摘 要 自二十世紀(jì)八十年代雜交瘤技術(shù)建立以來(lái)，抗體制備技術(shù)取得了長(zhǎng)足的發(fā)展?？贵w是由B淋巴細(xì)胞分泌的一種免疫球蛋白，因其能與受體特異性結(jié)合而產(chǎn)生許多生物學(xué)活性，如經(jīng)典阻斷作用、中和活性、激活補(bǔ)體、通過(guò)Fc受體對(duì)靶細(xì)胞產(chǎn)生殺傷作用和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫活性等，在臨床治療中廣泛應(yīng)用?？贵w技術(shù)的發(fā)展經(jīng)歷了鼠源性單克隆抗體、嵌合抗體、人源化抗體和全人源單克隆抗體的漫長(zhǎng)歷程。從鼠源性抗體到全人源抗體的過(guò)渡中，實(shí)現(xiàn)了多種生物技術(shù)的突破，如抗體庫(kù)技術(shù)、人源化小鼠技術(shù)和B細(xì)胞克隆技術(shù)等。如今，抗體藥物在整個(gè)藥物市場(chǎng)中擁有舉足輕重的地位。十年來(lái)( 2011年1月 ～ 2021年 11月) ，已有78種單克隆抗體藥物被FDA批準(zhǔn)上市使用，廣泛分布于腫瘤領(lǐng)域、免疫性疾病領(lǐng)域、抗病原體感染領(lǐng)域、神經(jīng)系統(tǒng)和代謝性疾病領(lǐng)域。文章就單克隆抗體技術(shù)進(jìn)展和抗體藥物上市情況進(jìn)行綜述，為新型抗體的制備和藥物靶點(diǎn)的選擇提供了思路。

早在1975年，Köher和Milstlein將小鼠B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，從而開發(fā)出B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，為單克隆抗體的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)［1］。單克隆抗體的技術(shù)發(fā)展經(jīng)歷了多個(gè)階段，早期的單克隆抗體均為鼠源性單克隆抗體，由于該抗體作為異源蛋白，在人體會(huì)產(chǎn)生人抗鼠抗體( Hu- man anti-mouse antibody，HAMA) ，從而影響治療效果和產(chǎn)生較多毒副作用等被限制使用［2］。隨后，對(duì)鼠源單克隆抗體結(jié)構(gòu)進(jìn)行了改造，用人源基因序列替換鼠源的抗體恒定區(qū)，從而設(shè)計(jì)出人-鼠嵌合抗體; 進(jìn)一步使用人源互補(bǔ)決定簇( Complementarity-determining regions，CDＲ) 堿基序列替換鼠源CDＲ序列，制備出人源化抗體。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展和對(duì)抗體結(jié)構(gòu)認(rèn)識(shí)的深入，已實(shí)現(xiàn)全部堿基序列的人源化，制備了全人源單克隆抗體。

1 單克隆抗體技術(shù)

1. 1 鼠源性單克隆抗體

鼠源性單克隆抗體起源于1975年，Köhler和Milstein使用仙臺(tái)病毒，將小鼠骨髓瘤細(xì)胞和小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞［1］。該雜交瘤細(xì)胞不僅能分泌抗體，還具備永生化的特性，在生物技術(shù)領(lǐng)域具有里程碑意義。

1. 2 嵌合抗體

抗體的可變區(qū)( V) 是特異性識(shí)別抗原的位點(diǎn)，而恒定區(qū)( C) 與抗原識(shí)別無(wú)關(guān)。20世紀(jì)80年代后期，為解決鼠源性單抗在人體使用時(shí)產(chǎn)生的HAMA等毒副作用，科學(xué)家們將鼠源性單抗恒定區(qū)基因序列替換成人的基因序列，制備出人-鼠嵌合抗體。

