色譜分析技術是藥品質量控制的核心手段，其方法有效性依賴于系統適用性測試（System Suitability Test, SST）的嚴格實施。峰谷比（Peak-to-Valley Ratio, p/v）作為關鍵系統適用性參數之一，直接反映色譜峰間的分離效能，尤其適用于相鄰峰無法完全基線分離時的干擾評估。中國藥典2025年版進一步細化了峰谷比的應用要求，強調其與測量準確度的關聯性。本文結合國內外藥典與專業文獻，系統闡述峰谷比的定義、計算方法及可接受值確定邏輯。

一、峰谷比的定義與計算方法

峰谷比定義為小峰平行外推基線的高度（Hp）與小峰和大峰間曲線最低點平行外推基線的高度（Hv），計算公式為：p/v =Hp/Hv

由公式可知，當兩峰完全分離時，Hv趨近于基線噪聲，峰谷比趨于無窮大；隨著峰重疊加劇，Hv增大，p/v值降低，提示分離度不足可能導致積分誤差。

二、峰谷比與分離度（Rs）的關系

峰谷比與分離度存在非線性關聯。當Rs≥1.5時，峰間可達基線分離，無需計算峰谷比（計算結果無指導意義）；而1.0<Rs<1.5時，則可需通過峰谷比進一步評估干擾程度（USP <621>），中國藥典2025年版則延續了此原則，并強化了峰谷比與定量準確度要求的直接關聯。

三、藥典2025年版對峰谷比的新要求

相較于2020年版，中國藥典2025年版在通則0512下“系統適用性試驗”中新增了以下內容：

1、干擾程度的評價：要求通過峰谷比評估相鄰峰對目標成分定量的干擾，明確在確定該項系統適用性要求時，需要評價峰間干擾程度（定量化），即到底影響多少。

2、準確度的驗證：峰谷比可接受值需還通過實驗驗證，確保在最大允許干擾下，測量誤差符合相應檢測目的的要求。

3、可接受值需明確規定：應在品種項下規定明確的可接受值。

四、峰谷比可接受值確定的思路

1、數學模型模擬：如通過數學模型計算，當峰谷比≥2.0時，主峰面積的積分誤差可控制在約±3%以內，但需滿足以下條件：

a.峰形接近正態分布；

b.相鄰峰高度差異不超過50%；

c.基線噪聲水平較低（信噪比≥20）。

2、干擾模擬實驗：通過設計含有不同濃度梯度相鄰峰的樣品，測定其峰谷比與積分誤差的關系。例如，在主峰LOQ水平下，逐步增加相鄰峰濃度（如增加值限度濃度），記錄峰谷比變化及主峰面積偏差。此種方法實際上可以較為準確的評估出可接受值。

此外還有動態閾值調整等方法也可以輔助確定合理的峰谷比。

五、應用案例

案例1：化學藥中異構體分離

某API合成中產生0.1%的異構體雜質，色譜分離度Rs=1.2，峰谷比=2.0。雜質定量誤差一般需≤10%。實驗顯示，當峰谷比=2.0時，異構體面積積分偏差為8%，符合要求，故設定p/v≥2.0為可接受標準。

案例2：某化藥有關物質分離

某復方制劑中兩個相鄰成分濃度差異達10倍，峰谷比=1.5時，通過干擾模擬實驗發現低濃度成分積分誤差超15%。通過調整流動相梯度，將峰谷比提升至2.2，積分誤差降至5%左右，滿足準確度要求，故設定p/v≥2.2為可接受標準。

六、結論與展望

中國藥典2025年版對峰谷比要求的升級，與USP、EP接軌，體現了“質量源于設計”（QbD）理念在色譜方法開發中的深化。通過將峰谷比與定量準確度動態關聯，既避免了過度追求高分離度的資源浪費，又確保了關鍵質量屬性的可控性。