摘  要 / Abstract

為制定并完善符合中藥特點的中藥質量控制體系，國家藥品監督管理局藥品審評中心于2020年12月17日發布了《中藥生物效應檢測研究技術指導原則(試行)》，本文結合起草背景，對指導原則進行解讀，闡述本指導原則制定的目的、意義和內容。

In order to establish a quality control system for traditional Chinese medicine (TCM) in line with its characteristics,the Center for Drug Evaluation of NMPA issued the Guidance on Biological Assay for Traditional Chinese Medicine (Interim) on Dec.17,2020.This article interprets the guidance by introducing its background,purpose,significance and contents.

關 鍵 詞 / Key words

中藥；生物效應；生物檢測；指導原則；質量控制

traditional Chinese medicine; potency; biological assay; guidance; quality control

當前中藥質量控制主要采用理化方法檢測，由于中藥化學組成復雜，活性/毒性成份大多不明確，采用理化檢測方法等在有效性和安全性的控制上可能存在不足，較難保證中藥的質量可控性。生物效應檢測方法具有與中藥有效性、安全性相關聯的優勢，是一種符合中藥特點的質量控制方法。國家藥品監督管理局藥品審評中心于2018年啟動《中藥生物效應檢測研究技術指導原則(試行)》[1](以下簡稱《指導原則》)制定工作，經起草專家小組多次研討，通過多種方式廣泛征求意見，凝聚業界共識，于2020年12月17日正式發布。

指導原則中的生物效應檢測是指利用藥物對試驗系所產生的生物效應，運用特定的實驗設計，反映藥物有效性、安全性的一種方法，從而達到評價和控制藥品質量的目的。旨在鼓勵根據中藥特點，研究探索建立生物效應檢測方法，用于中藥的質量控制，與現行質量控制方法相互補充，促進創新，鼓勵新技術、新方法在中藥中的應用。為建立符合中醫藥特點的中藥質量控制體系提供更多的選擇，同時也為保證臨床用藥的安全有效、質量可控提供科學依據。

中藥生物效應檢測方法是通過與中藥有效性、安全性相關聯，反映一類或多類活性/毒性成份的生物效應，是一種符合中藥多成份、整體作用特點的質量控制方法，其目前屬于前瞻性、探索性的研究方法，對中藥新藥研發和產業高質量發展具有重要的價值和意義。

01、起草背景

《中共中央國務院關于促進中醫藥傳承創新發展的意見》[2]《中華人民共和國藥品管理法》[3]及《藥品注冊管理辦法》[4]等文件中均要求，鼓勵運用現代科學技術和傳統中藥研究方法開展中藥科學技術研究和藥物開發，要求建立完善符合中藥特點的注冊管理制度和技術評價體系。國家藥品監督管理局藥品審評中心發布的《中藥新藥質量研究技術指導原則(試行)》[5]鼓勵開展探索中藥新藥的生物活性測定研究，《中藥新藥質量標準研究技術指導原則(試行)》[6]鼓勵探索開展生物活性測定研究，建立生物活性測定方法以作為常規物理化學方法的替代或補充。

美國食品藥品管理局(FDA)將生物評價作為植物藥質量控制的重要方法，2016年美國FDA正式發布的《植物藥研發行業指南》(Botanical Drug Development Guidance for Industry)[7]中要求，在僅采用化學檢驗不足以確保質量和療效一致性的情況下，申請人應在植物藥原料藥和(或)藥品放行質量標準和穩定性試驗方案中納入生物效應檢測方法。優先選擇可反映藥物已知或預期作用機制的生物效應檢測方法。該指南中還指出，生物效應檢測方法是測定植物藥效價和活性的一種重要方法。生物效應檢測方法應盡可能與藥物推測的作用機制緊密相關，但在個別情況下，也可考慮并評價其他相關性較小的檢測方法。

當前以化學成份指標為主的中藥質量控制方法通常無法充分反映中藥的質量，且較難與臨床有效性、安全性相關聯，中藥生物效應檢測可較好地彌補現行質量控制方法的不足，有利于提高中藥質量的可控性。

02、基本原則

2.1 體現中醫藥特點，反映中藥有效性和安全性

中藥具有多成份、多靶點、發揮整體作用的特點，現行以化學成份檢測為主的方法難以反映中藥的優劣，生物效應檢測方法可通過藥效學指標和（或）毒理學指標反映其有效性和安全性，因此指導原則指出應結合中醫藥特點，盡可能選擇多個指標進行生物效應檢測研究，并與中藥的功能主治相關。

2.2 與現行質量檢測方法相互補充，提高中藥質量可控性

中藥質量評價方法主要有性狀評價、理化評價和生物評價[8]，目前大多中藥品種的質量控制方法以性狀評價和理化評價為主，二者雖簡單易行，但有時無法全面地反映中藥的安全性、有效性以及質量可控性。在現有理化檢測方法的基礎上，開展中藥復方的生物效應檢測研究，相互補充，可綜合評價并控制中藥質量[9]。