Li Gui等［3］報(bào)道，使用人鼠嵌合抗CD20單克隆抗體( SCT400) 治療非霍奇金淋巴瘤取得了良好效果。Zhang Z等報(bào)道，Metuzumab在小鼠、大鼠和食蟹猴中具有抗非小細(xì)胞肺癌的效果。Metuzumab是抗CD147的人-鼠嵌合 IgG1單克隆抗體［4］。

1. 3 人源化抗體

嵌合抗體雖然將恒定區(qū)序列人源化，但仍保留約30%的鼠源序列。對(duì)抗體的可變區(qū)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)論輕鏈和重鏈，與抗原特異性識(shí)別主要由6個(gè)CDＲ決定，而可變區(qū)的其它序列僅為支架作用，且具有保守型。將鼠源CDＲ序列移植到人的抗體骨架上，便形成了人源化抗體。

在一項(xiàng)臨床1B期試驗(yàn)中［5］，北京大學(xué)腫瘤醫(yī)院郭軍團(tuán)隊(duì)證實(shí)Toripalimab 聯(lián)合Axitinib對(duì)治療轉(zhuǎn)移性黏膜黑色素瘤具有明顯效果。Toripalimab是一種人源化抗PD-1的IgG4單克隆抗體，Axitinib是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子( VEGF) 抑制劑，兩者聯(lián)合使用在晚期黑色素瘤的治療中取得了初步療效。另一項(xiàng)研究證實(shí)，人源化雙特異性抗體Emicizumab ( AVE910) 每周一次皮下注射后可顯著降低嚴(yán)重血友病 A患者的出血率，可降低輸入凝血因子Ⅷ而帶來(lái)的嚴(yán)重負(fù)擔(dān)和抗Ⅷ因子抗體的形成［6］。

1. 4 全人源單克隆抗體

在20世紀(jì)末，科學(xué)家們嘗試使用全部人源的序列制備抗體，從而誕生了全人源單克隆抗體。當(dāng)前全人源抗體技術(shù)主要包括抗體庫(kù)技術(shù)、人源化小鼠技術(shù)和B細(xì)胞克隆技術(shù)。

1. 4. 1 抗體庫(kù)技術(shù)   抗體庫(kù)技術(shù)是指通過(guò)DNA重組克隆技術(shù)擴(kuò)增出B細(xì)胞中全套抗體可變區(qū)序列，再將原核生物的前導(dǎo)序列拼接到抗體分子可變區(qū)的氨基端，由于原核生物周質(zhì)腔的環(huán)境與真核細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)類似，抗體分子片段可在周質(zhì)腔中折疊，形成具有抗原結(jié)合能力的異二聚體結(jié)構(gòu)，從而可篩選出具有特定結(jié)合能力的抗體。經(jīng)過(guò)對(duì)抗體表達(dá)系統(tǒng)深入研究，逐漸形成了噬菌體展示技術(shù)、酵母展示技術(shù)、核糖體展示技術(shù)以及哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面展示技術(shù)等。

早在1985年，Smith首次將外源基因插入絲狀噬菌體f1的Ⅲ基因中，創(chuàng)建了噬菌體展示技術(shù)［7］。Yun S等在篩選人表皮生長(zhǎng)因子受體2( HEＲ2) 時(shí)，通過(guò)將HEＲ2固定在二氧化硅包被的磁珠( MPs) 進(jìn)行陽(yáng)性篩選，可顯著提高篩選出的HEＲ2的親和力［8］。Shukla GS等利用靜脈輸入ScFv單鏈抗體噬菌體文庫(kù)的方式，首次報(bào)道了在Ⅳ期腫瘤患者體內(nèi)篩選的特異性結(jié)合抗體的新方法，成功發(fā)現(xiàn)克隆07-2355與已報(bào)道的IL-17A具有高度同源性，為噬菌體庫(kù)的體內(nèi)篩選提供了一種新思路［9］。

