2014年11月，BioPhorum Operations Group (BPOG) 發(fā)布了《生物制藥生產(chǎn)過程中一次性使用系統(tǒng)可提取物測試的標(biāo)準(zhǔn)方案》（以下簡稱方案）。方案通過一個分步驟的過程，使可提取物的測試標(biāo)準(zhǔn)化，以便各實驗室生成可比較的提取物數(shù)據(jù)。同時，便于各方對這些數(shù)據(jù)進行審查，以了解哪些測試是必要和充分的。該方案加速了大家對一次性使用系統(tǒng)（SUS）的理解，并在業(yè)界得到廣泛的參考和使用。

經(jīng)過五年的實踐，業(yè)界對生物制劑浸出物風(fēng)險的思考已經(jīng)得到了探索和鞏固，并且多個SUS供應(yīng)商作為BioPhorum 團隊的一個組成部分，反饋了大量的該方案使用數(shù)據(jù)和意見。2019年，BPOG聯(lián)合生物制藥公司，對大量的SUS可提取物數(shù)據(jù)進行了科學(xué)的審查，將2014年的方案進行了更新，形成了最終的工作報告。2020年4月，BPOG將該報告作為指南發(fā)布BioPhorum Best Practices Guide for Extractables Testing of Polymeric Single-use Components Used in Biopharmaceutical Manufacture(生物制藥生產(chǎn)過程中一次性使用聚合物組件可提取物測試的最佳指南)。本文現(xiàn)就該指南進行簡要的介紹和解讀，以饗讀者。

更新重點

•提取溶劑：由于獨特的提取能力很低，并且干擾測試，指南刪去了原方案中的5M 氯化鈉與1%吐溫80的提取溶劑；

•時間點考察：由于后續(xù)時間點的提取物濃度更高，刪去了初始時間點（0點）的提取物考察；

•測試項目：刪去了對50%乙醇提取液進行元素測試的要求。

更新背景

•指南僅針對生物制藥公司使用的聚合物SUS；

•目的是使各供應(yīng)商之間的SUS提取測試方法一致；

•供應(yīng)商對SUS的提取測試負(fù)責(zé)，并應(yīng)將SUS提取測試數(shù)據(jù)提供給終端使用者（生物制藥公司等）；

•綜合評估與整合SUS提取測試的責(zé)任仍然在終端使用者（生物制藥公司等）。

使用范圍

•包括與工藝流體有接觸的聚合物SUS組件；

•不包含成品制劑的容器密封系統(tǒng)；

•不包含非液體接觸的SUS組件；

•不包括臨時使用的輔助器具（燒杯、移液槍頭、稱量盤等…）。

提取條件

•提取表面積體積比（SA/V）：

?一般部件6:1，過濾器 1:1 （cm2 /mL）；

?對于達(dá)不到6:1的提取比例情況，可以采用最大浸提比的方式進行。

•提取溶劑損失：

?體積損失<20% 沒有必要補正；

?體積損失20%-50%需要進行體積補正；

?體積損失>50% ,先要評估再決定處理方法。

?USP<665>（論壇討論版本）規(guī)定，體積損失≤20% 沒有必要調(diào)整；當(dāng)體積損失>20% 時，提取過程需要重新評估、修改或者重新提取。

•組件預(yù)處理與提取時間間隔：

?Gamma-射線滅菌處理的樣品，應(yīng)在8周以內(nèi)進行提取；

?高壓滅菌樣品，處理后與提取間隔應(yīng)在24小時以內(nèi)。

提取溶劑

•BPOG:

?水、0.1M 磷酸、0.5N氫氧化鈉、50%乙醇四種提取溶劑；

•USP<665>（論壇討論版本）:

?酸水（pH 3）、堿水（pH 10）、50%乙醇三種提取溶劑（酸水、堿水可以根據(jù)實際情況進行調(diào)整）。

提取溫度

•對于低溫冷藏或者冷凍的生物制品，其生產(chǎn)過程中的SUS采用了40℃的加速提取溫度。

提取時間

指南根據(jù)組件與藥液接觸時間的長短不同，分別規(guī)定了24h、7天、21天和70天的不同提取時間點（見下表）：

•長期使用儲液袋的管路、端口、膠塞和袋膜材等，需要分別考察24h、21天和70天，三個時間點；其中70天的40℃加速提取相當(dāng)于原液0℃存儲時3年的有效期；

•普通使用的管路、接頭，普通使用儲液袋的管路、端口、膠塞和袋膜材等，只需要考察24h和21天兩個時間點；

•短期使用的小組件，例如灌充針頭、O型圈、墊片、止回閥等，僅考察24h一個時間點。

檢測方法

•檢測項：采用LC-PDA-MS（ESI+,ESI-, APCI+, APCI-）分析檢測不揮發(fā)性有機物；GC-FID/MS和HS-GC-MS分析檢測半揮發(fā)/揮發(fā)性有機物；ICP-MS/OES分析金屬元素雜質(zhì)，其他輔助測試項目有總有機碳（TOC）、pH值和不揮發(fā)殘渣（NVR）等；

•濃度大于0.1 μg/ml的未知物都需要報告。可能的情況下，需要使用標(biāo)準(zhǔn)品進行鑒定和定量；沒有標(biāo)準(zhǔn)品的情況下，可用內(nèi)標(biāo)或者結(jié)構(gòu)相似的替代物進行定量。

•可以采用單點外標(biāo)或多點外標(biāo)法定量，也可以采用相對響應(yīng)因子法定量。

該指南代表了生物制藥公司和供應(yīng)鏈的共同意見，在為生物制藥公司藥物安全提供保障的同時，加速可提取物數(shù)據(jù)的可用性，加速SUS在商業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用和實施，最終降低藥品生產(chǎn)和病人治療的成本。