【關(guān)鍵詞】美國食品藥品監(jiān)督管理局；亞硝胺類藥物相關(guān)雜質(zhì)；致癌性，可接受攝入量限度；監(jiān)管

美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）于2023年8月7日發(fā)布了指導(dǎo)原則“亞硝胺類藥物相關(guān)雜質(zhì)（nitrosamine drug substance related impurities，NDSRI）推薦可接受攝入量限度行業(yè)指導(dǎo)原則”[1]，該指導(dǎo)原則由FDA藥物評價(jià)與研究中心（CDER）組織發(fā)布。FDA在實(shí)施本指導(dǎo)原則前并未事先征求公眾意見，因?yàn)镕DA認(rèn)為，由于這類亞硝胺雜質(zhì)在多種藥物制劑中發(fā)現(xiàn)，也可能存在于原料藥（API）中，對于藥品申請人和生產(chǎn)企業(yè)而言，及時(shí)提供該議題的補(bǔ)充信息非常重要，因此讓公眾提前參與評論并不可行或不合適。自FDA《人用藥品亞硝胺類雜質(zhì)控制行業(yè)指導(dǎo)原則》發(fā)布以來，F(xiàn)DA已經(jīng)收到了關(guān)于NDSRI的報(bào)告。NDSRI與原料藥具有結(jié)構(gòu)相似性（在化學(xué)結(jié)構(gòu)中具有API或API片段），是每種API特有的雜質(zhì)。根據(jù)原料藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)，在大量藥物制劑中存在形成NDSRI的風(fēng)險(xiǎn)。因此該指導(dǎo)原則在FDA發(fā)布之日起執(zhí)行，但仍會根據(jù)FDA的優(yōu)良指導(dǎo)原則規(guī)范接受各方意見。

我國于2020年5月8日發(fā)布了《化學(xué)藥物中亞硝胺類雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》[2]，該指導(dǎo)原則主要涉及工藝產(chǎn)生、降解途徑和污染引入等途徑產(chǎn)生的亞硝胺雜質(zhì)，未涉及NDSRI。國際人用藥品注冊技術(shù)協(xié)調(diào)會（ICH）于2024年6月成立了M7亞硝胺亞組，計(jì)劃在2030年3月前完成亞硝胺相關(guān)雜質(zhì)的國際協(xié)調(diào)。本文將詳細(xì)介紹FDA“亞硝胺類藥物相關(guān)雜質(zhì)推薦可接受攝入量限度行業(yè)指導(dǎo)原則”主要內(nèi)容，以期為我國亞硝胺類藥物相關(guān)雜質(zhì)可接受攝入量限度制定及藥物開發(fā)評價(jià)給予一定的啟發(fā)和幫助。

1.該指導(dǎo)原則的前言

該指導(dǎo)原則為藥品生產(chǎn)企業(yè)和申請人提供了一種用于預(yù)測藥品中NDSRI可能存在的致突變性和致癌性潛力的原則，并對NDSRI的可接受攝入量（acceptable intake，AI）限度給出了建議。NDSRI通常是由制劑中含有仲胺或叔胺的API（或API片段）在接觸亞硝化劑（如制劑輔料中的殘留亞硝酸鹽）時(shí)形成。NDSRI通常缺乏致癌性和致突變性試驗(yàn)數(shù)據(jù)，因此無法根據(jù)該數(shù)據(jù)確定AI限度。本指導(dǎo)原則提供了一種利用NDSRI的結(jié)構(gòu)特征預(yù)測其致癌潛力類型并根據(jù)不同的類型推薦相應(yīng)AI限度的方法。

由于對藥品中NDSRI的存在和可接受水平具有不確定性，因此對該類藥品的監(jiān)管具有一定的挑戰(zhàn)性，可能導(dǎo)致一些申請人進(jìn)行不必要的研究或在某些情況下停售藥品。此外，由于在許多藥品中發(fā)現(xiàn)亞硝胺雜質(zhì)，可能導(dǎo)致藥物因供應(yīng)中斷而出現(xiàn)藥品短缺。

