即在樣品空白中加入一系列不同濃度的分析物，隨機對每一個濃度點進行約7次的獨立測試，通過繪制陽性(或陰性)結果百分比與濃度相對應的反應曲線確定閾值濃度。該方法也可用于定性方法中檢出限的確定。

樣品空白值的平均值和標準偏差均受樣品基質影響，因此最低檢出限也因受樣品基質種類的影響而不同。如果利用此條件進行符合性判定時，需要定期用實際檢測數據更新精密度數值。

如果在LOD或接近LOD的樣品數據無法獲得時，可利用校準方程的參數評估儀器的LOD。如果用空白平均值加上空白的3倍標準偏差，儀器對于空白的響應即為校準方程的截距a，儀器響應的標準偏差即為校準的標準誤差(Sy/X)。

故可利用方程 

此方程可廣泛應用于分析化學。然而由于此方法為外推法，所以當濃度接近于預期的LOD時，結果就不如由實驗得到的結果可靠，因此建議分析濃度接近于LOD的樣品，應確證在適當的概率下被分析物能夠被檢測出來。

對于定量方法來說，由于儀器分析過程都會有背景噪音，常用的方法就是利用已知低濃度的分析物樣品與空白樣品的測量信號進行比較，確定能夠可靠檢出的最小的濃度。典型的可接受的信噪比是2:1或3:1。   

對于定性方法來說，低于臨界濃度時選擇性是不可靠的。該臨界值會隨著試驗條件中的試劑、加標量、基質等不同而變化。確定定性方法的LOD時，可以通過往空白樣品中添加幾個不同濃度水平的標液，在每個水平分別隨機檢測10次，記錄檢出結果(陽性或陰性)，繪制樣品檢出的陽性率(寫)或陰性率(%)對添加濃度的曲線，臨界濃度即為檢測結果不可靠時的拐點。定性分析中臨界值的確定可參考下表進行。如表示例中，當樣品中待測物濃度低于100μg/g時，陽性檢測結果已經不具備100%的可靠性。