摘 要： 建立了頂空氣相色譜法同時測定10種兒童藥品中甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、正庚烷、甲苯8種有機溶劑殘留量。采用Agilent DB-624毛細管色譜柱（60 m×0.53 mm，3 μm）分離，程序升溫，進樣口溫度為200 ℃，氫火焰離子化檢測器溫度為250 ℃，頂空平衡溫度為85 ℃，平衡時間為20 min，分流比為10∶1。結果表明，8種有機溶劑能夠有效分離，在各自的質量濃度范圍內與色譜峰面積線性關系良好，相關系數不小于0.998；樣品的平均加標回收率為95.12%～101.92%，測定結果的相對標準偏差為0.44%～3.33%（n=6），檢出限為0.01～0.07 μg/mL。18批次樣品中有11批次檢出乙醇，檢出率61.11%，其他成分均未檢出。該方法操作簡單、靈敏度高、快速有效，可以為兒童藥中有機溶劑的殘留測定提供依據。

關鍵詞： 頂空氣相色譜法； 頂空進樣； 殘留溶劑； 兒童藥品； 乙醇

殘留溶劑是指在藥品生產過程中使用的，但未能完全去除的有機溶劑。根據其危害程度，殘留溶劑可以分為一、二、三類，并在《中華人民共和國藥典》2020年版通則0861中有相關的限度要求。一類溶劑屬于或極度疑似為人體致癌物或是環境危害物，二類溶劑屬于可導致不可逆毒性的溶劑或屬于非遺傳性毒性動物致癌物質，三類溶劑則屬于低潛在毒性溶劑[1?2]。由此可見，藥品中殘留的有機溶劑是否能得到合理有效的控制，直接關系到藥品的質量可控性與安全性[3]。然而，殘留溶劑的控制和檢測存在一定的難點，因為不同藥品、不同企業對于同種藥品的生產過程中使用的有機溶劑根據實際情況可能不盡相同，所以無法建立統一的測定方法[4]。目前常見的殘留溶劑測定方法有氣相色譜法[5?8]、氣相色譜-質譜聯用法[9?14]等，該方法都能同時對一種或多種溶劑進行測定，但是卻未曾有專門針對兒童藥品進行測定的報道。兒童藥品中的有機溶劑可能是由原輔料帶來，也有可能是由藥品包裝材料中帶來，藥物的基質比較復雜。考慮到甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、正庚烷和甲苯等8種溶劑在藥品合成或藥品生產中使用頻率較高，成分的沸點較低，筆者建立頂空進樣氣相色譜法，對12種常見的兒童藥品進行有機溶劑殘留的測定，以確保兒童藥品的安全、有效和質量可控。

1、 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：GC-2010型，配FID 檢測器，日本島津公司。

頂空進樣器：HSS 8650型，意大利DANI公司。

電子天平：XS205DU型，感量為0.01 mg，瑞士梅特勒-托利多公司。

二甲基亞砜：色譜純，批號2021603，天津市光復精細化工研究所。

甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、正庚烷、甲苯：均為色譜純，德國默克集團。

健兒消食口服液、健脾糖漿、小兒止咳糖漿、小兒五維賴氨酸糖漿、小兒感冒顆粒、小兒退熱口服液、五維他口服溶液、小兒咳喘靈口服液、小兒氨酚黃那敏顆粒、小兒化痰止咳顆粒、小兒咳喘靈顆粒、復方甘草口服溶液，以上均為南寧市售藥品。

1.2 色譜條件

色譜柱：Agilent DB-624石英毛細管柱(60 m×0.53 mm，3 μm，美國安捷倫科技有限公司)；柱溫：程序升溫，起始溫度為40 ℃，保持8 min，以8 ℃/min升溫至120 ℃，保持6 min，再以60 ℃/min升溫至200 ℃，保持5 min；進樣口溫度：200 ℃；檢測器溫度：250 ℃；載氣：氮氣，流量為2.5 mL/min；分流比：10∶1；頂空平衡時間：20 min；頂空平衡溫度：85 ℃；進樣時間：0.5 min。

1.3 溶液配制

單一對照品儲備液：分別精密稱取甲醇375 mg、乙醇625 mg、乙酸乙酯625 mg、丙酮625 mg、異丙醇625 mg、四氫呋喃90 mg、正庚烷625 mg、甲苯112 mg，分別置于不同的10 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜使溶解并稀釋至標線，搖勻，配制成質量濃度分別為37.5、62.5、62.5、62.5、62.5、9.0、62.5、11.2 mg/mL的單一對照品儲備液。

混合對照品儲備液：分別精密量取單一對照品儲備液各0.1 mL，置于同一只100 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜稀釋至標線，搖勻。

混合對照品溶液：精密量取混合對照品儲備液2 mL，置于10 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜稀釋至標線，搖勻。精密移取2 mL置于頂空瓶中，加蓋密封。

空白溶液：精密量取二甲基亞砜2 mL于20 mL頂空瓶中，加蓋密封。

系列混合標準工作溶液：精密量取混合對照品儲備液0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 mL，分別置于不同的10 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜稀釋至標線，搖勻，即得系列混合標準工作溶液。