FDA建議對NDSRI進(jìn)行基于風(fēng)險(xiǎn)的安全性評估。生產(chǎn)企業(yè)和申請人可結(jié)合該指導(dǎo)原則以及FDA于2021年2月發(fā)布的《人用藥中亞硝胺雜質(zhì)控制行業(yè)指導(dǎo)原則》[3]的建議確定其制劑和原料藥中NDSRI的AI限度。FDA認(rèn)為，F(xiàn)DA推薦的AI限度以及生產(chǎn)企業(yè)和申請人得出的AI限度可能會隨著亞硝胺學(xué)科發(fā)展以及研究進(jìn)展而變化。隨著業(yè)界對亞硝胺雜質(zhì)的致突變性和致癌性風(fēng)險(xiǎn)的認(rèn)識增加，F(xiàn)DA鼓勵(lì)業(yè)界分享此類研究信息以幫助擴(kuò)展現(xiàn)有的知識庫。

該指導(dǎo)原則適用范圍包括已批準(zhǔn)或待批準(zhǔn)的新藥注冊申請（NDA）或仿制藥注冊申請（ANDA）所涉及的處方藥和非處方藥，以及未通過藥品申請而銷售的產(chǎn)品，如《聯(lián)邦食品，藥品和化妝品法》第505G節(jié)的非處方藥，或符合現(xiàn)行良好生產(chǎn)規(guī)范（cGMP）的其他藥品。本指導(dǎo)原則也適用于臨床開發(fā)中的處方藥和非處方藥，還適用于含有化學(xué)合成片段的生物制品或含有藥物成分的生物主導(dǎo)組合產(chǎn)品。本指導(dǎo)原則不適用于晚期抗腫瘤藥中的NDSRI［此類藥物可參考ICH S9、ICH Q3A（R2）、ICH Q3B（R2）］。

自2018年FDA獲知纈沙坦[4]中存在一種N-亞硝基甲胺（NDMA）雜質(zhì)以來，F(xiàn)DA一直致力于解決藥品中亞硝胺雜質(zhì)的評價(jià)和監(jiān)管問題。藥品中最初報(bào)告的亞硝胺雜質(zhì)是小分子亞硝胺，如NDMA，該化合物是由胺（仲胺、叔胺或季胺）和亞硝酸鹽通過亞硝化反應(yīng)形成，通常是由于在原料藥合成時(shí)加入了亞硝酸、亞硝酸鹽和酰胺溶劑。2020年，F(xiàn)DA發(fā)布了《亞硝胺指導(dǎo)原則》，建議API和制劑生產(chǎn)企業(yè)采取相應(yīng)的措施對雜質(zhì)進(jìn)行檢測，防止藥品中的亞硝胺雜質(zhì)含量超標(biāo)或盡量避免亞硝胺雜質(zhì)的產(chǎn)生?！秮喯醢分笇?dǎo)原則》建議生產(chǎn)企業(yè)和申請人應(yīng)采取三步法以減少藥品中亞硝胺雜質(zhì)：（1）對其API和制劑中的亞硝胺進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估；（2）發(fā)現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)后進(jìn)行確證性檢測；（3）對已經(jīng)批準(zhǔn)或正在審評的NDA和ANDA品種，為避免或減少原料藥和制劑中亞硝胺雜質(zhì)的產(chǎn)生而實(shí)施的變更應(yīng)當(dāng)向FDA報(bào)告。根據(jù)《亞硝胺指導(dǎo)原則》，API和制劑生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)采取適當(dāng)措施以防止亞硝胺雜質(zhì)超標(biāo)。由于亞硝胺類化合物對多種動物種屬具有潛在的遺傳毒性，有些被歸類為潛在的致癌物，因此在《ICH M7（R2）評估和控制藥物中的DNA活性（致突變）雜質(zhì)以限制潛在的致癌風(fēng)險(xiǎn)》（2023年7月）中，將它們歸入關(guān)注隊(duì)列（cohort of concern）。ICH M7（R2）指導(dǎo)原則提供了控制已知或潛在致突變致癌物的建議，如硝基化合物，保證人體在一定的暴露水平下致癌性風(fēng)險(xiǎn)基本可忽略不計(jì)[5]。

