凍干口崩片的質(zhì)量評價研究

摘要

目的：尋找評價凍干口崩片質(zhì)量的方法,準確客觀地評價凍干口崩片的質(zhì)量?

方法：篩選出10 種具有代表性的凍干口崩片,通過外觀?片重差異?崩解時限?水分?真密度?比表面積?孔隙率?引濕性試驗等方面對其進行質(zhì)量評價,使用SPSS 20.0 對評測結(jié)果進行相關(guān)性分析?

結(jié)果：除百荷凍干含化糖外,其余9 種凍干口崩片各檢測項目均合格;相關(guān)性分析顯示,水分含量與比表面積成負相關(guān);水分含量與引濕性成正相關(guān);崩解時限與孔隙率成負相關(guān);真密度與比表面積成正相關(guān)?

結(jié)論：本研究建立了評價凍干口崩片質(zhì)量的方法,方法簡單可行,結(jié)果可靠,為后續(xù)凍干口崩片質(zhì)量評價體系的建立奠定了基礎(chǔ)?

關(guān)鍵詞

口腔崩解片；凍干法；質(zhì)量評價；相關(guān)性分析；加速試驗

正文

凍干口崩片(lyophilised orally disintegrating tablets)是指將特制配方溶液通過冷凍干燥技術(shù)制備得到的一種新劑型,與傳統(tǒng)壓片法制備的口崩片相比,其具有高孔隙率?崩解迅速?輔料用量少?生物利用度高的特點[1-3]?服用時僅通過唾液即可在口腔中快速崩解,無需用水送服[4-5]?其活性成分可直接通過口腔黏膜快速吸收,避免肝臟首過效應,特別適用于老人?兒童?精神類疾病以及吞咽困難的患者,可以極大地提高這些人群的服藥依從性[6-9]?

凍干口崩片始載于2015年版《中國藥典》,2020年版《中國藥典》對其要求為:“除冷凍干燥法制備的口崩片外,口崩片應進行崩解時限檢查(通則0921)?采用冷凍干燥法制備的口崩片可不進行脆碎度檢查”[10]?凍干口崩片在國內(nèi)正處于快速發(fā)展階段,然而對其進行質(zhì)量評價的研究較少,其質(zhì)量較輕,具有疏松多孔的骨架結(jié)構(gòu),現(xiàn)有標準及相關(guān)研究中用于經(jīng)典片劑的質(zhì)量評價方法并不完全適用于凍干口崩片[11-14]?

本研究選取了10種具有代表性的凍干口崩片(包含化藥類?中藥類?蛋白類等),對其進行多角度的質(zhì)量評價研究,并找出合適的評價方法,為凍干口崩片及其相關(guān)劑型藥物的質(zhì)量表征與評價提供有效可行的新模式和新方法,也為口腔崩解片相關(guān)質(zhì)量標準的制訂提供參考?建立凍干口崩片的質(zhì)量評價體系,可以科學?規(guī)范地評價產(chǎn)品的質(zhì)量水平,更能在生產(chǎn)中準確把控產(chǎn)品的質(zhì)量,切實引導市場選擇導向,為這一新劑型的發(fā)展奠定了基礎(chǔ) [15]?

1材料

1.1 試藥

透明質(zhì)酸鈉凍干泡騰片(批號:20210531,規(guī)格:15 mg)?膠原蛋白肽透明質(zhì)酸鈉凍干含化糖(批號:20220107,規(guī)格:50 mg)?百荷凍干含化糖(批號:20210913,規(guī)格:50 mg)?地龍蛋白含化糖(批號:20200805,規(guī)格:30 mg)?氯雷他定口崩片(批號:ZS2101002,規(guī)格:10 mg)(陜西量子高科藥業(yè)有限公司);對乙酰氨基酚口崩片(自制,批號:20210810,規(guī)格:100 mg);霍山石斛口崩片(批號:20210428,規(guī)格:20 mg,自制);桑葚口崩片(批號:20210823,規(guī)格:60 mg)?他達拉非口崩片(批號:20210818,規(guī)格:20 mg)?銀杏葉凍干口崩片(批號:20210928,規(guī)格:40mg)(北京量子制藥科技有限公司)?  

氯雷他定對照品(批號:100615-201103,純度: 99.8%,中國食品藥品檢定研究院);乙腈?甲醇(色譜純,Fisher Scientific 公司);磷酸(分析純,無錫市亞泰聯(lián)合化工有限公司);二乙胺(分析純,天津市大茂化學試劑廠);卡爾費休試劑(國家化學試劑質(zhì)檢中心);無水甲醇(分析純,天津市致遠化學試劑有限公司);純凈水(杭州娃哈哈集團有限公司)?