1997年，Boder和 Wittrup利用外源基因與凝集素C端編碼序列重組，首次建立了酵母展示系統(tǒng)。Zhao JZ等［10］報(bào)道，利用抗傳染性造血壞死病毒抗體的可變區(qū)作為靶向展示蛋白，將酵母來(lái)源的ScFv展示在酵母表面，再通過(guò)人工錨定的方法將大腸桿菌來(lái)源的ScFv也展示在同一酵母上，可顯著提高酵母表面的總ScFv水平。

Hanes和Plückthun于1997年首次建立了核糖體展示技術(shù)( Ｒibosome display technology，ＲDT) ［11］。核糖體展示技術(shù)相對(duì)噬菌體展示技術(shù)和酵母展示技術(shù)，具有建庫(kù)簡(jiǎn)單、庫(kù)容量大、篩選方式簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。Lagoutte P等［12］ 利用核糖體展示技術(shù)成功篩選出與CTX-M15具有高度親和力的蛋白分子。

Akamatsu首次利用哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面展示技術(shù)進(jìn)行的篩選，并成功獲得特異性抗體［13］。Bruun TH等報(bào)道利用一個(gè)嵌合HIV-1 Env模型庫(kù)，成功篩選出與Env具有高度親和性的抗體447-52D和HGN194，該技術(shù)可指導(dǎo)鑒定具有優(yōu)化抗原特性的Env變種，可作為候選疫苗使用［14］。

1. 4. 2 人源化小鼠技術(shù)   人源化小鼠抗體技術(shù)是指利用基因工程技術(shù)，將動(dòng)物體內(nèi)免疫球蛋白基因替換成人類免疫球蛋白基因，從而在動(dòng)物體內(nèi)直接表達(dá)全人源抗體蛋白。1983年，Brinster等就將重排后具有功能的人的免疫球蛋白κ 基因采用顯微注射方式注入小鼠卵細(xì)胞，制備出能在脾臟特異表達(dá)免疫球蛋白 κ 基因的轉(zhuǎn)基因小鼠，開啟了人源化小鼠在免疫學(xué)領(lǐng)域的研究［15］。

第一 代人源化小鼠是由Brüggemann于1989年 報(bào)道［16］，是直接將人的免疫球蛋白基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物體內(nèi)，一般只能轉(zhuǎn)入5000kb以下的基因片段，轉(zhuǎn)入基因片段的調(diào)控受到限制，重排多樣性也受到制約［17］; 第二代人源化小鼠是在第一代的基礎(chǔ)上，利用胚胎干細(xì)胞和體內(nèi)同源重組等技術(shù)，分多次將完整的人免疫球基因轉(zhuǎn)入小鼠體內(nèi)，有利于抗體的重排選擇; 由于轉(zhuǎn)入的人源基因序列對(duì)鼠B細(xì)胞的發(fā)育、抗體類型轉(zhuǎn)換、抗體親和力成熟有一定的影響; 第三代人源化小鼠，僅將人的免疫球蛋白V區(qū)、D區(qū)和J區(qū)轉(zhuǎn)入替換小鼠的免疫球蛋白V區(qū)、D區(qū)和J區(qū)，解決了早期B細(xì)胞發(fā)育的問(wèn)題［18］，再經(jīng)二次改造，形成全人源抗體。

當(dāng)前人源化小鼠技術(shù)相對(duì)成熟，利用該技術(shù)制備的全人源抗體也越來(lái)越多的被批準(zhǔn)上市。全球有幾家公司已成功培育出相對(duì)成熟的人源化小鼠品系，如 Cell Genesys公司的XenoMouse小鼠、美國(guó)Medarex公司的UltiMab小鼠、Harbour公司的H2L2和HCAB小鼠、OmniAb公司的OmniMouse小 鼠、美國(guó)Ｒegen-eron公司的VelocImmune小鼠等［19-22］。

