【問】細(xì)胞基質(zhì)穩(wěn)定性研究包含哪些內(nèi)容？

【答】細(xì)胞基質(zhì)的穩(wěn)定性研究包含：傳代培養(yǎng)過程中細(xì)胞基質(zhì)的穩(wěn)定性研究和貯存條件下的細(xì)胞庫穩(wěn)定性研究。

1、傳代培養(yǎng)過程中的穩(wěn)定性研究包含表型穩(wěn)定性研究和基因型穩(wěn)定性研究。具體考察項(xiàng)目見表1所示。表型穩(wěn)定性研究主要考察細(xì)胞基質(zhì)傳代過程中細(xì)胞倍增時(shí)間和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性，基因型穩(wěn)定性考察細(xì)胞基質(zhì)在傳代培養(yǎng)過程中重組DNA整合位點(diǎn)、拷貝數(shù)和目標(biāo)序列等基因水平上的穩(wěn)定性因素。建立主細(xì)胞庫時(shí)，應(yīng)同步考察其表型穩(wěn)定性和基因型穩(wěn)定性，以確定細(xì)胞庫的傳代次數(shù)限度，支持生產(chǎn)工藝的需求。建立工作細(xì)胞庫后，應(yīng)考察工作細(xì)胞庫的表型穩(wěn)定性和基因型穩(wěn)定性特征，確定工作細(xì)胞庫的傳代次數(shù)要求。

2、貯存條件下細(xì)胞庫的穩(wěn)定性研究指主細(xì)胞庫和工作細(xì)胞庫在長期貯存條件(液氮罐)下的穩(wěn)定性考察，該穩(wěn)定性研究應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注不同監(jiān)管機(jī)構(gòu)和注冊(cè)批準(zhǔn)的要求，應(yīng)按承諾的期限完成穩(wěn)定性評(píng)估。當(dāng)貯存的細(xì)胞復(fù)蘇用于臨床試驗(yàn)或商業(yè)化供應(yīng)時(shí)，細(xì)胞解凍后活力可證明這些復(fù)蘇細(xì)胞在貯存過程中仍然保持活力。通過制備臨床試驗(yàn)或商業(yè)化樣品，可證實(shí)復(fù)蘇后的細(xì)胞能用于生產(chǎn)所需產(chǎn)品。貯存條件下的穩(wěn)定性研究應(yīng)在生產(chǎn)過程中定期進(jìn)行監(jiān)測(如活細(xì)胞密度、細(xì)胞活率等)，這種監(jiān)測可在一支或者多支WCB被解凍后制備生產(chǎn)用細(xì)胞時(shí)進(jìn)行，或當(dāng)一支或者多支MCB被解凍用于制備WCB時(shí)進(jìn)行(MCB的貯存穩(wěn)定性)。如長時(shí)間未進(jìn)行生產(chǎn)活動(dòng)應(yīng)考慮定期對(duì)生產(chǎn)用細(xì)胞庫進(jìn)行活力測試。

來源:藥品GMP指南第2版無菌制劑(下冊(cè))(P835-836)