指導原則與《中藥新藥質量研究技術指導原則(試行)》和《中藥新藥質量標準研究技術指導原則(試行)》相配合，鼓勵申請人建立符合中醫藥特點的生物效應檢測方法以提高中藥質量的可控性，但本《指導原則》未強制要求在中藥質量控制體系中建立生物效應檢測指標，鼓勵根據產品具體情況，從生物效應檢測方法建立的難易程度及研究對質量控制的需求等方面考慮，逐步推廣運用于中藥的質量研究和質量標準制定。

2.3 方法應科學可行

生物效應檢測具有藥理學和藥檢分析的雙重屬性和要求[10]，應對試驗條件、操作規范等建立嚴格的控制措施，并進行詳細的方法學考察和驗證，同時還應考慮到方法在實際應用過程中的簡便性和可操作性。

03、主要內容

《指導原則》主要對生物效應檢測方法在中藥中應用的適用范圍、檢測方法的選擇、供試品的制備、參照物的選擇和標定、試驗系的選擇、檢測指標的選擇進行了說明，供研究者在實際應用中參考。

3.1 適用范圍

《中國藥典》從2010年版[11]起至2020年版[12]均收載了《中藥生物活性測定指導原則》。《中國藥典》2020年版中提出，擬開展生物活性測定研究的中藥材、飲片、提取物或中成藥功能主治應明確，其中，優先考慮適應癥明確的品種，對中藥注射劑、急重癥用藥應重點進行研究。

本《指導原則》參考《中藥生物活性測定指導原則》，并根據近年來生物效應檢測研究的深入和積累，進一步對中藥生物效應檢測的適用范圍進行了優化明確，建議將生物效應檢測優先考慮用于常規理化檢測方法難以充分評價的中藥進行探索研究，并基于藥品有效性、安全性和質量可控性提出了三種適用情形，以便申請人可根據其產品的實際情況研發適合的質量控制指標，包括：①藥理作用清楚、活性明顯、量效關系明確，但有效成份不清楚的；②涉及毒性藥味和(或)現代研究表明對人體具有較強的毒性反應，但產生毒性反應的成份尚不明確的；③檢測的化學成份與臨床療效和安全性關聯性不強的。

3.2 檢測方法與檢測指標的選擇

本《指導原則》強調應圍繞安全性和有效性盡可能選擇與臨床的安全性、有效性關聯較強(存在一定量效關系)、研究較成熟(業界認可度較高)的生物效應檢測方法。根據評價的目的和需求，申請人可選擇多種生物效應檢測方法進行綜合評價。鼓勵申請人針對中藥特點，結合現代生物技術的發展，研究建立新技術和新方法。對于檢測指標的選擇，認為中藥的某一功效一般與多種藥理作用相關，采用單一指標通常難以反映其臨床主要療效或毒性情況，可在同一試驗系中觀察多個生物效應指標，也可通過多項試驗考察相同或不同的生物效應指標，綜合考察其療效或毒性。

中藥生物效應檢測的相關評價方法可包括生物效價/生物毒價、生物活性限值、效應成份指數、生物標志物、生物效應表達譜等。生物標志物及生物效應表達譜目前在中醫藥研發中還屬于較為新興、前沿的領域。生物標志物可從整體和單個化合物兩方面動態反映疾病發展引起的內源性物質變化，具有反映藥物作用效果、與藥代動力學相關等優勢，可用于藥效學評價[13]；生物效應表達譜具有指紋性或特征性，因此可用于中藥真偽鑒別，也可以用于中藥質量優劣評價或質量波動監測[14]，因此本《指導原則》鼓勵采用生物標志物及生物效應表達譜等作為生物效應檢測指標。

3.3 供試品和參照物的選擇

《指導原則》強調生物效應檢測研究時，制備供試品的樣品應具有代表性。對于納入質量標準的生物效應檢測方法，應采用與臨床樣品質量一致的樣品作為供試品，要以臨床驗證批次樣品為制定依據。

參照物的選擇是中藥生物效應研究的重點內容，也是目前阻礙中藥生物效應檢測發展的關鍵點之一。由于中藥成份復雜，不是均質體系，因此本指導原則建議參照物一般應與供試品在化學組成和(或)生物效應方面具有同質性，選擇與驗證性臨床試驗用樣品質量一致的樣品。參照物的選擇范圍可為藥材/飲片、提取物、中成藥，或為化學藥品。

3.4 試驗系的選擇

本《指導原則》明確在能夠保證評價結果與臨床療效和安全性相關聯的前提下，優先選擇相對簡便、經濟、可操作性強的試驗系。整體動物試驗結果一般與臨床效應更接近，但體外試驗操作簡便，可重復性好，便于標準化，因此在體外試驗系能較好模擬體內情況，生物效應明顯，且有良好量效關系時，一般首選離體試驗系。

04、其    他

鑒于目前國內關于中藥生物效應檢測相關研究基礎較為薄弱，在起草本指導原則時，主要關注了一些重點、難點問題，盡可能符合中藥研發規律以及現階段中藥研發技術水平的要求，鼓勵研究探索適合產品自身特點的生物效應檢測方法，并運用于中藥質量控制體系。