1. 4. 3 B細(xì)胞克隆技術(shù)單個(gè)B細(xì)胞分選制備抗體是指從人外周血或骨髓中樣本中，采用特定的抗原標(biāo)記進(jìn)行染色，使用流式細(xì)胞分選技術(shù)篩選出單個(gè) B 細(xì)胞，通過(guò)裂解、逆轉(zhuǎn)錄、巢式PCＲ或3'ＲACE ( Ｒapid-amplification of cDNA ends) 技術(shù)分別擴(kuò)增出抗體的重鏈和輕鏈序列，再重組至適宜載體進(jìn)行表達(dá)的過(guò)程。

Ｒudkin FM等［23］報(bào)道利用單個(gè)人B細(xì)胞，制備出抗念珠菌的單克隆抗體，對(duì)傳播性念珠菌的預(yù)防具有保護(hù)作用。Alberto C等［24］報(bào)道，從一名感染埃博拉病毒( EBOV) 的人類幸存者中采用單個(gè)B細(xì)胞技術(shù)，擴(kuò)增出抗體的重鏈和輕鏈基因序列，并表達(dá)形成了具有中和能力的單克隆抗體mAb114。2019年，新型冠狀病毒被報(bào)道在人群中流行，目前已造成世界范圍內(nèi)傳播，該病毒表面刺突糖蛋白( S) 的受體結(jié)合域( ＲBD) 能與人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2( ACE2) 結(jié)合，導(dǎo)致嚴(yán)重呼吸道疾病和肺炎。Wu Y等［25］報(bào)道，運(yùn)用單個(gè)B細(xì)胞抗體擴(kuò)增技術(shù)，從一名康復(fù)期患者身上分離出全人源單克隆抗體B38和 H4 能阻斷病毒S蛋白ＲBD和細(xì)胞受體ACE2結(jié)合，并在小鼠模型上證實(shí)，該抗體能降低感染肺部的病毒滴度，從而具有廣泛的治療前景。

2  單克隆抗體藥物獲批上市情況

2011～2021年，十年中有78種單克隆抗體藥物在美國(guó)FDA獲批上市。其中人源化單克隆抗體32種，占41. 03% ;全人源單克隆抗體29種，占37. 18% ; 人鼠嵌合抗體5種， 占6. 41% ; 此外還有10種抗體藥物偶聯(lián)物( Antibody-drug conjugate，ADC) ，占12. 82% 和2種雙特異性抗體( Bispecific antibody) ，占2. 56% ( 圖 1) 。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的深入研究，抗體藥物的應(yīng)用已涵蓋腫瘤領(lǐng)域、免疫性疾病領(lǐng)域、病原體感染性疾病、代謝性疾病、遺傳性疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病等領(lǐng)域。單克隆抗體藥物識(shí)別的靶點(diǎn) 也 越 來(lái) 越 多 的 被 報(bào) 道，如免疫檢查點(diǎn)抑制劑PD-1、PD-L1、CTLA4 等，腫 瘤 相 關(guān) 抗 原GD2、HEＲ2、 VEGFＲ等，細(xì)胞因子和趨化因子IL-6、IL-17A、IL-23、 CD19、CCＲ4等［26-29］( 表 1) 。