1.2 儀器

電子天平(BT25s,北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);口崩片崩解儀(KB-1,天津市天大天發(fā)科技有限公司);卡爾費休水分測定儀(MA-1,上海本昂科學儀器有限公司);藥品穩(wěn)定性試驗箱(Labone-300CGS,北京蘭貝石恒溫技術(shù)有限公司);高性能全自動壓汞儀[AutoPoreV9605,麥克默瑞提克(上海)儀器有限公司];全自動真密度分析儀(Ultrapyc 5000)?全自動比表面積和孔徑分析儀(Autosorb-IQ-MP)[ 安東帕(上海)商貿(mào)有限公司]?

2方法與結(jié)果

2.1 凍干口崩片質(zhì)量評價

2.1.1 外觀評測

10批凍干口崩片,每批隨機抽取20片,分別置于自制外觀評測裝置(見圖1)的固定白色光源?純色背景下,固定角度觀察片劑?設(shè)計5個評價指標:顏色?形態(tài)?裂邊?融化?黏片?分別要求片劑顏色均勻;呈圓形?飽滿光潔;無裂片?裂邊;無底融化?中心融化;沒有與包材粘連殘留的現(xiàn)象?記錄每批20片中合格片劑的數(shù)量,合格一個記1分,單個評測項低于15分即為此項不達標,5個評測指標中存在2 項及以上不達標即為樣品不合格?各批凍干口崩片的外觀評測結(jié)果如表1 所示? 

從評測結(jié)果可得,化藥類凍干口崩片多呈白色至類白色,中藥類多為黃色或棕色,10批凍干口崩片均為圓形片,片面飽滿光潔,但中藥類與蛋白類凍干口崩片更容易出現(xiàn)裂片或融化現(xiàn)象,頂部突起黏附頂鋁的現(xiàn)象可通過調(diào)整灌裝量解決?10批凍干口崩片外觀評測均合格?

2.1.2 片重差異

根據(jù)2020年版《中國藥典》對于片重差異測定法的要求,對10批凍干口崩片每批隨機抽取20片,精密稱定總重量,求得平均片重后,再分別精密稱定每片的重量,每片重量與平均片重比較,超出重量差異限度的不得多于2片,并不得有1片超出限度1倍?平均片重或標示片重0.3g以下的重量差異限度為±7.5%?片重差異計算公式:

   片重差異(%)=(單片重-平均片重)/ 平均片重×100%

各批凍干口崩片的試驗結(jié)果如表2所示?由表2可以看出,10 批凍干口崩片的片重差異均合格?凍干口崩片的片重較輕,大多為19 ~108mg,通過片重與規(guī)格的比較可以發(fā)現(xiàn)其輔料用量很少,藥物活性成分(API)占比很大,這也是凍干口崩片的優(yōu)勢之一?

2.1.3 崩解時限

根據(jù)2020年版《中國藥典》口崩片崩解時限檢查法的要求,使用口崩片崩解儀測定崩解時限,將崩解籃固定于支架上,浸入1000mL 杯中,杯內(nèi)盛有溫度為(37±1)℃的水約900mL,調(diào)節(jié)水位高度使崩解籃最低位時篩網(wǎng)在水面下(15±1)mm,啟動儀器?取本品1片,置崩解籃中進行檢查,應在60s 內(nèi)全部崩解并通過篩網(wǎng),如有少量輕質(zhì)上漂或黏附于不銹鋼管內(nèi)壁或篩網(wǎng),但無硬心者,可作符合規(guī)定論?重復測定6片,均應符合規(guī)定?如有1片不符合規(guī)定,應另取6片復試,均應符合規(guī)定?各批凍干口崩片的測定結(jié)果如表3 所示?

由表3 可以得出,透明質(zhì)酸鈉凍干泡騰片與對乙酰氨基酚口崩片崩解時限大于60s,不合格,其余均在10s 內(nèi)崩解?規(guī)格小的凍干口崩片一般情況下的崩解速度稍快于大規(guī)格凍干口崩片?

2.1.4 水分測定

參照2020 年版《中國藥典》中水測定法第一法(費休氏法)進行測定,取適量樣品,放入研缽中充分研磨,精密稱定重量后,快速放入卡爾費休水分測定儀中測定水分,記錄測定結(jié)果,每批平行測定3 次,結(jié)果見表4? 

由表4 可以得出,大部分凍干口崩片的含水量在0.5% ~ 5%,但百荷凍干含化糖含水量遠高于平均水平?化藥類含水量均在2% 以下,中藥類與蛋白類含水量高一些,大部分為3% ~ 5%,中藥由于其成分復雜,水分不易除去,在生產(chǎn)過程中更難制備?

