1998年，Andrew Fire和Craig Mello在秀麗隱桿線蟲中發現了RNA干擾現象，這一發現為RNAi技術的發展奠定了基礎，并為他們贏得了2006年的諾貝爾生理學或醫學獎。之后幾年，陸續證明RNAi現象在哺乳動物及人體中也存在。隨著核酸化學修飾和靶向遞送系統的進步，siRNA藥物研發也獲得突破。2018年，由Alnylam公司研發的首個siRNA藥物Patisiran獲批上市。迄今為止，共有6款siRNA藥物上市，列表如下。

siRNA藥物通常由20-30個核苷酸組成，利用人Ago 2蛋白形成RNA誘導沉默復合物（RISC），進而介導靶mRNA的切割和降解，從而阻止了mRNA的翻譯，實現了對特定基因表達的沉默。不同于傳統小分子和生物藥的代謝和水解，siRNA藥物主要被內源性人核酸內切酶和核酸外切酶降解。除了作用機制、代謝等方面的區別，siRNA的PK/PD特點也有別于其它類型藥物。siRNA藥物的PD作用，無論在時間上還是空間上，與系統暴露量均呈分離狀態。經系統暴露后，siRNA在化學偶聯物或遞送技術的幫助下，快速被細胞攝取，并被免疫系統的吞噬細胞吞噬，導致血漿中的半衰期較短。不過，決定siRNA藥效的是攝取到胞漿中的靶部位濃度，這也是為什么siRNA藥物PD持續時間久，給藥頻率低的原因。另外，siRNA藥物的脫靶作用的產生主要與內源性非目的RNA序列堿基配對有關。所以，siRNA藥物與傳統小分子和生物藥物相比，有著很多的不同，這也決定了其臨床藥理研究方面也存在一些特殊考量。結合目前獲批的6款siRNA藥物，對siRNA藥物臨床藥理學研究內容做下總結。

目前上市的6款siRNA藥物均為雙鏈RNA。除patisiran無化學偶聯外，其它5款siRNA均通過偶聯N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）實現的肝臟遞送。GalNAc綴合的糖分子與肝細胞表面的ASGPR受體結合，從而將siRNA遞送到肝細胞中。

PK

除了patisiran主要分布在肝臟，血漿蛋白結合率不高外，其它幾個siRNA在臨床治療劑量下的結合率在80%-90%之間。系統暴露量與劑量成比例增加，多次給藥未見蓄積。除nedosiran外，其它siRNA的消除半衰期不到10h，遠小于給藥間隔。這也是siRNA的典型特點，PK和PD分離。因此，用血漿暴露量-效應之間的關系，不適宜作為劑量選擇的依據。比如givosiran給藥劑量是依據劑量-效應關系確定的，而非血漿暴露量-效應關系。

群體PK數據表明，這6款FDA批準的siRNA藥物，影響PK的主要內在因素是體重。

分析方法方面，基本都有液相技術，只不過有的是純液相，有的是液相串聯質譜技術。分析的RNA成分也有區別。Lumasiran、vutrisiran和nedosiran檢測的反義鏈，givosiran和patisiran檢測雙鏈，inclisiran則測的反義鏈/正義鏈的比例。

藥物-藥物相互作用

GalNAc偶聯的siRNA通常不會與藥物代謝酶和轉運體發生相互作用。一是siRNA可有效遞送至靶組織，二是siRNA不會引起細胞因子水平的變化。一般認為細胞因子會影響肝臟CYP酶和藥物轉運體的表達。很多生物藥物通過調節細胞因子水平，間接影響CYP酶和轉運體。此外，siRNA大都通過皮下給藥，對胃腸道pgp轉運體產生影響的可能性也很低。體外研究結果顯示，FDA批準的這6款siRNA，既不是肝臟CYP450酶的誘導劑，也不是抑制劑，也不是其底物。轉運體方面，這6款siRNA也不是轉運體的抑制劑或底物。除了givosiran在臨床研究中考察了DDI，其它幾款siRNA未開展DDI臨床研究。