2. 1 腫瘤領(lǐng)域

腫瘤治療領(lǐng)域一直是單克隆抗體藥物研發(fā)的主要方向，十年來(lái)，有34種治療腫瘤的單克隆抗體藥物獲批上市，占總上市單克隆抗體藥物的43. 59% 。單克隆抗體治療的腫瘤類型主要集中于乳腺癌、骨髓瘤、B細(xì)胞淋巴瘤、膀胱癌和黑色素瘤等，此外還包括神經(jīng)母細(xì)胞瘤、鱗狀細(xì)胞癌、毛細(xì)胞白血病、軟組織肉瘤、非小細(xì)胞肺癌、胃癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤以及霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤等。其中治療乳腺癌的單克隆抗體治療靶點(diǎn)主要為HEＲ2，包括 Margetu- ximab、Fam-trastuzumab deruxtecan-nxki、Ado-trastuzumab emtansine 和 Pertuzumab，此 外 還 包 括 針 對(duì)Trop-2靶 點(diǎn) 的ADC 藥物 Sacituzumab govitecan-hziy。治療骨髓瘤的單克隆抗體的種類和針對(duì)靶點(diǎn)比較豐富，包括靶向BCMA的ADC抗體藥物Belantamab mafodotin-blmf、靶向CD38的人鼠嵌合抗體Isatuximab、靶向 SLAMF7 的人源化抗體Elotuzumab以及靶向CD38的全人源抗體Daratumumab。治療B細(xì)胞淋巴瘤的單克隆抗體包括靶向CD19的人源化抗體Tafasitamab- cxix、靶向CD79b的ADC抗體藥物Polatuzumab vedotin-piiq和靶向PD-1 的人源化抗體Pembrolizumab。值得注意的是， 2014年12月3日，F(xiàn)DA批準(zhǔn)了抗體藥物Blinatumomab上市，用于治療B細(xì)胞淋巴瘤。此抗體藥物是首例獲批的雙特異性抗體藥物，同時(shí)靶向CD19和CD3［30］。治療膀胱癌的抗體藥物包括靶向PD-L1的全人源抗體Durvalumab和人源化抗體 Atezolizumab，以及靶向Nectin-4的ADC藥物Enfortumab vedotin-ejfv。治療黑色素瘤的單克隆抗體藥物上市較早，均為免疫檢查點(diǎn)抑制劑，包括2014年12月22日上市的靶向PD-1的全人源抗體Nivolumab和2011年3月 25日上市的靶向CTLA-4的全人源抗體Ipilimumab。

除此之外，還有治療其它十余種腫瘤的單克隆抗體藥物獲批上市，針對(duì)的治療靶點(diǎn)和抗體種類也不盡相同。比如靶向GD2的人源化抗體Naxitamab-gqgk( 治療神經(jīng)母細(xì)胞瘤) 和人鼠嵌合抗體Dinutuximab( 治療成神經(jīng)細(xì)胞瘤) ;靶向 CD22的人源化抗體Moxetumomab pasudotox-tdfk( 毛細(xì)胞白血病) 和 ADC 抗體藥物Inotuzumab ozogamicin( 治療急性淋巴細(xì)胞白血病) ; 靶向 PDGFＲ-α的全人源抗體Olara- tumab( 治療軟組織肉瘤) ; 靶向EGFＲ的全人源抗體 Necitu- mumab( 治療非小細(xì)胞肺癌) ; 靶向VEGFＲ2的全人源抗體Ｒamucirumab( 治療非小細(xì)胞肺癌) 以及靶向CD30的ADC抗體藥物 Brentuximab vedotin( 治療霍奇金淋巴瘤) 和靶向CCＲ4的人源化抗體 Mogamulizumab-kpkc( 治療非霍奇金淋巴瘤) 等。

2. 2 免疫性疾病領(lǐng)域

免疫性疾病的治療領(lǐng)域是單克隆抗體藥物開發(fā)的第二大熱點(diǎn)，十年來(lái)，已有 17種單克隆抗體藥物獲批上市，占總上市單克隆抗體藥物的21. 79% 。單克隆抗體治療免疫性疾病的主要類型包括斑塊狀銀屑病、重癥哮喘和多發(fā)硬化癥，此外還包括淋巴組織細(xì)胞增生、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、過(guò)敏性皮炎、潰瘍性結(jié)腸炎和紅斑狼瘡。其中，治療斑塊狀銀屑病的單克隆抗體主要靶向IL-23和IL-17A，包括靶向IL-23的人源化抗體Ｒisankizumab-rzaa、人源化抗體 Tildrakizumab 和全人源抗體 Guselkumab; 靶向IL-17A的全人源抗體 Broda- lumab、人源化抗體Ixekizumab和全人源抗體Secukinumab。治療哮喘的單克隆抗體均為靶向IL-5的人源化抗體，包括Benralizumab、Ｒeslizumab和Mepolizumab。治療多發(fā)硬化的單克隆抗體包括靶向CD20的人源化抗體Ocrelizumab和靶向IL-2Ｒα的人源化抗體Caclizumab。

