在日常生活中，食品安全一直是大家關注的熱點話題。為了確保我們餐桌上的豬肉安全無虞，科研人員們不斷探索和優(yōu)化檢測方法，其中硝基呋喃類藥物殘留的檢測便是重要一環(huán)。今天，就讓我們一起走進這項科技前沿，了解UPLC-MS/MS（超高效液相色譜串聯(lián)質譜）技術如何助力硝基呋喃類藥物殘留的檢測。

1.認識硝基呋喃類藥物

硝基呋喃類藥物是一類人工合成的抗菌藥，具有廣譜抗菌活性，對大多數(shù)真菌、部分革蘭氏菌和原蟲有良好的抑制作用。然而，這類藥物存在著強烈的生物毒性，其本體和代謝產物對人類具有致癌、致畸、致突變的副作用。因此，盡管硝基呋喃類藥物的抗菌效果好、成本低，但很多國家已經禁止使用。

盡管硝基呋喃類藥物被禁用，但由于其性價比相對較高，仍有人或組織在非法銷售或使用。這些藥物殘留可能通過食物鏈進入人體，對人類健康造成潛在威脅。因此，準確、快速地檢測豬肉中的硝基呋喃類藥物殘留至關重要。

2.分析方法

樣品前處理（衍生化）：首先，取適量豬肉樣品進行粉碎、勻漿。然后，用甲醇-水溶液洗滌樣品，去除游離態(tài)的硝基呋喃類藥物代謝物。接著，加入2-硝基苯甲醛和三氯乙酸溶液，使樣品中的硝基呋喃類藥物代謝物發(fā)生衍生化反應，增加其相對分子質量，便于后續(xù)質譜檢測。最后，用乙酸乙酯提取衍生化產物，并用氮氣吹干后定容，待測。

PS：衍生化前處理做過一次優(yōu)化，將鹽酸替換成10%的三氯乙酸，其優(yōu)點是不僅能提供酸性環(huán)境讓代謝物與2-硝基苯甲醛發(fā)生衍生化反應，還能更有效地除去樣品中的蛋白質以減少干擾。硝基呋喃代謝物檢測一般要求水解衍生化后將

pH 調節(jié)至7.0~7.5，查閱資料后發(fā)現(xiàn)，pH 在7.5~8.0的回收率和pH 在7.0~7.5 的回收率沒有明顯差別，故將pH范圍擴大至7.0~8.0更方便試驗操作。

色譜條件：色譜柱為ACQUITYUPLCCSHC18 2.1mm×100mm×1.7 μm）；流動相A 為乙腈，B 為0.1%的甲酸和0.5mmol/mL醋酸銨混合水溶液；柱溫35 ℃；進樣體積為10μL；流速為0.25mL/min；采用梯度洗脫程序0~2.00min，5%~50%A；2.01~3.00min，50%~90%A；3.01~3.20 min，90%~5% A；3.21~4.50min，5%A。

質譜條件：在本試驗中離子源使用電噴霧離子源（ESI），正離子掃描；掃描方式：多反應監(jiān)測（MRM）；電離電壓：5.5kV；離子源溫度：500 ℃；氣

簾氣：30psi，流速10 L/min；霧化氣：35psi，流速10 L/min；輔助氣：55psi，流速10 L/min；碰撞氣：氬氣（純度大于99.9%），流量：270 kp；

3.方法驗證結果

方法驗證結果：在代謝物質量濃度處于 1 - 100 ng/mL 范圍內時，呈現(xiàn)出良好的線性相關性。其檢測下限統(tǒng)一為 0.3 μg/mL，平均回收率范圍在 91.0% - 117.8%之間，相對標準偏差（RSD）為 2.9% - 7.3%。

結語

硝基呋喃類藥物代謝快、半衰期短，代謝產物與蛋白質結合穩(wěn)定，難直接檢測原藥，通常測代謝物濃度反映殘留，但小分子代謝物質譜檢測因特征離子少、背景干擾大，靈敏度欠佳。用 2 - 硝基苯甲醛與代謝物衍生化增分子量，用 10%三氯乙酸替代鹽酸，既促反應又有效除蛋白。

參考文獻：史蘭琴,孟鳳,任慧慧.UPLC-MS/MS檢測豬肉中硝基呋喃類藥物殘留方法的優(yōu)化[J].養(yǎng)殖與飼料,2022,21,(12):29-33.DOI:10.3969/j.issn.1671-427X.2022.12.008.