不過，這也不代表siRNA完全沒有DDI風險。比如siRNA可能脫靶結合P450酶或轉運體的mRNA，從而調節其活性。肝臟靶向siRNA有可能影響肝臟生物學功能，從而出現DDI風險。這可能也是為什么givosiran開展DDI臨床研究的原因。Givosiran對肝細胞血紅素合成路徑有影響，可能會降低P450酶活性。實際結果也證明givosiran確實增加了CYP1A2、2C9、2C19和3A4底物的暴露量。另外，有些小分子可以結合化學修飾的siRNA，潛在增加siRNA的細胞攝取，出現DDI風險。當然，已上市的這幾款siRNA尚未出現被小分子影響PK的情況。

免疫原性

SiRNA可以誘導先天免疫系統，且siRNA和遞送系統也可能有一定的免疫原性風險。所以，siRNA需要考察ADA產生情況。不過，目前獲批的6款siRNA的ADA風險都很低，patisiran、givosiran、lumasiran、inclisiran、vutrisiran、nedosiran的臨床ADA發生率分別為3.6%、0.9%、6%、1.7%、2.5%、0%。而且，產生的ADA對藥物的PK、PD、有效性或安全性均未產生影響。

肝和腎功能不全的影響

Patisiran、givosiran、lumasiran、vutrisiran通過群體PK模型，inclisiran和 nedosiran則開展了肝腎功能不全對PK影響試驗。Patisiran、givosiran、lumasiran、vutrisiran均未見輕、中度肝腎功能不全對PK產生臨床意義的影響。Nedosiran開展的輕或中度腎功能不全、輕度肝功能不全患者臨床試驗，未見對nedosiran PK的影響，未開展重度腎功能不全、中至重度肝功能不全的臨床研究。Inclisiran臨床研究顯示，在輕至中度肝功能不全、或輕至重度腎功能不全患者體內，inclisiran的Cmax和AUC增加，但對PD的影響與健康人相比，沒有區別，不需要進行劑量調整。

考慮到siRNA主要經核酸酶代謝，并不是CYP450酶的底物，且血漿半衰期短，故通常認為肝功能不全對siRNA的PK不會產生太大擔憂。可能還有人擔心，肝功能不全，是否會影響ASGPR的表達。畢竟GalNAc需要與肝細胞表面的ASGPR受體結合，才能實現siRNA遞送到肝細胞中。這點也不用太擔心，即使ASGPR降低50%，治療劑量下的GalNAc偶聯siRNA也不能實現ASGPR的完全飽和，除非了出現更為極端的情況。

QTc

獲批的6款siRNA中，只有inclisiran開展了臨床QT研究。當然，結果顯示臨床治療劑量下，未見QT間期延長。雖然未開展專門的QT臨床研究，但大都在其它臨床試驗中伴隨開展ECG監測，未見QT間期的延長。而且，結合臨床前體外hERG試驗結果、猴體內安全藥理學研究結果，提示臨床擬用劑量下的暴露量，預期不會產生QT間期延長。比如nedosiran在猴中開展30、300mg/kg皮下重復給藥安全藥理學研究試驗中，未見QT或QTc延長。Nedosiran體外抑制hERG的IC50是其臨床擬用劑量下Cmax的390多倍。總之，siRNA藥物引發QT間期延長的風險很低。

最后

其實不難看出，siRNA這類產品的DDI風險、ADA風險、肝腎功能不全的影響、QTc延長風險均不高。算是一類比較省心的藥物。需要關注的是siRNA一般呈現外周血PK和PD分離的特點，暴露量-效應關系一般不以外周血暴露量作為計算依據，可以通過臨床前靶組織siRNA濃度/PD模型預測臨床、PBPK等方式輔助進行劑量設計。臨床藥理學方案設計方面，除了參考已上市的siRNA藥物，同時可以結合下FDA發布的寡核苷酸藥物臨床藥理學研究指南。