在AI限度水平下，保守假設(shè)人一生（70年）中每日都暴露于該雜質(zhì)，每10萬人中會增加1例患癌癥風(fēng)險(xiǎn)。換句話說，AI限度是指每天接觸一種化合物如NDMA，在接觸70年后，患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)約為1∶100 000。與人類一生中罹患任何類型癌癥的總發(fā)病率（高于1/3）相比，這一風(fēng)險(xiǎn)在理論上只是小幅增加。如果已明確亞硝胺雜質(zhì)具有潛在風(fēng)險(xiǎn)，并且已通過適當(dāng)?shù)臋z測方法確認(rèn)了亞硝胺水平，則應(yīng)制定合理的控制策略，以確保亞硝胺雜質(zhì)保持在或低于AI限度。根據(jù)ICH M7（R2）的建議，AI限度通?；跀?shù)據(jù)庫和文獻(xiàn)搜索到的致癌性和細(xì)菌致突變數(shù)據(jù)來確定。

隨著FDA對NDRSI的認(rèn)識不斷深入，該指導(dǎo)原則建議對NDSRI進(jìn)行基于風(fēng)險(xiǎn)的安全性評估。該指導(dǎo)原則中提出的預(yù)測致癌性潛力分類方法（CPCA）是對ICH M7（R2）中提供方法的補(bǔ)充。它基于ICH M7（R2）的原則，建議使用結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系（SAR）對雜質(zhì)的致突變性和致癌性風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評估和分類，以限制潛在的致癌性風(fēng)險(xiǎn)。由于對N-硝基化合物的SAR的科學(xué)研究已取得一定進(jìn)展，因此，F(xiàn)DA建議使用這種預(yù)測方法來評估NDSRI的致癌性，并更準(zhǔn)確地預(yù)測其致突變潛力，對于不同致癌性分類的NDSRI將推薦不同的AI限度。

確定NDSRI的AI限度通常比確定小分子亞硝胺的AI限度更具挑戰(zhàn)性，因?yàn)閷γ糠NAPI來說NDSRI都是獨(dú)特的，所以NDSRI的安全性數(shù)據(jù)（如嚙齒類動物致癌性數(shù)據(jù)）有限。FDA已經(jīng)對有限數(shù)量的NDSRI發(fā)布了推薦的AI限度，但與更常見的亞硝胺不同，目前大多數(shù)NDSRI尚未確定推薦的AI限度。

AI限度的確定需要基于安全性評估，并且AI限度需維持或低于FDA已確定的不會對患者造成安全性擔(dān)憂的雜質(zhì)水平。一種化合物特定的AI可根據(jù)已發(fā)表的科學(xué)文獻(xiàn)中嚙齒類動物致癌性數(shù)據(jù)計(jì)算，例如TD50值（該劑量下導(dǎo)致腫瘤發(fā)生率達(dá)到50%，相當(dāng)于癌癥風(fēng)險(xiǎn)概率1/2）。致癌性數(shù)據(jù)可從致癌性數(shù)據(jù)庫（CPDB）或Lhasa致癌性數(shù)據(jù)庫（LCDB）獲取。約有140個(gè)亞硝胺類化合物（大多數(shù)為小分子亞硝胺）的TD50值最早在CPDB中報(bào)告，并已被納入LCDB。這些化合物的致癌效力值差異較大（范圍超過4個(gè)數(shù)量級），并且有一些亞硝胺為非致癌物質(zhì)[6]。然而，很多研究數(shù)據(jù)并不可靠，所以不能僅依靠這些研究來確定AI限度。

