當藥品處方、生產工藝、生產地點和生產規模等發生變更后，最需要驗證的問題就是變更前后產品質量是否保持一致。對于口服固體制劑而言，溶出度或釋放度對比研究是比較變更前后產品相似性或差異程度的一個重要工具。為保證該對比研究能提供有效的信息，首先此項研究需要結合藥物的生物學性質及制劑特性展開，其次要采用合理的方法對研究結果進行統計分析。本文將針對普通口服制劑的溶出對比研究提出一些建議。

一、 實驗方法

為保證測定結果具有一定的統計意義，并且盡可能減少其他變量的影響，試驗中需關注以下問題：

（1）變更前后樣品測試需采用相同的儀器，盡可能在同一天進行。  

（2）一般每批樣品至少采用12個劑量單位（如片劑為12片，膠囊為12粒）進行測定。除0時外，一般至少選擇3個時間點進行測定，如5、15、30、45min，或采用其他適宜的時間間隔取樣，直到藥物溶出90%以上或達到溶出平臺，計算各時間點藥物溶出百分比，繪制每批樣品藥物溶出曲線。

（3）除0時外，第1個時間點溶出結果的變異系數不得過20%，從第2個時間點至最后1個時間點的溶出結果的變異系數應小于10%[參考文獻1]。

下面根據原料藥生物學性質的不同，分類闡述：

1．原料藥屬于高溶解性，高滲透性

此類藥物溶出比較建議首先選擇在900mL0.1N HCl中進行，可采用藥典收載的轉藍法（轉速100rpm），也可選擇藥典收載的槳法（轉速50rpm）。如果15分鐘內（一般認為餐后胃平均保留T50%是15-20分鐘）藥物溶出85%以上，則不需要再比較其他pH條件下或介質中藥物溶出情況。如果15分鐘內藥物溶出未達到85%，則需要按下述2或3對變更前后溶出行為進行比較。

2．原料藥屬于高溶解性，低滲透性

此類藥物由于滲透性低而溶解性好，藥物的滲透性是體內吸收的限速步驟，而主要不取決于制劑的溶出。因此， 一般不需要在不同PH條件下考察產品變更前后溶出情況。溶出比較研究可選擇質量標準中規定的檢查方法進行，如標準中未收載溶出度檢查方法，可選擇產品申請上市注冊時質量研究和穩定性考察中選擇的溶出度檢查方法。

3．原料藥屬于低溶解性、高滲透性

由于此類藥物滲透性高，藥物的溶出過程可能是體內吸收的限速步驟，因此，建議考察不同PH條件下變更前后產品溶出情況，可選擇水、0.1N鹽酸及pH 4.5-7.5緩沖液三種介質進行比較。對于膠囊或含明膠包衣的片劑，可采用含酶的人工胃液或人工腸液進行。如無特殊情況，溶出比較研究一般不使用含有機溶劑的介質（如乙醇-水體系）進行。如有充分的依據，介質中可使用適量的表面活性劑。如果原料藥或處方中輔料屬于PH非敏感型的，溶出曲線比較可僅采用2種緩沖體系進行。

二、統計分析方法

變更前后溶出曲線比較可采用適宜的統計學方法進行。

溶出曲線比較可采用模型依賴法，即一些用于描述藥物溶出曲線的數學模型，如線性模型、Weibull模型等。進行此類統計學比較，一般先根據變更前的代表性批次的溶出曲線，選擇最合適的模型，建議采用不超過三個參數的模型（例如線性、二次方、對數、概率和Weibull模型），再對模型的參數進行統計學比較，基于對已批準的標準批次的測試單位（例如膠囊或片）的匹配模型的參數變化設置相似區間，以測試批次和參比批次間的模型參數計算MSD，估計在兩個批次間真實差別的90%可信區間，比較可信區間和相似區間的限度。如果可信區間是在相似區間的范圍內，則認為測試批次與參比批次有相似的溶出曲線。

