鹽酸氟西汀是全球第一個上市的選擇性 5- 羥色胺再攝取抑制劑（SSRIs）的抗抑郁藥物，由美國禮來公司率先研制成功。但文獻資料表明，關于鹽酸氟西汀膠囊溶出曲線的測定和溶出曲線方法研究的文獻很少。

因此，參照《中華人民共和國藥典》（2015年版），建立鹽酸氟西汀膠囊溶出曲線測定方法，考察在 4 中不同介質中的溶出行為，并與原研藥進行對比， 為鹽酸氟西汀膠囊仿制藥的一致性評價工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

SOTAX 溶出試驗儀、 1260 系列高效液相色譜儀、 紫外檢測器、 1200 型二極管陣列檢測器（DAD）和色譜工作站，美國安捷倫科技公司；AL104 電子天平、 SevenEasy S20 精密 pH計，梅特勒 - 托利多公司。

鹽酸氟西汀工作用對照品（自制，批號為 GB02-014 ， w=99.58%）；鹽酸氟西汀膠囊原研藥 （法國Patheon France 生產(chǎn)，批號為 4525A ， 5545A）；鹽酸氟西 汀 膠 囊 （自 制 ， 批 號 為 T160552 ，  T160553 ，T160554）。

甲醇（色譜純），賽默飛世爾科技（中國）有限公司；磷酸（分析純）、三乙胺（色譜純）、四氫呋喃（色譜純），國藥集團化學試劑有限公司；純化水，自制。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent Zorbax Eclipse Plus C 8（ 4.6 mm×250 mm ， 5 μm ）或效能相當?shù)纳V柱，辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：三乙胺緩沖溶液（取三乙胺 10 mL ， 加 980 mL 水， 搖勻， 用磷酸調(diào)節(jié) pH 至6.0 ，用水稀釋至 1000 mL)- 甲醇 - 四氫呋喃（體積比為 62∶8∶30 ）；紫外檢測波長：227 nm ；進樣量：10 μL 。

1.2.2 溶液配制

1.2.2.1 對照品溶液

取鹽酸氟西汀對照品適量，精密稱定，分別用相應的溶出介質溶解并定量稀釋，制成每 1 mL 中約含44 μg 鹽酸氟西汀的溶液，作為對照品溶液。

1.2.2.2 供試品溶液

取樣品每批 12 粒、溶出介質 500 mL ，按溶出度與釋放度測定法 [2015 年版《中華人民共和國藥典》0931 通則第二法（槳法） ] 進行溶出度試驗，轉速為50 r/min ，溫度為 37.0 ℃ ，分別于10，15 ，20 及 30 min時，取溶出液10mL過濾（及時補充相同溫度、相同體積的溶出介質），取續(xù)濾液作為供試品溶液。

1.2.3 溶出介質的選擇

鹽酸氟西汀膠囊已被收入美國藥典（USP）標準和《中華人民共和國藥典標準》（ 2015年版），標準中溶出度測定方法均為槳法，轉速為 50r/min ，溶出介質為 900 mL水；區(qū)別在于兩國標準規(guī)定的限度不同， USP 標準限度為30min溶出不低于80% ， 中國藥典標準為15min 溶出不低于 80% 。

參考已有標準和相關文獻，擬采用槳法和溶出介質體積500mL進行溶出度試驗。鹽酸氟西汀為高溶解性、高滲透性藥物，屬于生物藥劑學分類系統(tǒng)（BCS）Ⅰ 類，其解離常數(shù)（pKa）為9.62 。

根據(jù)相關文獻報道 ，選定溶出介質為水、 0.1mol/L 鹽酸溶液、醋酸鹽緩沖液（ pH=4.5）和磷酸鹽緩沖液（pH=6.8）。在（37.0±0.5） ℃ 下，用以上 4種介質作為溶劑，制備鹽酸氟西汀飽和溶液，經(jīng)高效液相色譜（HPLC）法測得準確質量濃度，計算鹽酸氟西汀在4 種介質中的溶解度，進而考察是否達到漏槽條件，結果見表 1。

取樣品原研藥（批號：4525A ）適量，分別采用上述 4 種溶出介質，依法測定，計算各時間點的累積溶出度并繪制溶出曲線，詳見圖1 。

表 1 和圖 1 表明， 原研藥在溶出介質水、 0.1mol/L 鹽酸溶液、醋酸鹽緩沖液（ pH=4.5 ）和磷酸鹽緩沖液（ pH=6.8 ）中具有較好的溶解性，均達到漏槽條件。因此， 4 種介質可以直接作為仿制藥與原研藥進行溶出比較的溶出介質。