2.1.5 引濕性試驗

根據(jù)2020 年版《中國藥典》中9103 藥物引濕性試驗指導原則,結(jié)合實際生產(chǎn)情況,設(shè)計了引濕性試驗?取具塞玻璃稱量瓶,于試驗前一日置于藥品穩(wěn)定性試驗箱內(nèi),設(shè)置溫度為(25±1)℃,濕度為(40±2)%,精密稱定稱量瓶質(zhì)量(m1),每批各取10 片樣品,平鋪于上述稱量瓶中,精密稱定質(zhì)量(m2),將稱量瓶敞口,并與瓶蓋同置于上述恒溫恒濕條件下,分別于1 h?2 h 取出稱量瓶,蓋好稱量瓶蓋子,精密稱定質(zhì)量(m3)?增重百分率計算公式:  

增重百分率(%)=(m3 - m2)/(m2 - m1)×100%  

測定結(jié)果如表4 所示?由表4 可以看出,凍干口崩片1 h 與2 h 的增重百分率相差不大,說明其吸水過程主要發(fā)生在前1 h,在1 ~ 2 h 期間,吸水較少?10 批凍干口崩片的2 h 增重百分率為0.15% ~ 8.74%,其中化藥類的增重百分率很低,為0.15% ~ 0.16%,中藥類增重百分率較高,為2.85% ~ 8.74%,蛋白類的增重百分率為0.67% ~ 3.97%?

2.1.6 真密度測定

試驗前應將全自動真密度分析儀,以及試驗材料?用具處于試驗室恒溫環(huán)境下放置24 h 以上?準備開始測定樣品的真密度,首先打開氦氣閥,調(diào)壓力為0.13 ~ 0.14 MPa,打開儀器電源,預熱30 min,使儀器恒溫,然后對儀器進行校準?校準完成后,取適量樣品,精密稱定,放入樣品池內(nèi)進行測定,依次測定10 批樣品,結(jié)果如表5 所示?10 批凍干口崩片的真密度較為接近,在1.473 ~ 1.862 g·cm- 3?

2.1.7 比表面積測定

使用氮氣吸附法測定凍干口崩片的比表面積，首先開啟氮氣瓶的主閥，確認壓力不低于5 MPa，再將加壓閥壓力調(diào)至0.08MPa，然后開啟儀器，準備做樣品的前處理，取適量樣品放入提前稱好重量的樣品管中，一起精密稱定并記錄再將樣品管安裝在脫氣站上，進行脫氣處理，脫氣完成后，將樣品管取下精密稱定，再將樣品管安裝在分析站上，進行測試，記錄試驗結(jié)果，依次測定10 批凍干口崩片，結(jié)果如表5 所示。

從表5 可以看出，剔除偏離較大的數(shù)據(jù)（百荷）后，凍干口崩片的比表面積為1.431 ～ 5.192m2·g－1，化藥類平均比表面積高于中藥類，百荷凍干含化糖比表面積較低，推測為凍干曲線不合適，在凍干過程中沒有形成孔道。

2.1.8 孔隙率測定

使用壓汞儀來測定凍干口崩片的孔隙率,將儀器打開后,取適量樣品裝入樣品管中,然后將樣品管密封,精密稱定總重量并記錄,把檢測套加在樣品管頭上鎖住,然后進行低壓孔隙分析測試以及高壓孔隙分析測試,依次測定10 批樣品,結(jié)果如表5 所示,剔除偏離較大的數(shù)據(jù)(百荷凍干含化糖)后,10 批凍干口崩片的平均孔徑大小為10 254.31 ~ 29 207.12 nm,孔隙率為76.76% ~ 86.98%?

2.1.9 加速試驗

取氯雷他定口崩片300 片放置在溫度(40±1)℃,濕度(75±5)%的恒溫恒濕箱中6 個月,分別于0?1?2?3?6 個月取樣,測定其外觀?含量?有關(guān)物質(zhì)?水分?崩解時限?試驗結(jié)果如表6 所示?  

① 外觀?水分?崩解時限測定:外觀測定方法按“2.1.1”項下方法;水分測定按“2.1.4”項下方法;崩解時限測定按“2.1.3” 項下方法?  

② 含量測定:照高效液相色譜法(《中國藥典》2020 年版四部通則0512)測定?色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動相為乙腈-甲醇-0.02% 的二乙胺溶液(50∶20∶30)(用磷酸調(diào)pH 值至4.0±0.1);檢測波長247 nm;進樣量20 μL;流速1.0 mL·min - 1;柱溫25 ℃?  