溶出曲線比較也可選擇非模型依賴方法，如可通過計算相似因子f2比較變更前后溶出行為的相似性，當f2數值在50-100范圍認為兩條溶出曲線是相似的。

f2=50log{[1+（1/n）t=1n（Rt-Tt）2]-0.5100}

上述公式中n為時間點（n≥3），Rt是變更前制劑藥物溶出平均百分數，Tt是變更后制劑藥物溶出平均百分數。采用相似因子比較法需滿足以下條件：

    ●  取樣時間點除0時外，至少有3個

    ●  每個處方樣品至少采用12個劑量單位

    ●  只能有一個時間點藥物溶出達到85%以上

    ●  從第2個時間點至最后1個時間點溶出結果的變異系數應小于10%

    ●保證藥物溶出90%以上或達到溶出平臺

如果藥物在15min內溶出達到85%以上，可以認為兩批產品溶出行為是相似的，不需要通過統計學方法對數據分析判定。

【附注】

1 藥物的水溶解性

主要反應藥物在生理PH條件下的溶解性情況。研究工作一般在37±1℃條件下，pH1—7.5的水性介質中進行測定，繪制被測藥物的pH—溶解度曲線。可根據藥物的離子化特性選擇pH測定點，例如，當藥物的pka為3—5時，藥物的溶解度建議在pH=pka, pH=pka+1, pH=pka-1, pH=1和pH=7.5處測定。藥典收載的緩沖溶液可用于藥物溶解度的研究。

藥物水溶解性可根據pH1—7.5范圍溶解藥物單次最大給藥劑量的介質的體積來決定。在pH1—7.5范圍，如果單次最大給藥劑量的藥物可溶于不多于250 ml的介質中，則該藥物認為是高溶解性的。

2 藥物的滲透性

藥物滲透性分類以測定藥物透過人體腸壁膜量為直接依據，而藥物在人體吸收程度（指藥物吸收比例，而不是系統生物利用度）只是間接依據。

藥物滲透性的測定可采用人體實驗方法或其他能預測藥物體內吸收程度的非人體實驗方法。人體實驗方法包括質量平衡法、絕對生物利用度法和小腸灌流法等。利用未標記穩定同位素或標記放射性同位素進行的藥物藥代動力學質量平衡研究可以反映藥物的吸收程度，但對多數藥物研究結果顯示，此方法測定結果變異程度大，一般優先考慮采用其它方法。以靜脈注射給藥為對照，測定口服給藥的絕對生物利用度某些情況下可以間接反映藥物吸收情況，如無法證明藥物在胃腸道內是否穩定的情況下，藥物吸收程度達到90%以上時，該藥物被認為是高滲透性的。其他能預測藥物體內吸收程度的非人體實驗方法也可作為判定藥物滲透性的依據，如使用適宜的動物模型進行體內或在體灌腸研究，使用人或動物腸組織切樣進行體外滲透性實驗，體外表皮單細胞培養通透性實驗。

上述實驗可參照相關技術指導原則進行。考慮藥物在透過胃腸壁膜前可能會有部分降解，為證明藥物從胃腸道消除是由于藥物透過胃腸壁膜而不是發生降解，研究中需注意考察藥物在胃腸道中的穩定性。多數情況下，一種實驗方法已經可以說明藥物的滲透性（如90%以上的藥物可在尿中回收）。當一種方法不能確定藥物的通透性時，可用兩種不同的方法。此外，藥物的化學結構或某種理化性質（如分配系數等）也可為藥物滲透性提供有用的信息。

對于前體藥物，其滲透性取決于前體藥物向藥物轉化的機制和部位。如果前藥在透過腸壁膜后轉化為藥物，則需測定前藥的滲透性；反之，如果前藥在胃腸道內已就轉化為藥物，則應測定藥物的滲透性。

【參考文獻】

1、Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms. U.S. Department of Health and Human Services. Food and Drug Administration. Center for Drug Evaluation and Research (CDER).