 mm×24 mm）、0.6mm（尺寸為20 mm×20 mm）、0.7 mm（尺寸為20 mm×16 mm），處方及其他工藝均一致，規(guī)格均為40 mg/片）。
口溶膜片厚的測定 如圖1 所示，利用測厚儀按位置1、2、3、4、5 的順序依次檢測口溶膜5 個位置的厚度，將5 個位置厚度的平均值記為本片口溶膜的片厚，各批次口溶膜均重復測定6 片。
體外崩解時限的測定
不附重物式垂直液面崩解法：如圖2A 所示，取本品1 片，將口溶膜的上邊緣用鑷子夾住，部分垂直浸入250 mL 燒杯里的純化水中（溫度為37±1 ℃，燒杯中水體積約170 mL），使得約一半的口溶膜在液面以下。口溶膜接觸水面開始計時，浸入水中部分的口溶膜掉落到燒杯底部的時間視為體外崩解時限。
附重物式垂直液面崩解法：如圖2B 所示，取本品1 片，將口溶膜的上邊緣用鑷子夾住，下邊緣附一重約3 g 的夾子，部分垂直浸入250 mL 燒杯里的純化水中（溫度為37 ℃±1 ℃，燒杯中水體積約170 mL），使得一半的口溶膜恰好在液面以下。口溶膜接觸水面開始計時，夾子掉落到燒杯底部的時間視為體外崩解時限。
藥典崩解儀法：用升降式崩解儀測定口溶膜的崩解時限，主要結構為一能升降的金屬支架與下端鑲有篩網的自制吊籃（圖2C）。升降的金屬支架上下移動距離為55 mm±2 mm，往返頻率為每分鐘30 次。自制吊籃含上下兩層篩網（孔徑2 mm），內部尺寸為4 cm×3 cm。取本品1 片，夾在兩層篩網中間，將吊籃通過上端的不銹鋼軸懸掛于支架上，浸入1 L 燒杯中，并調節(jié)吊籃位置使其下降至低點時篩網距燒杯底部25 mm，燒杯內盛有溫度為37±1 ℃的純化水約900 mL，調節(jié)水位高度使吊籃上升至高點時篩網在水面下15 mm 處，吊籃頂部不可浸沒于溶液中。啟動崩解儀進行測定，樣品完全崩解并通過篩網所需時間視為體外崩解時限。
小球法：如圖2D 所示，取本品一片，固定于中空裝置頂部，口溶膜表面滴900 μL 純化水（37±1 ℃），隨后將不銹鋼球（直徑10 mm，重約4 g）放在口溶膜表面，模擬舌頭的力。不銹鋼球穿破口溶膜，落入底部的時間視為體外崩解時限。
培養(yǎng)皿法：如圖2E 所示，取本品一片，平穩(wěn)漂浮于盛有50 mL 純化水（37±1 ℃）的培養(yǎng)皿（底部外直徑9.5 cm，厚度1.8 cm）中。將口溶膜分散成微小粒子所需的時間視為體外崩解時限。
海綿法： 如圖2F 所示，將一塊海綿（7 cm×10 cm×3 cm）完全浸潤于盛有250 mL 純化水（溫度為37±1 ℃）的器皿（底部外直徑15.0 cm，厚度3.0 cm）中。取本品一片，平穩(wěn)放置于漂浮于純化水中的海綿塊上，口溶膜完全消失所需的時間視為體外崩解時限。
體內崩解時限的測定 采用健康成人受試者口嘗試驗的方式評價不同厚度西甲硅油口溶膜的崩解時限。本試驗按厚度逐次增大的順序將西甲硅油口溶膜分配給受試者進行口嘗。試驗對象為6 位健康志愿者（年齡：20~40 歲；男女比例：1:1），給藥劑量為20 mg 西甲硅油。具體實驗步驟如下：每位志愿者在每次嘗試前用純凈水漱口3 次后，將產品放于舌頭上開始計時，過程中不吞咽、不咀嚼，至在口中完全溶化，即感覺不到有片狀物的時間視為體內崩解時限。試驗結束后，將口中溶化的藥物吐出。本文成人口嘗試驗屬于研究性質的臨床試驗，已按照藥物臨床試驗質量管理規(guī)范的倫理要求，經所有受試者知情同意。
數(shù)據(jù)分析方法 使用Origin 2018 軟件對數(shù)據(jù)進行分析，所有數(shù)據(jù)均表示為平均值±標準差。