1.2.4 轉速的選擇

采用槳法，對 75 r/min 和 50 r/min 進行對比，在選定的水中測定溶出度， 繪制溶出曲線， 結果見圖2 。

圖 2 顯示，采用 75 與 50 r/min 進行溶解的溶出曲線無明顯差異，說明低轉速即可達到分析要求，且藥典標準為 50 r/min ，因此，選擇低轉速 50 r/min 即可。

2 結果與討論

2.1方法學考察

2.1.1 線性關系考察

精密稱定鹽酸氟西汀原料（批號：151001）適量，分別用水、 0.1 mol/L 鹽酸溶液、 pH=4.5 的醋酸鹽緩沖液、 pH=6.8 的磷酸鹽緩沖液溶解并定量稀釋制成一系列質量濃度的溶液，照“ 1.2.1 ”項下色譜條件，精密量取上述溶液各10 mL ，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行線性回歸。結果表明，在 9.04～63.28 μg/mL 范圍內(nèi)，鹽酸氟西汀質量濃度與峰面積線性關系良好。具體回歸方程與線性范圍見表 2 。

2.1.2 重復性試驗

取自制樣品（批號：T160554）適量，按“ 1.2.2”項下方法制備供試品溶液，同法操作 6 份。同法制備鹽酸氟西汀對照品溶液。精密量取上述溶液各 10 μL ，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，考察重復性。檢測結果表明水、 0.1 mol/L 鹽酸溶液、 pH=4.5 的醋酸鹽緩沖液、 pH=6.8 的磷酸鹽緩沖液中的相對標準偏差（RSD）分別為 1.99% ， 2.09% ， 1.08% 和 1.93% ，表明本方法重復性良好。

2.1.3 穩(wěn)定性試驗

取上述飽和供試品溶液， 分別于室溫下放置0 ，2 ， 4 ，6 ，8 ，10 ，12 ， 14 ，16 ，18 ，20 ，22 ，24h 后測定鹽酸氟西汀含量，考察溶液的穩(wěn)定性。結果顯示，水、0.1 mol/L 鹽酸溶液、 pH=4.5 醋酸鹽緩沖液、 pH=6.8磷酸鹽緩沖液等 4 種溶出介質中的 RSD 分別為0.14% 、 0.11% 、 0.12% 和 0.07% ，表明供試品溶液在 4種溶出介質中室溫下 24h 穩(wěn)定。

2.1.4 回收率試驗

精密稱取鹽酸氟西汀原料 ( 批號：151001) 適量，各置于 100 mL 容量瓶中，加入空白輔料溶液，分別按鹽酸氟西汀膠囊標示量 （以氟西汀計 20 mg ）的80% ， 100% ， 120% ，加水、 0.1 mol/L 鹽酸溶液、 pH=4.5的醋酸鹽緩沖液以及 pH=6.8 的磷酸鹽緩沖液配制一系列不同質量濃度的供試品溶液， 采用 HPLC 法測定鹽酸氟西汀的含量，并計算其回收率，結果如表3 所示。

2.2  溶出曲線繪制

取 3 批樣品 （批號分別為 T160552 ， T160553 ，T160554）和1 批原研藥（批號：55445A ）各 12 片，取“ 1.2 ”項下 4 種溶出介質適量，分別按“ 1.2.2 ”項下方法 制 備 供 試 品 溶 液 ；取 出 上 述 供 試 品 溶 液 和“ 1.2.2.1 ”所述對照品溶液各適量，采用 HPLC 法測定并計算各時間點的累積溶出度，繪制溶出曲線，如圖 3 所示。

2.3 溶出曲線相似性評價

按照 《普通口服固體制劑溶出曲線測定與比較指導原則》，比較自制樣品與原研藥的溶出曲線相似性。因為自制樣品與原研藥在 15 min 內(nèi)的平均溶出度均不低于 85% ，所以可認為自制樣品與原研藥在4 種溶出介質中的溶出行為相似。

3 結論

經(jīng)過溶出介質選擇、 轉速選擇等方法的建立以及驗證， 結果表明文中所述 HPLC 法適用于鹽酸氟西汀膠囊的溶出度測定；鹽酸氟西汀膠囊仿制藥與原研藥的體外溶出曲線具有相似性， 表明其質量一致性較好。

作者：郭燕燕，丁云暉，張 婷，金 拓