當(dāng)NDSRI的致突變性沒有得到充分表征時(shí)，F(xiàn)DA和申請人支持使用定量（Q）SAR方法確定一種經(jīng)可靠方法檢測過的替代化合物（其結(jié)構(gòu)和反應(yīng)性與NDSRI相似）以此預(yù)估致癌性，根據(jù)此方法也可以得到具有科學(xué)性的AI限度。在這種情況下，替代化合物在與NDSRI相同的化學(xué)環(huán)境中應(yīng)含有N-硝基警示結(jié)構(gòu)，并且具有可靠的致癌性數(shù)據(jù)[7-9]。替代品的選擇依據(jù)非常重要，因?yàn)閺奶娲衔镏蝎@得的數(shù)據(jù)將用于對缺少相關(guān)數(shù)據(jù)的化合物進(jìn)行定量或定性的評估（通常稱為交叉參照評估，read-across analysis）。

在選擇合適的參比化合物進(jìn)行交叉參照評估時(shí)，NDSRI的N-亞硝基基團(tuán)的周圍結(jié)構(gòu)環(huán)境是一個(gè)重要考慮因素，這些結(jié)構(gòu)環(huán)境可能包括取代度、空間體積、電子的影響、代謝活化潛力、產(chǎn)生的代謝物的穩(wěn)定性/反應(yīng)性和總相對分子質(zhì)量。

3.根據(jù)預(yù)測的致癌性分類確定AI限度

該指導(dǎo)原則推薦了一種可根據(jù)NDSRI的激活和失活結(jié)構(gòu)特征預(yù)測NDSRI的致癌性分類從而確定AI限度的方法。激活或失活的結(jié)構(gòu)特征分別指增加或降低NDSRI致癌性的分子亞結(jié)構(gòu)。該方法參考了近年來文獻(xiàn)發(fā)表的亞硝胺化合物SAR概念[7-9]，認(rèn)為α-羥基化代謝激活機(jī)制[10]是導(dǎo)致許多亞硝胺化合物致突變和強(qiáng)致癌性的原因，因此可根據(jù)NDSRI的結(jié)構(gòu)特征來預(yù)測其致突變和致癌潛力，認(rèn)為含有直接促進(jìn)或抑制代謝激活的結(jié)構(gòu)特征，或可通過其他生物途徑加快亞硝胺清除的結(jié)構(gòu)特征將對NDSRI致癌性產(chǎn)生相應(yīng)的影響。

該指導(dǎo)原則中提出的預(yù)測致癌性分類方法適用于N-亞硝胺基團(tuán)兩側(cè)結(jié)合一個(gè)碳原子的NDSRI，這些碳原子不直接通過雙鍵與雜原子連接（例如N-亞硝基酰胺、N-亞硝基脲、N-亞硝基胍和其他類似分子結(jié)構(gòu)，都不包括在該指導(dǎo)原則內(nèi)）。此外，該方法不適用于N-亞硝胺基團(tuán)在芳香環(huán)結(jié)構(gòu)內(nèi)的NDSRI（例如亞硝基吲哚）。

該指導(dǎo)原則中提出的預(yù)測致癌性方法是基于CPDB和LCDB中公布的小分子亞硝胺數(shù)據(jù)信息，同時(shí)參考了在近期文獻(xiàn)中發(fā)表的亞硝胺化學(xué)和生物機(jī)制考慮因素[6,11]。在開發(fā)該模型時(shí)主要根據(jù)以下幾個(gè)方面確定激活和失活結(jié)構(gòu)特征權(quán)重，如已發(fā)表文獻(xiàn)中報(bào)告的SAR趨勢，在CPDB和LCDB中觀察到的SAR趨勢，以及對化合物的化學(xué)和生物機(jī)制途徑的一般科學(xué)性解讀。NDSRI可應(yīng)用基于結(jié)構(gòu)特征的方法來預(yù)測NDSRI的相對致癌性，相比于采用亞硝胺替代分子確定AI，這種方法考慮了分子中多種特征的影響，并利用了已發(fā)表的科學(xué)文獻(xiàn)中更多的致癌性數(shù)據(jù)。FDA預(yù)計(jì)對這些結(jié)構(gòu)特征的分析以及對這些特征的權(quán)重分配，可能會隨著科學(xué)的進(jìn)步和積累數(shù)據(jù)的增多而發(fā)生改變。

