代餐食品可替代正常飲食，是一種治療肥胖的有效策略。與其他治療方法相比，代餐不僅能有效降低超重、肥胖患者的食欲，控制人體能量密度，還能防止控制飲食過程中必需營養(yǎng)素缺乏等情況，同時代餐食品依從性較好，有助于保持長期減重的效果，甚至改變食用者的飲食行為習慣。隨著市場化規(guī)模的擴大，代餐食品生產(chǎn)質(zhì)量上的隱患不斷浮現(xiàn)。由于多數(shù)代餐食品是通過電商平臺和微商平臺銷售，某些不良商家為達到快速瘦身的效果，在代餐食品中違規(guī)添加對人體有害的藥物成分，有一定的抑食減肥功效，但是可能對肝臟、腎臟等造成嚴重損害，甚至危及生命。我國已將西布曲明列入《保健食品中可能非法添加的物資名單 ( 第一批 )》中，明確認定其為會嚴重損害肝臟、腎臟等器官組織的“有毒、有害的非食品原料”；國內(nèi)《食品安全法》規(guī)定食品中不得添加藥物成分；中國營養(yǎng)學會發(fā)布的團體標準 T/CNSS 002—2019《代餐食品》規(guī)定代餐食品的生產(chǎn)條件應符合國家有關規(guī)定，代餐食品中所使用的原料應符合相應的食品標準和規(guī)定，禁止使用非食品原料和禁用物質(zhì)。

    目前，缺乏代餐食品中非法添加藥物的檢測標準。三重四極桿復合線性離子阱質(zhì)譜法屬于混合型串聯(lián)質(zhì)譜法，兼具傳統(tǒng)四極桿和線性離子阱的雙重功能，可以自由進行轉(zhuǎn)換，不但保留了串聯(lián)四極桿多反應監(jiān)測模式的選擇性及靈敏度優(yōu)勢，還具有線性離子阱增強子離子的掃描功能，且同批次檢測時藥物殘留少，抗污染能力更強，能有效提高復雜基質(zhì)中微量化合物的定性定量能力。研究人員結合QuEChERS前處理方法，采用高效液相色譜-三重四極桿復合線性離子阱質(zhì)譜法測定代餐食品中6種非法添加減肥藥物的含量。

1、 試驗方法

     取樣品于離心管中，加入甲醇，振蕩，渦旋提取，用甲醇定容搖勻，然后離心。取上清液于凈化管 [含N-丙基乙二胺 (PSA)、十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18）和硫酸鎂（MgSO4）]中，渦旋離心。分取適量上清液，過有機濾膜，濾液按照儀器工作條件測定。若樣品中待測組分含量較高時，用甲醇稀釋至線性范圍。

2、 結果與討論

2.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

     以100μg·L−1單標準溶液為待測對象，通過進樣針直接連通質(zhì)譜（MS only）模式優(yōu)化質(zhì)譜條件。利用 SCIEX Triple Quad 軟件的化合物開發(fā)功能進行MRM-IDA-EPI質(zhì)譜掃描。設定 MRM檢測窗口時間并進行分段時間掃描，以滿足色譜峰采集點數(shù)；然后進行 IDA 掃描，繼而觸發(fā) EPI 掃描，富集碎片離子，從而獲得高靈敏的全譜信息。先利用一級質(zhì)譜掃描篩選母離子，ESI+ 模式下得到了 [M+H]+；然后進行二級質(zhì)譜掃描，選擇響應較高的碎片離子為定量離子，次強的碎片離子為定性離子，并對去簇電壓和碰撞能量進行優(yōu)化。優(yōu)化后的參數(shù)如表1所示。

2.2 色譜條件的優(yōu)化

2.2.1 色譜柱

    選用常規(guī)C18色譜柱分離目標組分，試驗比較了ZORBAX Eclipse Plus C18 色譜柱和 Proshell 120 EC-C18色譜柱對6種待測組分的分離效果。根據(jù)結果，試驗選擇采用 ZORBAX Eclipse Plus C18 色譜柱分離6種待測組分。

2.2.2 流動相

     甲醇-水和乙腈-水體系是液相色譜-質(zhì)譜分析中常用的流動相。在水中適當加入甲酸或乙酸銨，可使待測組分較好地離子化，從而增強色譜峰響應強度和改善色譜峰峰形。試驗考察了乙腈-水、乙腈-含5mmoL·L−1乙酸銨的0.1%甲酸溶液、甲醇-水、甲醇-含5mmoL·L−1 乙酸銨的0.1%甲酸溶液等體系對6種待測組分的分離效果。結果顯示：以乙腈-水體系為流動相時，不管是否添加甲酸和乙酸銨，待測組分的分離度和響應強度均不理想；以甲醇-含5mmoL·L−1乙酸銨的0.1%甲酸溶液體系為流動相時，相較甲醇-水體系，6種待測組分的分離度和響應強度均較好，這是由于在水中加入低濃度水平甲酸和乙酸銨，能夠有效提升待測組分的響應強度和改善待測組分的分離度，同時能消除麻黃堿和酚酞的拖尾現(xiàn)象。因此，試驗選擇的流動相為甲醇-含5mmoL·L−1乙酸銨的0.1%甲酸溶液體系。在優(yōu)化的儀器工作條件下，6種組分的總離子流色譜圖如圖1所示。