4.1 與《中國藥典》中《中藥生物活性測定指導原則》的聯系與區別

《中國藥典》2010 年版一部開始增設《中藥生物活性測定指導原則》[11]，《中國藥典》2015年版[15]及《中國藥典》2020年版[12]也將其納入通則。本《指導原則》與《中國藥典》中《中藥生物活性測定指導原則》所述實驗設計、方法學建立等要求一致，指導原則說明，中藥生物效應檢測研究涉及的供試品的選擇、實驗設計、結果統計、判定標準、方法學驗證等內容均可參考《中國藥典》相關內容。

《中藥生物活性測定指導原則》指出，生物活性測定法是以藥物的生物效應為基礎，以生物統計為工具，運用特定的實驗設計，測定藥物有效性的一種方法，從而達到控制藥品質量的作用，強調了生物活性測定作為質量標準的一部分，可用于中藥有效性的控制，但未涉及對安全性、質量均一性控制的內容。

本《指導原則》充分參考了近十年相關領域的最新研究進展和成果，對中藥生物效應檢測研究的適用范圍和應用領域進行了適度的發展。主要體現在以下幾個方面。

4.1.1 擴展了生物效應檢測的定義和范疇

《指導原則》將生物效應檢測定義為利用藥物對試驗系所產生的生物效應，運用特定的實驗設計，反映藥物有效性、安全性的一種方法，從而達到評價和控制藥品質量的目的。與《中國藥典》中《中藥生物活性測定指導原則》不同的是，本《指導原則》提出中藥生物效應檢測不僅可用于活性檢測，也可用于安全性和質量均一性檢測。中藥成份復雜，有效成份、毒性成份等大多不十分明確，將檢測活性成份和(或)毒性成份的生物效應檢測方法作為中藥質控的一部分具有重要的價值和意義。

4.1.2 擴展了生物效應檢測的指標體系

針對中藥成份復雜的特點，結合現代生物技術的發展，可建立和采用一些新技術和新方法。根據評價的目的和需求，選擇多種適當的生物檢定方法進行綜合評價，如生物效應表達譜、效應成份指數等。

4.1.3 擴展了生物效應檢測在中藥新藥研發中的應用領域

《中國藥典》中《中藥生物活性測定指導原則》主要側重于在中藥質量標準領域的應用。而本《指導原則》進一步擴展到中藥新藥研發的全過程，建議研究者充分利用生物效應檢測方法關聯有效性和安全性的優勢，在新藥組方篩選、生產工藝優化、有效性評價、安全性評價、穩定性評價等方面嘗試引入生物評價方法，提高中藥新藥研發的成功率和效率。

4.2 中藥生物效應檢測適用于中藥全生命周期的相關評價

生物效應檢測的特點是適用范圍廣，中藥有效性、安全性評價、質量對比研究中均可應用。生物活性測定法可以補充理化檢測方法的不足，可能達到從活性/毒性的角度更好地保證原料藥的優質性，中間提取物的穩定性，制劑以及成品的一致性的目的，提升中藥的有效性、安全性和質量可控性[11]。

考慮到目前中藥生物效應檢測研究應用實例較少，經多次專家討論認為，本《指導原則》僅提出中藥生物效應檢測研究的基本原則和要求，供中藥質量控制研究參考使用，生物效應檢測方法在作為質量控制指標時，應按照本《指導原則》中的相關要求開展研究，同時鼓勵申請人在中藥不同研發階段及上市后對生物效應檢測方法進行探索研究，如中藥臨床處方的評價和優選、中藥制劑工藝的篩選與優化、中藥藥效學和毒理學評價、中藥新藥臨床試驗、中藥上市后再評價和變更等。

05、結    語

中藥生物效應檢測方法作為中藥質量控制的新技術和新方法，不同于一般的藥理學實驗方法，需要具備藥理學與藥檢分析的雙重屬性和要求[10]，因此在方法的廣泛應用方面可能還存在一定困難，對方法的建立、技術難點和注意的問題還有待細化，如參照物的選擇和標定、樣本量的考慮等。基于中藥生物效應檢測可反映多個指標和(或)多種效應，與產品有效性、安全性關聯較強，鼓勵應用于現有檢測方法不能充分控制其質量的中藥。同時，考慮適應中藥研發的多樣性、包容性，通過不斷研究探索，繼續豐富完善符合中藥特點的質量控制標準體系。

引用本文

李慧,朱家谷,楊平,陳浩,吳靜義,劉思燚,王伽伯,肖小河*,馬秀璟*.《中藥生物效應檢測研究技術指導原則(試行)》解讀[J].中國食品藥品監管,2021(09):88-93.

第一作者簡介

李慧，碩士，國家藥品監督管理局藥品審評中心，審評員，主管藥師。專業方向：藥品技術審評

通訊作者簡介

肖小河，醫學博士，博士生導師，解放軍總醫院第五醫學中心。專業方向：中藥質量控制與藥性研究

馬秀璟，博士，國家藥品監督管理局藥品審評中心，高級審評員，主任藥師。專業方向：藥品技術審評