近日，陸續收到兩個β-內酰胺類藥類藥物的補充資料通知，其中均含有關于聚合物的補充研究內容，一例為補充研究，涉及內容如下：“聚合物：建議按以下研究思路繼續完善聚合物控制：請結合原料藥結構特點、制備工藝、國內外藥典及相關文獻，分析完善聚合物雜質信息”。一例為附條件批準，涉及內容如下“根據《中華人民共和國藥品管理法》、《國務院關于改革藥品醫療器械審評審批制度的意見》(國發(2015) 44號)、《關于仿制藥質量和療效一致性評價工作有關事項的公告》 (2017年第100號)和《國家藥監局關于開展化學藥品注射劑仿制藥質量和療效一致性評價工作的公告》(2020年第62號)的規定,經審查,本品通過仿制藥質量和療效一致性評價。請在本次補充申請批準后，繼續按補充資料通知相關要求完善聚合物雜質的研究,通過補充申請形式遞交相關研究資料”。從上述通知中可以看出，在β-內酰胺類抗生素/頭孢菌素類藥物的申報中，聚合物的研究需要越來越充分。

抗生素（Antibiotics），是指由微生物或高等動植物所產生的具有抗病原體或其他活性的一類次級代謝產物，主要針對“細菌有而人（或其他動植物）沒有”的機制發揮抑菌或殺菌作用。按照其化學結構，抗生素可以分為：喹諾酮類抗生素、β-內酰胺類抗生素、大環內酯類、氨基糖苷類抗生素等。在抗生素市場中，β-內酰胺類抗生素占據較大份額，包括頭孢尼西鈉、頭孢唑林鈉、頭孢美唑鈉、頭孢曲松鈉等。β-內酰胺環為四元環結構，張力較大，故較為不穩定，生成N-型或L-型聚合物或其他高分子聚合物，在臨床使用中引發速發型過敏反應，對患者危害極大，因此對β-內酰胺類抗生素藥物中的聚合物雜質進行控制就尤為重要。

在原申報資料中，參考ChP 2020年版頭孢唑肟鈉藥典標準，使用反相色譜法控制有關物質及二聚體聚合物；由于原方法只控制了二聚物，對其他聚合物雜質無控制，專屬性較差（見圖1）。我們G-10方法和TSK方法對聚合物雜質繼續進行了研究。使用優化后的G-10方法對樣品進行檢測，聚合物雜質只獲得一個色譜峰（見圖2），我們將該色譜峰使用二維切換技術切至有關物質方法，在二維有關物質色譜圖中二聚物處有雜質響應，說明聚合物雜質可以在有關物質方法中檢出，且主要雜質為二聚物雜質；將該色譜峰二維切換注入MS，獲得MS數據，證明聚合物雜質主要為二聚物雜質。將樣品使用優化后的TSK方法進行檢測，相對于G-10，檢出了較多雜質（見圖3），使用各已知雜質進行定位，對各雜質進行歸屬，將未知雜質使用二維切換技術切至有關物質方法，在二維有關物質色譜圖中二聚物處有雜質響應，說明聚合物雜質可以在有關物質方法中檢出，且主要雜質為二聚物雜質；將未知色譜峰二維切換注入質譜，獲得MS數據，證明未知雜質為二聚物雜質。G-10方法和TSK方法獲得的質譜數據一致，證明聚合物雜質主要為二聚物雜質；通過對樣品的多批次檢測，證明了有關物質方法、G-10方法和TSK方法聚合物雜質檢出能力基本一致。

在原申報資料中，參考ChP 2020年版頭孢唑肟鈉藥典標準，使用反相色譜法控制有關物質及二聚體聚合物；由于原方法只控制了二聚物，對其他聚合物雜質無控制，專屬性較差（見圖1）。我們G-10方法和TSK方法對聚合物雜質繼續進行了研究。使用優化后的G-10方法對樣品進行檢測，聚合物雜質只獲得一個色譜峰（見圖2），我們將該色譜峰使用二維切換技術切至有關物質方法，在二維有關物質色譜圖中二聚物處有雜質響應，說明聚合物雜質可以在有關物質方法中檢出，且主要雜質為二聚物雜質；將該色譜峰二維切換注入MS，獲得MS數據，證明聚合物雜質主要為二聚物雜質。將樣品使用優化后的TSK方法進行檢測，相對于G-10，檢出了較多雜質（見圖3），使用各已知雜質進行定位，對各雜質進行歸屬，將未知雜質使用二維切換技術切至有關物質方法，在二維有關物質色譜圖中二聚物處有雜質響應，說明聚合物雜質可以在有關物質方法中檢出，且主要雜質為二聚物雜質；將未知色譜峰二維切換注入質譜，獲得MS數據，證明未知雜質為二聚物雜質。G-10方法和TSK方法獲得的質譜數據一致，證明聚合物雜質主要為二聚物雜質；通過對樣品的多批次檢測，證明了有關物質方法、G-10方法和TSK方法聚合物雜質檢出能力基本一致。

綜上，由于G-10方法和TSK方法控制的聚合物均能在有關物質項下進行有效控制，該聚合物雜質主要為二聚物雜質。因此G-10方法和TSK方法暫不訂入質量標準。繼續將有關物質方法訂入質量標準以控制有關雜質及聚合物雜質。并使用上述方法對比檢測自研產品和參比制劑產品，自制產品和參比制劑產品檢測結果基本一致。該補充研究資料獲得了批準。

圖1 聚合物檢測色譜圖（反相色譜法）

圖2 聚合物檢測色譜圖（G-10色譜柱）

圖3聚合物檢測色譜圖（TSK色譜柱）

當前，研究β-內酰胺類抗生素/頭孢菌素類藥物聚合物雜質的方法主要是反相色譜法，G-10方法和TSK方法。反相色譜法主要對有關物質進行控制，可兼顧聚合物雜質，G-10方法和TSK方法可對聚合物雜質進行控制；不論使用何種方法控制聚合物雜質，都應該優化色譜條件，篩選可以分離檢出更多雜質以及主峰與相鄰雜質分離度、雜質間分離度更好地色譜條件；完善聚合物信息，研究包括分子量低于主成分及分子量介于主成分與二聚體之間的聚合雜質、二聚體、三聚體或多聚體等聚合物雜質；并結合多批次檢測數據制訂聚合物雜質限度。只有按照上述思路對聚合物雜質進行詳細研究，才能避免因聚合物帶來的補充研究工作。

參考文獻

[1] Feng Ji, Wenlong Zhangb, Meng Wang, et al. Characterization of polymerized impurities in cefoxitin sodium for injection by two-dimensional chromatography coupled with time-of-flight mass spectrometry[J]. Talanta，2023 Nov 11.