在化學分析中，樣品前處理是一個最常見的問題，在色譜檢測中檢測誤差30%來自于樣品前處理過程，生物樣本分析的主要障礙包括濃度低、干擾大、個體差異大等，樣品處理目的主要是去除樣品中的雜質(zhì)，富集樣品，血液樣本進入質(zhì)譜分析前通常會用到蛋白沉淀、液液萃取、固相萃取等前處理過程以提高檢測的靈敏度，減少基質(zhì)干擾，提高檢測的準確性。

消解方法

1、濕式消解法

硝酸消解法（對于較清的水溶液樣品）

硝酸-高氯酸消解法（消解含難氧化有機物的樣品）

硝酸-硫酸消解法（硝酸：硫酸=5：2，常加入少量過氧化氫）

硫酸-磷酸消解法（有利于測定時消除Fe3+等離子的干擾）

硫酸-高錳酸鉀消解法（常用于測定汞的水溶液樣品）

硝酸-過氧化氫消解法：有人用該方法消解生物制品測定氮、磷、鉀、硼、砷、氟等元素7.多元消解方法：需采用三元以上酸或氧化劑消解體系。

2、干灰化法（高溫分解法）

灰化法分解樣品不使用或使用少量化學試劑，并可處理較大稱量的樣品，故有利于提高測定微量元素的準確度。

灰化溫度一般為450～550℃，不宜處理測定易揮發(fā)組分的樣品，灰化所用用時間也較長。

根據(jù)樣品種類和待測組分的性質(zhì)不同，選用不同材料的坩堝和灰化溫度。常用的有石英、鉑、銀、鎳、鐵、瓷、聚四氟乙烯等性質(zhì)的坩堝。原則是坩堝不與樣品發(fā)生反應并在處理溫度下穩(wěn)定。

通?；一飿悠凡患悠渌噭珵榇龠M分解，抑制某些元素揮發(fā)損失，常加適量輔助灰化劑。樣品灰化完全后，經(jīng)稀硝酸或鹽酸溶解供分析測定。

固相萃取

（1）固相萃取（張海霞、朱彭齡，分析化學2000，28（9）：1172）它的優(yōu)點是：節(jié)省時間，交叉污染機會小，重現(xiàn)性好，回收率高，特別適用于微量試液處理。固相萃取的關(guān)鍵是根據(jù)樣品的性質(zhì)正確選擇固相萃取小柱及洗脫條件。

活化（再生） 加樣 洗滌 洗脫 

（2）固相微萃取固相微萃取集“采樣、萃取、濃縮、進樣”于一體，能夠與氣相色譜或高效液相色譜儀聯(lián)用樣品前處理技術(shù)。

※與SPE 相比SPME具有以下優(yōu)點：

(1)不使用有機溶劑萃取，降低了成本，避免了二次污染；

(2)操作時間短，從萃取進樣到分析結(jié)束不足1h；

(3)樣品用量少，幾mL～幾十mL；

(4)操作簡便，可減少待測組分的揮發(fā)損失；

(5)檢測限達 μg/L～ng/L水平；

(6)適于揮發(fā)性有機物、半揮發(fā)性有機物及不具揮發(fā)性的有機物。 ※固相微萃取的使用：關(guān)鍵在于“纖維頭的選擇”，這種情況類似于色譜柱的選擇，主要根據(jù)分析對象的分子量和極性。固相微處理技術(shù)適用于氣體、水樣、生物樣品（如，血、尿、體液等）的萃取提取。 

濃縮法

食品樣品經(jīng)提取、凈化后，有時凈化液的體積較大，被測組分的濃度太低，會影響最后結(jié)果的測定。此時需要對被測樣液進行濃縮，以提高被測成分的濃度。常用的方法有常壓濃縮和減壓濃縮兩種：

1.常壓濃縮法：

常壓濃縮法只能用于待測組分為非揮發(fā)性的樣品試液的濃縮，否則會造成待測組分的損失。操作可采用蒸發(fā)皿直接揮發(fā)。如果溶劑需要回收，則可用一般蒸餾裝置或旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。該法操作簡便、快速，是常用的方法。

2.減壓濃縮法：

減壓濃縮法主要用于待測組分為熱不穩(wěn)定性或易揮發(fā)的樣品凈化液的濃縮，其樣品凈化液的濃縮需采用K-D濃縮器。濃縮時，水浴加熱并抽氣減壓，以便濃縮在較低的溫度下進行，且速度快，可減少被測組分的損失。食品中有機磷農(nóng)藥的測定(如，甲胺磷、乙酰甲胺磷)多采用此法濃縮樣品凈化液。