樣品溶液：若待測的藥品為液體制劑，則精密量取0.1 mL置于20 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜稀釋至標線，搖勻，精密量取2 mL，置于頂空瓶中，加蓋密封；若待測的藥品為固體制劑，則精密稱取0.1 g，置于20 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜使溶解稀釋至標線，搖勻，精密量取2 mL，置于頂空瓶中，加蓋密封。

2、 結果與討論

2.1 色譜柱的選擇

考察了HP-FFAP (強極性色譜柱)、DB-624 (中等極性色譜柱)、DB-5 (弱極性色譜柱)三種不同極性的石英毛細管柱對8種溶劑測定結果的影響。結果表明，DB-624型色譜柱的分離效果和理論塔板數最好，靈敏度最高，因此選擇DB-624色譜柱作為工作色譜柱。

2.2 溶劑的選擇

考察了二甲基亞砜和N，N-二甲基甲酰胺作為溶劑時對測定結果的影響。在同一色譜條件下，當使用二甲基亞砜作為溶劑時，8種溶劑的色譜峰面積更大，理論塔板數更高，各成分之間的分離效果更好，因此選擇二甲基亞砜作為溶解用溶劑。

2.3 頂空平衡溫度、平衡時間、柱流量的確定

考察了不同平衡溫度(75、80、85、90 ℃)平衡20 min對測定結果的影響，發現隨著溫度升高，殘留溶劑的色譜峰面積逐漸變大，但考慮到平衡溫度過高可能導致待測組分的不穩定，所以最終選擇平衡溫度為85 ℃；同時考察了在85 ℃下不同平衡時間(10、20、25、30、35 min)對測定結果的影響，結果發現在20 min時各成分的色譜峰面積最大，故選擇平衡時間為20 min；考察了不同色譜柱流量(2.0、2.5、3.0 mL/min) 8種溶劑的出峰情況，發現柱流量越高，出峰時間越快，當柱流量為3.0 mL/min時，乙酸乙酯峰與丙酮峰無法達到基線分離。當柱流量為2.0 mL/min時，各成分出峰時間延長，乙酸乙酯與丙酮在柱溫為120 ℃時出峰，導致兩者無法達到有效分離，因此最終選擇色譜柱流量分別為2.5 mL/min。

2.4 專屬性試驗

在1.2色譜條件下，分別取空白溶劑、混合對照品溶液、加標樣品溶液依次進樣分析，色譜圖如圖1所示。從圖1中可以看出，8種溶劑色譜峰之間的分離度均大于2.0，空白溶劑對測定無干擾。該方法的專屬性符合要求。

圖1   空白溶劑、混合對照品溶液、加標樣品溶液氣相色譜圖

Fig. 1   Chromatograms of blank sample solution，standard solution and spiked sample solution

2.5 線性關系、檢出限及定量限

精密量取系列混合標準工作溶液2 mL，置于頂空瓶中，密封，進樣測定，記錄色譜峰面積，以各待測成分的質量濃度(x)為橫坐標，對應的色譜峰面積(y)為縱坐標，繪制標準曲線。取混合對照品儲備液，用二甲基亞砜逐級稀釋，測定并記錄色譜峰面積，以信噪比為3對應的溶液質量濃度作為方法檢出限，以信噪比為10對應的溶液質量濃度作為定量限。8 種溶劑的線性范圍、線性方程、相關系數、定量限和檢出限見表1。

表1   8種溶劑質量濃度的線性范圍、線性方程、相關系數、檢出限和定量限

Tab. 1   Linear ranges of the mass concentration，linear equations，correlation coefficients，limits of detection，and limits of quantification of the eight solvents

2.6 樣品加標回收與精密度試驗

取小兒止咳糖漿樣品0.1 mL，置于20 mL容量瓶中，精密加入混合對照品儲備液0.4 mL，再加入二甲基亞砜稀釋至標線，搖勻，精密量取2.0 mL，置于頂空瓶中，加蓋密封，搖勻，在1.2色譜條件下進樣測定，平行制備6份，記錄色譜峰面積并計算各種溶劑的平均回收率及相對標準偏差。樣品加標回收與精密度試驗結果見表2。由表2可知，8種溶劑的平均回收率為95.12%～101.92%，測定結果的相對標準偏差（RSD）為0.44%～3.33%(n=6)。

表2   樣品加標回收與精密度試驗結果

Tab. 2   The results of sample recovery and precision test

3、 結語

建立了頂空-氣相色譜法同時測定兒童藥品中8種有機溶劑(甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、正庚烷、甲苯)的殘留。優化了色譜柱型號、頂空平衡時間、平衡溫度以及色譜柱流量等參數條件，該方法操作簡單、靈敏度高、重現性好，可用于兒童藥品中多種溶劑殘留量的定量檢測，為保障兒童藥品的質量安全提供技術支持。

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引用本文： 鄭美玲，張明麗，胡欣怡，等. 頂空氣相色譜法同時測定兒童藥品中8種殘留溶劑［J］. 化學分析計量，2024，33（7）：18. (ZHENG Meiling, ZHANG Mingli, HU Xinyi, et al. Simultaneous determination of 8 residual solvents in children's drugs by headspace gas chromatography[J]. Chemical Analysis and Meterage, 2024, 33(7): 18.)