清潔分析方法驗證包括分析方法和取樣方法的驗證，通常用擦拭回收試驗來證明取樣方法的有效性，擦拭回收試驗如何做？擦拭溶劑如何選擇？為什么方法回收率合格，而擦拭回收率不合格？

1 、進行清潔分析方法驗證前，需要準備什么？

1.1首先，需要知道殘留物控制限度。驗證部門人員依據(jù)設備表面積、產品批量等信息計算出殘留物的控制限度，QC人員以此當做100%的濃度。

1.2需要知道產品的清潔方法，主要關注使用的清潔溶劑，通常清潔溶劑應該能夠有效的溶解該產品的API，并且不能對設備和產品以及其他產品造成污染。

1.3選擇合適的棉簽，原則如下：

a. 能被擦拭溶劑很好的濕潤

b. 有一定的機械強度和韌性，足以對設備表面施加一定的壓力和摩擦力，并不易脫落纖維

c. 能同擦拭和萃取溶劑相互兼容，不對檢測產生干擾

d. 質優(yōu)價量（一定要考慮公司成本）

1.4選擇與車間生產設備表面材質相同的擦拭板，表面要平整、光滑、干凈。

2 、如何建立清潔分析方法

一般采用實驗室已有的色譜條件進行。如可以參考含量或者有關物質的色譜條件進行(方便操作，節(jié)約儀器和色譜柱)。

3、清潔分析方法驗證包括哪些內容？

3.1對色譜分析方法驗證：專屬性、準確度、線性和范圍、定量限、檢測限、精密度

3.2對取樣方法進行模擬驗證：即所謂的取樣效率/取樣回收率。實際上是對棉簽的選擇、擦拭溶劑的選擇、取樣人員操作、殘留物轉移到棉簽、樣品萃取過程的全面考察。

4 、清潔溶劑的選擇？

5 、擦拭回收試驗如何合理進行？

通常制備3個濃度（2LOQ、100%、200%）的待測溶液，均勻涂布在10*10cm2范圍內（每個濃度涂布2-3份），采用烘干或者自然晾干的方式使其干燥，不同的2-3個人使用相同的棉簽蘸取擦拭溶劑，采用相同的擦拭方法進行擦拭回收試驗，計算回收率。

6 、為什么要制備3個不同濃度？

因為擦拭回收試驗主要是模擬設備殘留物較少（低于清潔限度）和較多（高于清潔限度）時，取樣方法的有效性。

7 、最低濃度為什么是2LOQ，而不是LOQ？

因為擦拭回收率受到取樣和檢驗的雙重影響，所以一般要求擦拭回收率大于50%或60%，如果最低濃度不是2倍的LOQ，可能會出現(xiàn)0.5-0.6倍的LOQ，低于LOQ就不能準確定量，所以為2倍（實際有可能是1.0-1.2倍）

8、 為什么需要2-3個不同人員進行試驗？

擦拭回收率試驗目的是考察不同取樣人員采用相同取樣方法，但是可能會受到擦拭力度、棉簽與設備接觸角度不同等影響而導致取樣效果的差異，所以需要不同人員進行。

9 、為什么擦拭溶劑一定要和取樣溶劑一樣？

因為擦拭回收試驗的目的模擬取樣，證明取樣方法的有效性和重現(xiàn)性，所以擦拭溶劑要和取樣溶劑一致。并且擦拭/取樣溶劑不能污染產品，不能干擾檢測。

10 、擦拭/取樣溶劑應該如何選擇？

選擇擦拭/取樣溶劑時，需要綜合生產工藝（使用到的溶劑等）、溶解性、溶劑的毒害性、避免引入污染物、企業(yè)成本等因素進行評估。擦拭/取樣溶劑不能對產品/設備造成污染，不能引入有毒害的有機溶劑或污染物。生產過程中通常不能使用有毒害的有機溶劑（如必須使用，則需要經(jīng)過合理的風險評估，同時控制有機溶劑殘留量）。例如，固體口服制劑常見在濕法制粒或包衣時使用到乙醇（三類溶劑，低毒、對人類健康危害風險較低的溶劑）。基于以上原則，口服固體制劑常用水、乙醇或者二者的混合物作為清洗溶劑，故擦拭/取樣溶劑也只能選擇乙醇、水或者二者的混合物，如果使用其他溶劑，則需要進行風險評估，同時控制溶劑殘留量。

11 、擦拭回收試驗的可接受標準是什么？

藥品生產驗證指南中一般不低于50%，業(yè)內常見不低于60%。

12、 回收率不符合要求的主要原因有哪些？

a. 擦拭溶劑選擇不合適

b. 人員的擦拭力度（均勻用力）、擦拭速度（要快，防止溶劑揮發(fā)）影響

c. 擦拭路徑（要在涂布的10*10 cm2區(qū)域內）

d. 棉簽與板的接觸角度太大，導致接觸面積太小

e. 其它

以上為清潔分析方法驗證擦拭回收試驗中常見的疑問和解答。因指導原則、指南等均僅說了要進行驗證以及擦拭回收試驗，或者有一些概括性的描述，具體如何合理的做，是沒有具體規(guī)定或者描述的。所以只有基于風險評估的基礎上合理的進行驗證。

最后，給大家分享一下在驗證文件中如何專業(yè)、合理的描述棉簽供試品處理方法的示例。

參考文獻：

藥品生產驗證指南

ICH Q3C （R6）殘留溶劑指導原則