蛋白純化

蛋白質(zhì)的分離、純化對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能研究具有重要意義，蛋白質(zhì)分離技術(shù)是利用蛋白質(zhì)的特性，如，溶解度、分子質(zhì)量大小、等電點、吸附特性和其它離子的生物親和力等的不同，選擇合適的分離模式并建立最佳的純化方法。常用的分離方法包括沉淀法、色譜法和電泳及毛細管電泳。 幾種方法供你選擇！ 

（1）沉淀法利用蛋白質(zhì)在溶液中的不同溶解度。蛋白質(zhì)的溶解度取決于分子中氨基酸的類型和電荷數(shù)，通過改變緩沖液pH值、離子強度、介電常數(shù)或溫度而改變蛋白質(zhì)的溶解度。主要使用的沉淀分離技術(shù)有鹽析、等電點沉淀、溶劑分級分離。 

（2）透析法利用半透膜只允許小分子透過而大分子不能透過的原理來分離溶液中的蛋白質(zhì)。通常至少需要12h。 

（3）超濾法采用半透膜在一定壓力下，按照分子質(zhì)量大小分離溶質(zhì)的一門技術(shù)。與透析相似，但速度快得多。 蛋白質(zhì)的構(gòu)成成分：氨基酸前處理1.氨基酸的分離和檢測手段，以往用化學分析法、層析法、比色法、氣相色譜法、氨基酸自動分析儀。

2.隨著高效液相色譜及填料的發(fā)展，HPLC在氨基酸檢測方面顯示了其特有的優(yōu)越性，但大多數(shù)氨基酸無紫外吸收和熒光發(fā)射特性，為提高分析檢測靈敏度和分離選擇特性，通常將氨基酸衍生，衍生方式有柱前衍生法與柱后衍生法。

3.HPLC與各種衍生相結(jié)合的氨基酸分析技術(shù)，構(gòu)成了具有廣泛適用性的現(xiàn)代氨基酸分析技術(shù)。 樣品處理測定蛋白質(zhì)中的總氨基酸，必須先把蛋白質(zhì)水解成游離氨基酸?？刹捎盟崴狻A水解和酶水解方法，其中以酸水解法應用最廣泛。 

（1）酸水解條件：常用硫酸或鹽酸進行水解。一般用6mol/LHCl，4mol/L H2SO4煮沸回流24小時左右。優(yōu)點：可蒸發(fā)除去鹽酸，水解徹底，終產(chǎn)物為L-α-氨基酸，產(chǎn)物單一，無消旋現(xiàn)象。缺點：色氨酸破壞，絲氨酸和蘇氨酸有一小部分被水解，同時天冬酰胺和谷氨酰胺的酰胺基被水解下來。 

（2）堿水解條件：分析色氨酸可采用堿水解法，一般與5mol/L NaOH煮沸10～20小時。優(yōu)點：水解徹底，色氨酸不被破壞，水解液清亮。缺點：產(chǎn)生消旋產(chǎn)物，破壞的氨基酸多。 

（3）酶水解某些氨基酸對酸或堿不穩(wěn)定，在酸或堿水解時易被破壞，某些蛋白質(zhì)樣品在酸或堿水解不完全，影響某些氨基酸的回收率。對這些樣品可采用酶水解法。酶水解法可定量測定天東氨酸、谷氨酸和色氨酸。條件：蛋白酶，如，胰蛋白酶、糜蛋白酶，常溫37～40℃， pH值5～8 。優(yōu)點：氨基酸不被破壞，不發(fā)生消旋現(xiàn)象。缺點：水解不完全，中間產(chǎn)物多。

生物樣品分析前處理技術(shù)

為什么要進行前處理？ 存在形式多樣：游離型藥物、與蛋白質(zhì)結(jié)合型藥物、代謝物、葡萄糖醛酸苷、硫酸酯綴合物等。 成分復雜：蛋白質(zhì)、糖、脂肪、尿素、Na+、K+、X-等。 

（1）去除蛋白質(zhì)釋放結(jié)合型藥物、減少提取過程中乳化、保護儀器、提高靈敏度。。。加入與水混溶的有機溶劑中性鹽強酸加入含鋅鹽、銅鹽的沉淀劑酶解法 

（2）綴合物的水解酸水解/酶水解 

（3）有機破壞測定生物樣品中的金屬離子，常用HNO3-HClO4作為消解劑，一般得到高價態(tài)金屬離子。 

（4）分離、純化和濃集使被測物在所用分析技術(shù)的檢測范圍內(nèi)，常用萃取法：液-液萃取法（LLE）液-固萃取法（LSE）相當于縮小的柱色譜法濃集末次萃取液盡量少揮去萃取溶劑 

（5）化學衍生化可使藥物：具有能被分離的性質(zhì)提高靈敏度增強穩(wěn)定性提高對光學異構(gòu)體分離的能力