除此之外，在免疫性疾病的單克隆抗體治療領(lǐng)域，還有靶向INF-γ的全人源抗體Emapalumab-lzsgemapalumab-lzsg ( 治療淋巴組織細(xì)胞增生) 、靶向 IL-6的全人源抗體 Sari- lumab( 治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎) 、靶向 IL-4 的全人源抗體Dupi- lumab( 治療過(guò)敏性皮炎) 、靶向α4β7 integrin的人源化抗體Vedolizumab( 治療潰瘍性結(jié)腸炎) 和靶向BLyS 的全人源抗體 Belimumab( 治療紅斑狼瘡) 等獲批上市。

2. 3 病原體感染性疾病領(lǐng)域

單克隆抗體治療病原體感染性疾病是最直接有效的手段。十年來(lái)，有6種單克隆抗體藥物獲批上市，占總上市單克隆抗體藥物的7. 69% 。治療病原體感染性疾病的單克隆抗體獲批上市種類較少，且主要集中在烈性傳染性疾病，包括治療埃博拉的全人源抗體Ansuvimab-zykl 和Atoltivimab， Maftivimab，Odesivimab-ebgn，直接靶向埃博拉病毒或病毒的GP1蛋白; 靶向HIV-1，治療HIV的病毒感染的人源化抗體Ibalizumab-uiyk; 靶向C. difficile toxin B，治療艱難梭菌感染的全人源抗體Bezlotoxumab; 以及靶向 PA component，治療炭疽的人鼠嵌合抗體Obiltoxaximab和全人源抗體Ｒaxi- bacumab等。

2. 4 代謝性疾病領(lǐng)域

單克隆抗體藥物在代謝性疾病領(lǐng)域也有涉及。十年來(lái)，有4種抗體藥物獲批上市，占總上市單克隆抗體藥物的5. 13% 。單克隆抗體藥物在代謝性疾病治療領(lǐng)域的開發(fā)主要集中于高膽固醇血癥和甲狀腺眼病。其中治療高膽固醇血癥的靶點(diǎn)為PCSK9和ANGPTL3，上市的抗體藥物包括靶向PCSK9的全人源抗體 Evolocumab和Alirocumab，以及靶向ANGPTL3的全人源抗體 Evinacumab-dgnb。治療甲狀腺眼病的單克隆抗體為靶向IGF-1Ｒ的全人源抗體Teprotu- mumab-trbw。

2. 5 神經(jīng)性疾病和遺傳性疾病領(lǐng)域

單克隆抗體在神經(jīng)性疾病和遺傳性疾病領(lǐng)域均有藥物獲批上市。十年來(lái)，分別有7種治療神經(jīng)性疾病的單克隆抗體和5種治療遺傳性疾病的單克隆抗體藥物獲批上市，分別占已上市單克隆抗體藥物的8. 97% 和6. 41% 。

在神經(jīng)性疾病領(lǐng)域，已上市的單克隆抗體藥物主要用于偏頭痛和視神經(jīng)脊髓炎的治療。其中治療偏頭痛的藥物均以CGＲP為靶點(diǎn)，包括人源化抗體 Eptinezumab-jjmr、Galcane- zumab-gnlm、Fremanezumab-vfrm和 全 人 源 抗 體 Erenumab- aooe。治療視神經(jīng)脊髓炎的單克隆抗體藥物包括靶向 IL-6的人源化抗體 Satralizumab-mwge 和靶向CD19的人源化抗體Inebilizumab-cdon。