二、結果
1 不同厚度口溶膜的片厚測定
采用溶劑澆鑄法制備了4 種不同厚度的西甲硅油口溶膜，涂布厚度分別為0.4、0.5、0.6 和0.7 mm，處方及其他工藝均一致（規(guī)格均為40 mg/片）。不同厚度的口溶膜的片厚測定結果見表1。由結果可知，隨著涂布厚度的增加，口溶膜片厚逐漸增大。4 種口溶膜的組成完全相同，僅有厚度差異；不同的厚度導致不同的崩解時限，厚度越大，崩解越慢。這4 種不同厚度的西甲硅油口溶膜適合作為口溶膜崩解時限測定方法對比研究的模型藥物。
2 體外崩解時限的測定
將84、102、129、157 μm 的西甲硅油口溶膜按照上述6 種體外崩解時限測定方法進行試驗，每種處方測定6 片，分別取平均值，測得結果見表2。在測定過程中發(fā)現(xiàn)，附重物式垂直液面崩解法及小球法試驗終點最容易判斷，分辨率高。藥典崩解儀法測定體外崩解時限時，口溶膜崩解后，介質易渾濁，不太容易判斷崩解終點。不附重物式垂直液面崩解法在測定過程中，介質液面下的口溶膜軟化后易漂浮在液面上，導致口溶膜崩解變緩。培養(yǎng)皿法及海綿法在測定過程中，口溶膜分散成微小粒子或完全消失的狀態(tài)肉眼觀察有一定偏差，不易辨別。上述4種方法均影響試驗終點的判斷，分辨率較低。
由測定結果可知，不同體外崩解時限測定方法中口溶膜厚度增大，相應的體外崩解時限均不斷增加。其中，采用培養(yǎng)皿法及海綿法測定片厚較大的口溶膜體外崩解時限時，可能會出現(xiàn)長時間無法完全崩解的現(xiàn)象，因此不適用于片厚太大的口溶膜體外崩解時限的測定。與其他5 種體外崩解時限測定方法相比，附重物式垂直液面崩解法標準差最低，在測定體外崩解時限時具有良好的重復性。
3 體內崩解時限測定結果
采用健康成人受試者口嘗法直觀檢測本產品的體內崩解時限，可以反映患者服用本產品時的順應性。結果見表3，隨著西甲硅油口溶膜厚度的不斷增加，體內崩解時限不斷增大，平均值在25.67~60.50 s 內。
4 體內外相關性分析
對于不同厚度的西甲硅油口溶膜，采用6 種崩解時限測定方法所測得的體外崩解時限結果與體內崩解時限結果的相關性分析結果見表4。從結果中可知，附重物式垂直液面崩解法測定的試驗結果與體內崩解試驗結果的相關性最好，表明該方法測得的崩解時限結果可直觀反映體內崩解情況，表現(xiàn)出良好的體內外相關性。不附重物式垂直液面崩解法和藥典崩解儀法測得的結果與體內崩解時限的相關性較好；小球法的體內外相關性稍差；培養(yǎng)皿法和海綿法的體內外相關性較差。值得注意的是，只考慮84、102 和129 μm 這3 種厚度的口溶膜時，海綿法的體內外相關性非常好，表明該方法適用于口溶膜厚度不太大、崩解較快的口溶膜樣品的崩解時限檢測。
三、討論
口溶膜的服用方式是將其放在舌頭上、至溶化后吞咽，口溶膜的溶化過程持續(xù)數(shù)十秒甚至更長。從口溶膜的服用方式可知，口溶膜在口腔中的崩解時間是影響其口感和患者服藥依從性的關鍵指標。在本研究中，西甲硅油口溶膜的體內崩解時限平均值在25.67~60.50 s 內，口嘗試驗受試者反饋約1 min 的崩解時限尚可接受，但普遍認為口溶膜的崩解時限越短，其口感越好。
由于口腔內環(huán)境復雜，口溶膜體外崩解時限測定方法較難模擬體內崩解過程，導致可能出現(xiàn)結果分辨率低、重復性差或終點判定不明確的問題。本研究對比藥典崩解儀法、培養(yǎng)皿法、海綿法、小球法及改進設計的不附重物式垂直液面崩解法、附重物式垂直液面崩解法這6 種體外崩解時限測定方法，檢測了不同厚度西甲硅油口溶膜的體外崩解時限，并與健康受試者口嘗試驗獲得的體內崩解時限結果進行相關性分析，評價體外崩解方法的體內外相關性。