測定法:取本品10 片(相當于氯雷他定100mg),置100 mL 量瓶中,加水5 mL,超聲處理2 min,加流動相80 mL,再超聲處理15 min,加流動相稀釋至刻度,作為儲備液;精密量取儲備液10 mL,置50 mL 量瓶中,加流動相稀釋至刻度,用聚四氟乙烯濾膜濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液?另精密稱取105 ℃干燥至恒重的氯雷他定對照品適量,加流動相溶解并稀釋成每1 mL中含氯雷他定0.1 mg 的溶液,作為對照品溶液?分別吸取供試品溶液和對照品溶液各20 μL 注入液相色譜儀,記錄色譜圖,按外標法以峰面積計算,即得?  

③ 有關(guān)物質(zhì)測定:記錄色譜圖至主峰保留時間的3 倍,供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰,各雜質(zhì)峰面積的總和不得大于對照溶液主峰面積(1.0%),單個雜質(zhì)峰的峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.5 倍(0.5%)?

2.2　各評測結(jié)果相關(guān)性分析

 將上述結(jié)果導入SPSS 20.0 進行相關(guān)性分析,首先對8 組數(shù)據(jù)的正態(tài)分布進行分析,符合正態(tài)分布的組別使用Pearson 相關(guān)性分析,不符合正態(tài)分布的組別使用Spearman 相關(guān)性分析,結(jié)果如表7 所示:水分含量與比表面積成強負相關(guān)關(guān)系;水分含量與引濕性成極強正相關(guān)關(guān)系;崩解時限與孔隙率成強負相關(guān)關(guān)系;真密度與比表面積成強正相關(guān)關(guān)系?

3討論

本研究除選取已上市產(chǎn)品外,其余凍干口崩片均采用與已上市藥品相同的制備工藝得到?因此,可以保證其質(zhì)量穩(wěn)定可靠?且選取的品種類別涵蓋范圍較廣,得到的質(zhì)量評價結(jié)果具有較高的可信度與普適性?自凍干口崩片收載于2015 年版《中國藥典》以來,其質(zhì)量評價的發(fā)展比較緩慢,國內(nèi)研究大多為對于某一種產(chǎn)品的崩解時限?溶出度?含量測定等,進行質(zhì)量評測,本文針對這一劑型進行系統(tǒng)性的質(zhì)量評價研究,為其質(zhì)量標準的制定提供了新方法?新思路? 

凍干口崩片容易出現(xiàn)顏色不均勻?裂片?底部融化?中心融化?黏片等現(xiàn)象?凍干口崩片片型的好壞與其凍干前溶液均勻度?處方?凍干曲線等因素有關(guān),出現(xiàn)裂片現(xiàn)象可適當增加黏合劑進行改善,出現(xiàn)融化現(xiàn)象可適當調(diào)整凍干曲線?圖3?圖4 為凍干口崩片的三維顯微結(jié)構(gòu)圖與切片圖,可看見其疏松多孔的骨架結(jié)構(gòu),API 均勻的分布在骨架結(jié)構(gòu)上,這也是其可以快速崩解的原因?

2020 年版《中國藥典》規(guī)定冷凍干燥法制備的口崩片可不進行崩解時限檢查,但是在研究中發(fā)現(xiàn),也存在幾種凍干口崩片的崩解時限超出了藥典規(guī)定的60 s,經(jīng)過多次試驗,推測崩解慢與其規(guī)格較大或者原料的黏性大有關(guān)?  

從相關(guān)性分析可以看出,水分含量與比表面積成負相關(guān)?與引濕性成正相關(guān),水分含量越低的凍干片比表面積越大,引濕性越弱,因此可以通過控制凍干口崩片的水分,從而來保證其質(zhì)量;崩解時限與孔隙率成負相關(guān),孔隙率越高的凍干口崩片崩解速度越快,因此可以通過增大孔隙率的方法來加快其崩解的速度?  

本研究通過對外觀?片重差異?崩解時限?水分?真密度?比表面積?孔隙率?引濕性試驗的評測,可以初步判斷凍干口崩片的質(zhì)量優(yōu)劣?但是這些方法評價標準的制訂還需積累更多的數(shù)據(jù)?藥品審批過程中涉及到的一些方法也可用于質(zhì)量評價,如口感?口味,含量均勻度,有關(guān)物質(zhì),溶出度,溶出曲線,穩(wěn)定性試驗等?質(zhì)量評價研究可以幫助快速發(fā)現(xiàn)和解決在研發(fā)?生產(chǎn)過程中遇到的問題,從而保證產(chǎn)品的質(zhì)量?準確客觀的凍干口崩片質(zhì)量評價方法,可以為其質(zhì)量標準的建立提供依據(jù),推動凍干口崩片劑型的發(fā)展,服務更多的患者,提高其用藥依從性?