FDA認(rèn)為，該方法不適用于FDA在某些情況下推薦的AI限度（例如，基于特定化合物評估或替代化合物交叉參照評估）。通常，F(xiàn)DA會通過直接與申請人或生產(chǎn)企業(yè)溝通或通過FDA指導(dǎo)原則（亞硝胺指導(dǎo)原則）來討論推薦的AI限度。當(dāng)FDA根據(jù)特定化合物評估或替代化合物交叉參照評估發(fā)布推薦的AI限度時(shí)，生產(chǎn)企業(yè)和申請人應(yīng)當(dāng)采用FDA推薦的AI限度，而非該指導(dǎo)原則中的預(yù)測致癌性分類方法來確定推薦的AI限度。

該指導(dǎo)原則中描述的預(yù)測致癌性分類方法是一種保守的方法，代表了當(dāng)前最具科學(xué)性的方法，并有望隨著新數(shù)據(jù)的獲得而進(jìn)一步完善和擴(kuò)展。此外，同所有指導(dǎo)性文件一樣，在滿足適用的法規(guī)要求下，生產(chǎn)企業(yè)和申請人也可以使用其他替代方法。

FDA建議根據(jù)NDSRI預(yù)測CPCA制定以下AI限度。表1展示了預(yù)測的致癌性分類和相應(yīng)建議的AI限度。

▲表1- NDSRI 的 5 種預(yù)測致癌性分類和相關(guān)推薦 AI 限度

圖1所示的流程圖根據(jù)NDSRI中激活和失活結(jié)構(gòu)特征展示了將NDSRI歸類為不同致癌性分類的過程，并推薦了相應(yīng)的AI限度。該指導(dǎo)原則附錄A[1]提供了2個(gè)案例展示如何對致癌效力評分并確定相應(yīng)的致癌性分類。流程圖中NDSRI中α-和β-碳是相對于N-亞硝基定義的，如圖2所示。

如上所述，該指導(dǎo)原則中描述的預(yù)測致癌性分類和推薦的AI限度方法適用于N-亞硝基兩側(cè)均含有碳原子的NDSRI，其中碳原子不直接與雜原子雙鍵連接（例如N-亞硝酰胺、N-亞硝基脲、N-亞硝基胍和其他相關(guān)結(jié)構(gòu)除外）。此外，致癌性分類方法不適用于N-亞硝基位于芳香環(huán)內(nèi)的NDSRI（例如亞硝化吲哚）。圖1描述了如何預(yù)測NDSRI的致癌性分類，并推薦了相應(yīng)的AI限度。對于含有2個(gè)N-亞硝基的NDSRI，應(yīng)選擇預(yù)測致癌性最高的基團(tuán)來確定整個(gè)分子的AI限度。

▲圖1-預(yù)測 NDSRI 致癌性分類并確定相關(guān)推薦 AI 限度的流程圖

FDA指出，NDSRI推薦的AI限度是針對藥物中單一的NDSRI。如果藥物中檢測到多個(gè)亞硝胺雜質(zhì)（多個(gè)NDSRI和/或小分子亞硝胺），并且根據(jù)每日最大劑量推算，亞硝胺的總水平超過了藥物中致癌性最強(qiáng)的亞硝胺的推薦AI限度，生產(chǎn)企業(yè)或申請人應(yīng)與FDA聯(lián)系。如果單個(gè)亞硝胺的推薦AI限度差異很大，那么根據(jù)致癌性最強(qiáng)的單個(gè)亞硝胺限度來確定總亞硝胺限度可能不切實(shí)際，在這種情況下，也鼓勵(lì)申請人與FDA溝通，討論亞硝胺雜質(zhì)限度問題。