口溶膜厚度與體外崩解時限呈正相關，口溶膜的厚度會影響崩解時限，特別是對于含有水溶性差藥物的口溶膜。Krull 等[19]在研究以黃原膠作為黏合劑的普魯蘭多糖口溶膜中，發(fā)現(xiàn)厚度從26.2 μm 增加到123.2 μm 時，藥物溶解速度明顯減慢。
采用培養(yǎng)皿法和海綿法測定片厚較大的口溶膜體外崩解時限時，口溶膜長時間無法完全崩解，因此這兩種方法不適用于測定此類厚度較大、崩解較慢的口溶膜的體外崩解時限。崩解時限檢測終點判斷的難易程度，可能是影響檢測方法體內外相關性的原因之一。研究發(fā)現(xiàn)，附重物式垂直液面崩解法及小球法確定崩解結束的標志均為重物落下，試驗終點最容易判斷，分辨率最高；不附重物式垂直液面崩解法、藥典崩解儀法、培養(yǎng)皿法及海綿法的崩解試驗終點模糊，一定程度上取決于主觀判斷，分辨率差。
附重物式垂直液面崩解法測定的崩解時限結果與體內崩解試驗結果最為接近，表明該方法測得的結果可較好地反映體內崩解情況，表現(xiàn)出良好的體內外相關性；其次是不附重物式垂直液面崩解法及藥典崩解儀法，而小球法的體內外相關性稍差，培養(yǎng)皿法和海綿法的體內外相關性均較差。值得注意的是，只考慮84、102 和129 μm 這3 種厚度的口溶膜時，海綿法的體內外相關性非常好，表明該方法適用于口溶膜厚度不太大、崩解較快的口溶膜樣品（129 μm 以內）的崩解時限檢測，而附重物式適用于厚度范圍更廣的口溶膜樣品的崩解時限檢測。
有研究表明人類舌頭在口腔中的作用力約為0.03 N（約3 g）[18]，本研究中改進設計的附重物式垂直液面崩解法在口溶膜底部施加3 g 左右的重物，可以在一定程度上更好地模擬人體內口腔環(huán)境（即口腔中舌頭的作用力），而且更容易判斷崩解終點，這也可能是附重物式垂直液面崩解法測定不同厚度口溶膜崩解時限均能呈現(xiàn)良好相關性的原因。
藥典崩解儀法是一種待口溶膜崩散成細顆粒時，通過目測觀察確定終點的測定方法[20]。口溶膜樣品一般面積較大，藥典崩解儀標配的吊籃玻璃管無法容納口溶膜樣品，需要對吊籃進行改造。本研究開展藥典溶出儀法檢測時，定制了適合口溶膜尺寸的吊籃，可以更方便地進行檢測；在研究過程中發(fā)現(xiàn)，藥典崩解儀法具有良好的重復性和體內外相關性，但在測定體外崩解時限時，由于口溶膜崩解過程中介質易渾濁，不太容易判斷崩解終點，分辨率較差。可以考慮對藥典崩解儀的吊籃進行改造，將口溶膜以垂直于介質液面的方式固定在吊籃玻璃筒內，并可在口溶膜的底部附加重物，從而將藥典崩解儀和附重物式垂直液面崩解法的優(yōu)勢結合起來，在發(fā)揮此藥典崩解儀法重復性好和體內外相關性強的優(yōu)勢的前提下，改善分辨性差的不足，開發(fā)出性能更加優(yōu)異的口溶膜崩解試驗裝置（方法）。
崩解時限是影響口溶膜產品質量及用藥順應性的關鍵指標，口溶膜崩解時限的各種檢測方法在終點判斷、重復性和體內外相關性等方面存在差異，在開發(fā)口溶膜產品時，需根據(jù)產品特性合理選擇崩解時限檢測方法，并在評估體內外相關性的基礎上，合理設置崩解時限的標準范圍。研究發(fā)現(xiàn)，選擇試驗終點明確、能夠更好地模擬人體內口腔環(huán)境的崩解時限檢測方法，有助于實現(xiàn)在測定不同厚度口溶膜的崩解時限時均具有較高的分辨率、重復性及體內外相關性，研究結論可為口溶膜體外崩解時限測定方法的開發(fā)和選擇提供一定的參考價值，從而更好地保障口溶膜產品在開發(fā)及生產過程中的質量持續(xù)穩(wěn)定。
