無菌工藝模擬試驗(yàn)是工藝監(jiān)測的重要組成部分，是確認(rèn)無菌工藝控制有效性的重要手段。近年來，在藥品GMP符合性檢查中，發(fā)現(xiàn)部分藥品生產(chǎn)企業(yè)對無菌工藝模擬試驗(yàn)的管理存在較為一些共性的問題，例如試驗(yàn)設(shè)計(jì)不合理、試驗(yàn)記錄不規(guī)范等，可能導(dǎo)致無法正確評價(jià)無菌生產(chǎn)過程的可靠性。本期“錯(cuò)題本”聚焦典型缺陷，通過分析、法規(guī)要求和整改建議，幫助企業(yè)提升無菌工藝控制水平。

錯(cuò)題1：藥品生產(chǎn)企業(yè)對無菌工藝模擬試驗(yàn)的設(shè)計(jì)不合理。

問題舉例：

無菌工藝模擬試驗(yàn)方案中未設(shè)置模擬某項(xiàng)干預(yù)操作的可接受次數(shù)上限且部分實(shí)際干預(yù)操作未在試驗(yàn)方案體現(xiàn)，如穿越灌裝線軌道的動作等；無菌工藝模擬試驗(yàn)用培養(yǎng)基為TSB培養(yǎng)基，其培養(yǎng)基促生長能力試驗(yàn)未考慮環(huán)境監(jiān)測中發(fā)現(xiàn)的典型微生物；方案所設(shè)計(jì)的糾正性干預(yù)不合理，包括模擬A級潔凈風(fēng)機(jī)停機(jī)等。

分析：

上述錯(cuò)題風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)在于污染風(fēng)險(xiǎn)未被真實(shí)評估，工藝代表性缺失，缺少部分模擬干預(yù)活動或模擬干預(yù)次數(shù)不足，無法建立科學(xué)的干預(yù)管理標(biāo)準(zhǔn)。促生長能力驗(yàn)證不充分，某些微生物可能在培養(yǎng)基中生長受限，導(dǎo)致污染未被檢出。無菌工藝模擬試驗(yàn)不應(yīng)當(dāng)通過挑戰(zhàn)不合理的干預(yù)證明其合理性。無菌工藝控制的有效性取決于工藝設(shè)計(jì)、藥品質(zhì)量體系和工藝控制的執(zhí)行情況、培訓(xùn)、監(jiān)測數(shù)據(jù)的評估等，不能僅通過無菌工藝模擬試驗(yàn)結(jié)果確認(rèn)。

法規(guī)要求：

《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》無菌藥品附錄第四十七條規(guī)定：應(yīng)當(dāng)盡可能模擬常規(guī)的無菌生產(chǎn)工藝，包括所有對無菌結(jié)果有影響的關(guān)鍵操作，及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。

國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《無菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無菌制劑）》6.3.5.2規(guī)定：除標(biāo)準(zhǔn)菌株之外，還可考慮加入環(huán)境監(jiān)測和無菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。促生長試驗(yàn)接種量應(yīng)小于100CFU，按照中國藥典要求培養(yǎng)，以證明培養(yǎng)基能夠支持微生物的生長。

《無菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無菌制劑）》6.7規(guī)定：最差條件并不是指人為創(chuàng)造的超出允許范圍的生產(chǎn)狀況和環(huán)境。為了確認(rèn)無菌工藝風(fēng)險(xiǎn)控制的有效性，應(yīng)通過風(fēng)險(xiǎn)評估并結(jié)合無菌生產(chǎn)工藝、設(shè)備裝備水平、人員數(shù)量和干預(yù)等因素來設(shè)計(jì)模擬試驗(yàn)最差條件。

《無菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無菌制劑）》6.8.2規(guī)定：模擬試驗(yàn)中干預(yù)設(shè)計(jì)應(yīng)與實(shí)際的生產(chǎn)活動保持一致，模擬試驗(yàn)不應(yīng)挑戰(zhàn)不合理的干預(yù)，以證明其合理性。

《無菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無菌制劑）》6.8.3.3規(guī)定：模擬試驗(yàn)應(yīng)設(shè)計(jì)并實(shí)施足夠數(shù)量的糾正性干預(yù)。干預(yù)頻次的設(shè)計(jì)應(yīng)考慮實(shí)際生產(chǎn)情況，按比例覆蓋模擬試驗(yàn)的全過程。

《無菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無菌制劑）》10.2規(guī)定：以現(xiàn)行藥品GMP法規(guī)要求為準(zhǔn)則，評價(jià)無菌生產(chǎn)過程的法規(guī)符合性，低于規(guī)范要求的無菌工藝過程，不能通過模擬試驗(yàn)來證實(shí)其無菌控制的合理性。

建議：

（1）設(shè)計(jì)無菌工藝模擬試驗(yàn)方案時(shí)，模擬試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)應(yīng)結(jié)合無菌生產(chǎn)工藝，盡量與實(shí)際無菌操作過程保持一致，以求試驗(yàn)結(jié)果真實(shí)反映生產(chǎn)過程的無菌保障水平。

（2）模擬試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)時(shí)，無菌工藝模擬應(yīng)當(dāng)盡可能模擬常規(guī)的無菌生產(chǎn)工藝，包括所有對無菌結(jié)果有影響的關(guān)鍵操作，以及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。

（3）根據(jù)所選擇的培養(yǎng)基，按照中國藥典要求進(jìn)行促生長能力試驗(yàn)。除標(biāo)準(zhǔn)菌株之外，還可考慮加入環(huán)境監(jiān)測和無菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。

（4）通過風(fēng)險(xiǎn)評估并結(jié)合無菌生產(chǎn)工藝、設(shè)備裝備水平、人員數(shù)量和干預(yù)等因素來設(shè)計(jì)模擬試驗(yàn)最差條件。

錯(cuò)題2：無菌工藝模擬試驗(yàn)的記錄內(nèi)容不完整，對結(jié)果分析評估不到位。

問題舉例：

無菌工藝模擬試驗(yàn)中的損失數(shù)量明顯高于正常生產(chǎn)的損失數(shù)量，企業(yè)未對此情況進(jìn)行說明或調(diào)查；模擬試驗(yàn)記錄中僅記錄了總的培養(yǎng)支數(shù)，未記錄剔廢未培養(yǎng)的支數(shù)以及未培養(yǎng)的原因等。

分析：

上述錯(cuò)題風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)在于調(diào)查缺失導(dǎo)致未能及時(shí)發(fā)現(xiàn)可能存在的人員操作失誤、設(shè)備或工藝缺陷等，暴露企業(yè)質(zhì)量體系對偏差的響應(yīng)機(jī)制缺失。若是日常生產(chǎn)中按規(guī)定不需要剔除的產(chǎn)品，模擬試驗(yàn)時(shí)是應(yīng)保留、培養(yǎng)并納入評估的，如果將其剔除而不進(jìn)行培養(yǎng)，則會導(dǎo)致無菌工藝模擬試驗(yàn)結(jié)果不可信。同樣，模擬試驗(yàn)記錄如不完整，可能會掩蓋潛在的污染風(fēng)險(xiǎn)，影響對無菌保障水平的評估。

法規(guī)要求：

《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》第二百五十條規(guī)定：任何偏離生產(chǎn)工藝、物料平衡限度、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、檢驗(yàn)方法、操作規(guī)程等的情況均應(yīng)當(dāng)有記錄。

《無菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無菌制劑）》6.8.5規(guī)定：實(shí)際工藝中如明確規(guī)定受干預(yù)影響的產(chǎn)品（容器）應(yīng)從生產(chǎn)線上剔除，在模擬試驗(yàn)時(shí)也可剔除。模擬試驗(yàn)時(shí)產(chǎn)生的這類產(chǎn)品（容器）可不培養(yǎng)，但不培養(yǎng)的容器應(yīng)予以記錄并評估其合理性。如在干預(yù)發(fā)生前已經(jīng)密封，在日常生產(chǎn)中按規(guī)定不需要剔除的產(chǎn)品，模擬試驗(yàn)時(shí)也應(yīng)保留、培養(yǎng)并納入評估。

《無菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無菌制劑）》6.10.1規(guī)定：模擬試驗(yàn)中密封缺陷產(chǎn)品的剔除工藝應(yīng)采用日常生產(chǎn)的剔除工藝。除密封缺陷的產(chǎn)品外，其他外觀缺陷、灌裝量異常的模擬產(chǎn)品也應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)。

建議：

（1）模擬試驗(yàn)的剔除標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)與日常生產(chǎn)的完全一致。當(dāng)模擬試驗(yàn)剔除量異常時(shí)，應(yīng)啟動偏差調(diào)查，分析是否因操作失誤、設(shè)備故障或干預(yù)不當(dāng)導(dǎo)致剔除量異常。

（2）應(yīng)記錄剔除品的數(shù)量、位置、時(shí)間、具體原因（如密封缺陷），并評估日常生產(chǎn)與模擬試驗(yàn)的剔除標(biāo)準(zhǔn)是否存在差異。對于未培養(yǎng)的剔除品，應(yīng)明確記錄其支數(shù)、位置、剔除原因（如干預(yù)導(dǎo)致污染風(fēng)險(xiǎn)），并評估對其不進(jìn)行培養(yǎng)的合理性。如在干預(yù)發(fā)生前已經(jīng)密封，在日常生產(chǎn)中按規(guī)定不需要剔除的產(chǎn)品，模擬試驗(yàn)時(shí)也應(yīng)保留、培養(yǎng)并納入評估。

（3）應(yīng)記錄已灌裝、已培養(yǎng)、未培養(yǎng)樣品的數(shù)量，實(shí)現(xiàn)物料平衡和可追溯性。