2.3 樣品前處理條件的優(yōu)化

2.3.1 提取溶劑

     由于6種組分均易溶于極性有機溶劑，試驗分別選擇兩種常用溶劑甲醇和乙腈提取加標空白代餐餅干中6種待測組分。根據(jù)結果，試驗選擇的提取溶劑為甲醇。

2.3.2 提取方式和提取時間

     以2.3.1節(jié)加標樣品為待測對象，試驗比較了分別以渦旋、超聲、均質(zhì)提取等 3 種常見方式提取1，2，5，10，20min（不同提取時間編號分別為 1#、2#、3#、4#、5#）時代表性目標組分西布曲明的回收率，結果見圖2。

    由圖2分析可知，試驗選擇采用渦旋提取方式提取5min。

2.3.3　凈化劑總量

    凈化過程常用吸附劑有C18、PSA、MgSO4等。其中：C18能較好地吸附非極性雜質(zhì)和色素等；PSA能較好地除去提取液中糖類、脂肪酸、酚類等酸性成分以及極性色素；MgSO4是常用的除水劑。由于代餐食品基質(zhì)較為簡單，在提取后可選取現(xiàn)成的分散固相萃取凈化管凈化。以 2.3.1節(jié)加標樣品為待測對象，比較了C18、PSA和MgSO4的質(zhì)量比均為1∶1∶6時3種凈化劑總量分別為0，200，400，600，800，1200，1 600，2000mg時 種待測組分的回收率，結果如圖3所示。

    由圖3分析可知，試驗選擇的吸附劑總量為200mg。

2. 4 基質(zhì)效應

     基質(zhì)效應 (ME) 是指分析過程中待測組分的響應會因基質(zhì)的影響而增強或抑制，可采用陰性樣品溶液和溶劑制作的標準曲線斜率的比值（ME值）來評估。如果ME值在0.80~1.20 內(nèi)，說明基質(zhì)對待測組分表現(xiàn)出了輕微的減弱或增強效應，基質(zhì)效應可忽略，直接采用溶劑配制混合標準溶液系列即可；如果ME值大于1.20或小于0.80，說明基質(zhì)對待測組分表現(xiàn)出了增強或抑制效應，基質(zhì)效應不能忽略，需要采用陰性樣品溶液配制混合標準溶液系列。分別以陰性代餐餅干、代餐粥、代餐奶昔溶液和甲醇配制混合標準溶液系列，按照儀器工作條件測定并制作標準曲線。結果顯示，6種待測組分的ME值均在0.91~0.98內(nèi)，說明基質(zhì)效應較弱，本方法可直接采用溶劑制作標準曲線。

2. 5 標準曲線、檢出限和測定下限

     按照儀器工作條件測定混合標準溶液系列，以各待測組分的質(zhì)量濃度為橫坐標，其對應的峰面積為縱坐標進行線性回歸。結果顯示，6種待測組分的質(zhì)量濃度在0.5~20.0μg·L−1內(nèi)和峰面積呈線性關系，其他線性參數(shù)見表2。

    以 3，10倍信噪比（S/N）對應的質(zhì)量分數(shù)為檢出限（3S/N）和測定下限（10S/N），結果如表2所示。

2. 6 精密度和回收試驗

     按照試驗方法對陰性代餐餅干樣品進行3個濃度水平的加標回收試驗，每個濃度水平平行測定6次，計算回收率和測定值的相對標準偏差（RSD），結果見表3。

    由表3可知，6種待測組分的回收率為79.5%~ 102%，測定值的RSD均小于5.0%，滿足樣品的定量分析要求。

2. 7 樣品分析

    按照試驗方法分析線上和線下購買的40批代餐食品，結果顯示，3批代餐奶昔樣品（標記為陽性樣品1#、2#、3#）檢出了非法添加藥物西布曲明，檢 出 量 分 別 為 2.60×107，2.62×107，1.86× 107μg·kg−1，檢出情況與其他相關報道一致。食用西布曲明后極可能出現(xiàn)急性癥狀，建議消費者盡量通過正規(guī)渠道購買合格的代餐產(chǎn)品。其中，陽性樣品1#的色譜圖和EPI質(zhì)譜圖如圖4所示。

3、 試驗結論

     研究人員采用高效液相色譜-三重四極桿復合線性離子阱質(zhì)譜法測定代餐食品中6種非法添加減肥藥物的含量，可以在5.0min內(nèi)完成檢測，且預處理簡便，回收率和精密度好，可為檢測機構定性定量分析代餐食品提供技術支撐。

作者：周建峰1，陳建1，張方方1，陳鑫蘭1，張碧宇1，胡平平2

單位：1. 溫州市質(zhì)量技術檢測科學研究院；

2. 永嘉縣食品藥品檢驗中心（縣藥品不良反應監(jiān)測中心）

來源：《理化檢驗-化學分冊》2024年第10期