迷迭香純露，又名迷迭香水，是一種在化妝品和日用化工產品中廣泛使用的原料。迷迭香（Rosmarinus officinalis L.）葉和花經蒸餾后冷凝分層，上層為迷迭香精油，下層為迷迭香純露。迷迭香純露包含迷迭香葉和花經蒸餾后產生的鞣質、蛋白質、植物糖等水溶性成分，以及迷迭香精油中的部分水溶性芳香有機物和迷迭香酚類天然強抗氧化成分。然而，迷迭香純露多作為迷迭香精油的副產物進行工業廢水排放，不但浪費了資源，還造成了環境污染。迷迭香原產于地中海沿岸，被引進我國后，作為一種經濟作物在不少省份廣泛種植。迷迭香具有較多品種，且會由于降雨、溫濕度、日照、晝夜溫差、土壤等氣候和環境條件差異，導致迷迭香純露香型和成分產生差異。因此，有必要開發一種對不同品種、不同產地的迷迭香純露中的芳香性物質進行定性定量研究的方法，為迷迭香純露的開發以及推廣提供技術支撐。

      目前，迷迭香純露中微量芳香性物質的定性定量檢測研究較少，相關檢測方法主要包括直接進樣-氣相色譜法、萃取濃縮后進樣-氣相色譜法、氣相色譜-嗅覺計法、直接進樣-氣相色譜-質譜聯用法、固相微萃取-氣相色譜-質譜聯用法、頂空進樣-氣相色譜-質譜聯用法、液相色譜法，定量方法多為面積歸一化法，僅能給出各目標物的相對含量。研究人員以氣相色譜-質譜聯用法分析迷迭香純露，結合其中有機物的含量以及相關文獻，確定以24種代表性芳香性物質作為待測目標物，然后以液液萃取法將目標物濃縮到有機相中，并采用氣相色譜-氫火焰離子化檢測器（FID）法測定這24種目標物的含量。與已有的純露檢測方法相比，本方法通過外標法就能準確測定各目標物的絕對含量，且檢出限較低。

1、 試驗方法

     取少量樣品置于分液漏斗中，加入四氯化碳，振蕩萃取后靜置，收集下層有機相。重復萃取一次，合并有機相，用無水硫酸鈉脫水后按照儀器工作條件測定。

2、 結果與討論

2.1 萃取劑的選擇

     選取在水中溶解度不高、對標準品溶解性較好、密度顯著大于水的四氯化碳、三氯甲烷和二氯甲烷作為萃取劑，取空白基質10mL置于分液漏斗中，加入0.125mL混合標準儲備溶液，加入0.5mL上述萃取劑，后續操作并測定。不同萃取劑下各目標物的回收率見表1。

表1 24種目標物在3種不同萃取劑中的回收率

     由表1可知，24種目標物在四氯化碳、三氯甲烷和二氯甲烷中的回收率均較好，但是以三氯甲烷萃取時三氯甲烷色譜峰和α-蒎烯的重疊，二氯甲烷萃取時溶液容易乳化且馬鞭草烯酮的回收率較低（45.1%），因此試驗選擇四氯化碳為萃取劑。

2.2 色譜行為

     混合標準溶液的色譜圖見圖1。

     由圖1可知，24種目標物在31.0min內全部出峰，分離度均大于1.5，峰形良好。進口和國產迷迭香葉所制天然迷迭香純露樣品溶液的色譜圖見圖2。

     由圖2可知：進口迷迭香葉所制天然迷迭香純露的主要芳香性物質為1，8-桉葉素、樟腦和α-松油醇，同時還含有少量的芳樟醇、4-萜烯醇和香葉醇；國產迷迭香葉所制天然迷迭香純露的主要芳香性物質為1，8-桉葉素、樟腦和馬鞭草烯酮，同時還含有少量芳樟醇、4-萜烯醇、α-松油醇和香葉醇，說明進口及國產迷迭香葉所制的天然迷迭香純露中芳香性物質種類和含量差異較大。

2.3 標準曲線和檢出限

      按照試驗方法測定混合標準溶液系列，以各芳香性物質的質量濃度為橫坐標，對應的峰面積為縱坐標繪制標準曲線。結果顯示，各芳香性物質的質量濃度在10.0~200.0mg·L−1內和峰面積呈線性關系，其他線性參數見表2。

     在空白基質中加入混合標準溶液，以3倍信噪比（S/N）對應的質量濃度計算檢出限（3S/N），結果見表2。

表2 24種目標物的保留時間、線性參數和檢出限

2.4 精密度和回收試驗

     按照試驗方法對空白基質進行低、中、高等3個濃度水平的加標回收試驗，每個濃度水平重復測定6次，計算回收率和測定值的相對標準偏差（RSD），結果見表3。

表3 精密度和回收率試驗結果（n=6）

     由表3可知，24種目標物的回收率為80.9%~118%，測定值的RSD為 0.35%~5.0%，不同目標物的回收率差別較大，可能與目標物在四氯化碳中的溶解度與在水中溶解度的差異有關。

2.5 樣品分析

     按照試驗方法分析4批純露半成品（標記為純露半成品1~4，分別對應湖南、河南、云南和進口迷迭香葉所制純露半成品）和市售純露成品（標記為純露成品1~4），檢出結果見表4。

表4 樣品分析結果

     由表4可知：國內迷迭香種植大省湖南、河南和云南種植的迷迭香葉所制的純露半成品中芳香性物質的種類和含量差異不大，但是與進口迷迭香葉所制純露半成品中的差異十分明顯，進口迷迭香葉所制純露半成品中的芳香性物質以樟腦為主，國產迷迭香葉所制純露半成品以馬鞭草烯酮為主，推測這種差異可能與迷迭香品種不同有關。

    4種市售純露成品中檢出的目標物與國產迷迭香葉所制純露半成品中目標物種類和比例相近，主要芳香性物質均為1，8-桉葉素、樟腦、α-松油醇、馬鞭草烯酮和香葉醇，說明市售純露成品原料可能為國產迷迭香葉；市售純露成品中主要芳香性物質含量顯著低于純露半成品中的，說明市售純露成品可能是由純露半成品稀釋或者調配出來的，甚至部分產品可能是添加化學試劑調配出來的，并不是天然迷迭香純露。

3、 試驗結論

     研究人員以四氯化碳液液萃取，氣相色譜法測定迷迭香純露中常見的24種芳香性物質的含量，可為迷迭香純露香型的調試提供技術支撐。

作者：何浩1，蔣青青1，許銀玉1，蘇家佑1，上官佳1，湯娛1，潘小紅2，曹文豪3

單位：1. 湖南省產商品質量檢驗研究院；

2. 湖南省藥品檢驗檢測研究院；

3. 湖南先偉陽光生物科技有限公司

來源：《理化檢驗-化學分冊》2024年第10期