經(jīng)確認(rèn)，一些含有仲胺或叔胺的API可能存在生成NDSRI風(fēng)險(xiǎn)。假設(shè)在特定的制劑處方和生產(chǎn)工藝條件下，例如藥物輔料中含有殘留的亞硝酸鹽，這些API可能會生成NDSRI。FDA將基于對化學(xué)結(jié)構(gòu)的分析，得出當(dāng)API中含有亞硝化形式的仲胺和二甲基叔胺基團(tuán)時(shí)，可以對API中形成的NDSRI采用預(yù)測致癌性分類方法推薦AI限度的結(jié)論[12]。

FDA期望生產(chǎn)企業(yè)和申請人參照《亞硝胺指導(dǎo)原則》中第III和V節(jié)中描述的三步緩解策略來確定是否存在亞硝胺雜質(zhì)包括NDSRI，但《亞硝胺指導(dǎo)原則》中推薦的時(shí)間線不適用于與NDSRI相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)評估、確證性檢測和提交變更。對于NDSRI，F(xiàn)DA根據(jù)藥品的監(jiān)管狀態(tài)為生產(chǎn)企業(yè)和申請人推薦了不同的實(shí)施時(shí)間線。

4.1.1  對于已批準(zhǔn)或上市藥品的推薦時(shí)間線FDA已了解到，一些生產(chǎn)企業(yè)和申請人已經(jīng)考慮了在《亞硝胺指導(dǎo)原則》中最初確定的亞硝胺雜質(zhì)，但并未對NDSRI進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估。FDA建議，如果之前并未對NDSRI進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估，作為整體風(fēng)險(xiǎn)管理的一部分，生產(chǎn)企業(yè)和申請人應(yīng)在本指導(dǎo)原則發(fā)布后3個(gè)月內(nèi)重新評估風(fēng)險(xiǎn)，建議在2023年11月1日之前完成評估。一旦確定了NDSRI的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)盡快采用靈敏且經(jīng)過適當(dāng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行確證性檢測，對于具有高風(fēng)險(xiǎn)的藥品應(yīng)立即進(jìn)行確證性檢測。如果在藥物中檢測到的NDSRI水平超過了推薦的AI限度，F(xiàn)DA建議生產(chǎn)企業(yè)和申請人制定控制策略和/或設(shè)計(jì)方法，控制NDSRI在可接受的水平內(nèi)。FDA建議在2025年8月1日前完成藥品NDSRI確證性檢測，同時(shí)在藥品申請時(shí)提交必要變更。至2025年8月1日，生產(chǎn)企業(yè)和申請人應(yīng)確保其藥品中NDSRI符合FDA推薦的AI限度要求。

FDA認(rèn)為實(shí)施時(shí)間線包括調(diào)查NDSRI雜質(zhì)產(chǎn)生的根本原因，確定適當(dāng)?shù)挠行ё兏ɡ?，變更生產(chǎn)工藝、成分供應(yīng)商、制劑處方等）[13]，并證明變更將盡可能減少NDSRI的產(chǎn)生而不會對藥品質(zhì)量產(chǎn)生不利影響。FDA可根據(jù)現(xiàn)有信息要求申請人進(jìn)行加快的風(fēng)險(xiǎn)評估、確證性檢測或采取其他監(jiān)管措施。

如果確定藥品中存在NDSRI風(fēng)險(xiǎn)，則應(yīng)采用靈敏且經(jīng)過適當(dāng)驗(yàn)證的方法對各批次進(jìn)行確證性檢測。如果檢測到亞硝胺雜質(zhì)，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)研究亞硝胺雜質(zhì)產(chǎn)生的根本原因，并根據(jù)《亞硝胺指導(dǎo)原則》中的建議，對生產(chǎn)工藝或制劑處方實(shí)施變更，以徹底避免或減少亞硝胺雜質(zhì)的產(chǎn)生。生產(chǎn)企業(yè)必須按照適當(dāng)?shù)囊髮?shí)施變更。此外，申請人必須通過補(bǔ)充或修正申請的方式提交擬訂的制劑變更。一般而言，F(xiàn)DA認(rèn)為已上市藥品的制劑處方變更為重大變更，此類變更需要提交事先批準(zhǔn)補(bