根據中國藥典通則1101無菌檢查法的最新要求，陽性對照試驗的頻次和必要性需基于質量風險管理的綜合評估。以下從法規調整、風險評估維度及執行策略三個方面展開擴展說明：

一、法規背景與核心調整

2025年版藥典對陽性對照試驗的要求從“每批必做”改為基于風險動態調整，與國際藥典（如USP、EP）接軌。核心變化包括：

取消強制每批陽性對照：允許實驗室通過風險評估減少頻次，但需提供充分的數據支持。

抑菌性產品沖洗量限制：總沖洗量從≤1000ml/膜降至≤500ml/膜，且方法適用性驗證中即使抑菌性未完全消除，也不得增加沖洗量。

二、陽性對照頻次的風險評估維度

1. 產品特性（抑菌性波動及溶解度）

低風險場景：若產品抑菌成分批次間穩定（如已驗證含量標準差<5%）且溶解情況較好，且方法適用性試驗中沖洗量遠低于500ml（如僅需200ml即消除抑菌性），可減少陽性對照頻次。

高風險場景：強力抗生素、中藥注射劑等如果抑菌性含量波動大的產品，或方法適用性試驗需接近500ml沖洗量才能消除抑菌性時，建議每批進行陽性對照。

圖中是一種三代抗生素的不同公司和內部批次的含量波動情況。所以，首先你需要了解你的產品（尤其是微生物以外的檢測結果）。如果溶解情況不好，如果含量波動大，就不用再繼續分析了。

2. 方法適用性驗證結果

驗證中若使用有明確效果（藥理作用）的高效中和劑（如β-內酰胺酶）、低吸附濾膜或優化沖洗參數（降低轉速、加熱沖洗液）后仍抑菌殘留，只能寄希望于500ml的沖洗，就需高頻次陽性對照；反之若操作簡單且抑菌性完全消除，可降低頻次。

補充一點，如果方法適用性試驗年度確認中有過失敗也要高頻，因為失敗說明驗證并不充分。

3. 人員操作與流程復雜度

操作簡易性：如沖洗僅需“少量多次加入→抽干”標準動作，無特殊技巧（如無需首次沖洗需要注意溶液路線上下劇烈晃動等等無法描述內容），且人員培訓合格率≥95%（通俗的說是個人培訓后都會），可減少陽性對照。

高復雜性操作：涉及多次濾膜轉移、中和劑濃度調試或沖洗參數動態調整時，需每批陽性對照以監控操作誤差。

4. 實驗室質量管理水平

高水平實驗室（參考指標例如環境監測達標率100%、數據完整性強、偏差率<1%）可基于歷史數據（如連續12個月陽性對照合格率100%）減少頻次，例如每5批做1次。

管理薄弱實驗室（如頻繁出現假陰性/假陽性）需維持每批陽性對照。

三、陽性對照頻次的執行策略

基于風險動態分級管理，頻次可參考以下框架：

注：頻次調整需通過風險評估報告和變更控制程序審批，并定期復核（如每半年）。

結論

“抑菌性穩定、操作簡單、管理成熟可減少陽性對照”符合法規精神，但需通過四步落地：

數據積累：分析至少10批產品的抑菌性波動數據和方法適用性沖洗量記錄。

風險評估報告：涵蓋產品特性、方法驗證、人員能力、實驗室歷史數據等維度。

SOP修訂：明確頻次規則及觸發條件（如方法變更后恢復每批對照）。

持續監控：每季度審查陽性對照結果與環境監測數據，頻次調整后首3批需100%陽性對照。

案例：某抗生素企業通過驗證酶解法（青霉素酶）將沖洗量從800ml降至200ml，結合人員操作標準化，將陽性對照從每批改為每5批1次，通過藥監審計。