在遺傳性疾病領(lǐng)域，已上市的單克隆抗體藥物包括靶向P-selectin，治療鐮刀型貧血癥的人源化抗體Crizanlizumab- tmca; 靶向Blood clots，治療血小板減少性紫癜的人源化抗體Caplacizumab-yhdp; 靶向Plasma kallikrein，治療遺傳性血管水腫的全人源抗體 Lanadelumab; 靶向 FGF23，治療遺傳性佝僂病的全人源抗體Burosumab-twza 以及靶向Activated factor IX、X，治療A型血友病的人源化抗體 Emicizumab。

2. 6 新型冠狀病毒治療及其它領(lǐng)域

新型冠狀病毒( COVID-19) 在2019全球暴發(fā)流行，給世界人民健康和經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶了嚴(yán)峻考驗(yàn)?；诳贵w技術(shù)的發(fā)展，科學(xué)家們迅速研發(fā)出針對(duì)新冠病毒的治療性單克隆抗體，并在臨床治療中效果顯著。截 止2021年6月30日，已有 4種抗體獲美國(guó)FDA緊急授權(quán)使用，包括: 2020年11月21日批準(zhǔn)Ｒegeneron Pharmaceuticals 的 ＲEGEN-COV ( Casirivimab and Imdevimab) ( 重組人 IgG1 單 抗) ［31］、2021年2月9日批準(zhǔn)的 Eli Lilly 的 Bamlanivimab and Etesevimab( IgG1 單抗) ［32］、2021年5月26日批準(zhǔn)的GSK的 Sotrovimab ( 重組人IgG1κ) ［33］和2021年6月24日批準(zhǔn)的 Hoffmann-La Ｒoche 的 Actemra ( Tocilizumab) ( 重組人單抗，結(jié)合IL-6［34］) 。

此外，單克隆抗體在多種疾病類型中均有應(yīng)用，包括靶向VEGF，治療老年黃斑 的人源化抗體 Brolucizumab- dbll［35］; 靶向 Sclerostin，治療骨質(zhì)疏松的人源化抗體Ｒomosozumab-aqqg［36］; 靶向 C5，治療血紅蛋白尿的人源化抗體Ｒavulizumab［37］; 靶向Thrombin，用于逆轉(zhuǎn)抗凝血?jiǎng)┑娜嗽椿贵wIdarucizumab［38］; 以及靶向IL-6，治療Castleman病的人鼠嵌合抗體Siltuximab［39］等。

3  展望與總結(jié)

自1975年Köhler和Milstein建立雜交瘤細(xì)胞后，便開啟了單克隆抗體的研究工作。在這短短的四十年中，越來(lái)越多的單克隆抗體藥物獲批上市。此外，還有相當(dāng)一部分單克隆抗體藥物正處于臨床試驗(yàn)階段。單克隆抗體包括鼠源性單克隆抗體、人鼠嵌合抗體、人源化抗體和全人源單克隆抗體。十年來(lái)，已有 78種抗體藥物在美國(guó)FDA獲批上市( 不包括FDA緊急授權(quán)使用) ，涵蓋腫瘤領(lǐng)域、免疫性疾病領(lǐng)域、抗病原體感染領(lǐng)域、代謝性疾病領(lǐng)域、神經(jīng)系統(tǒng)性疾病和遺傳性疾病領(lǐng)域等。隨著對(duì)疾病研究的不斷深入，越來(lái)越多的治療性生物靶點(diǎn)將被揭露，單克隆抗體的應(yīng)用也越來(lái)越廣泛。此外，在如何提高抗體庫(kù)容量、提高單個(gè)B細(xì)胞擴(kuò)增效率、研究更加穩(wěn)定的人源化小鼠等方面，將成為今后抗體藥物開發(fā)的重點(diǎn)研究方向。單克隆抗體藥物也必將會(huì)是藥物研發(fā)領(lǐng)域的重要篇章，將吸引數(shù)以萬(wàn)計(jì)的科學(xué)家和億萬(wàn)經(jīng)費(fèi)的投入。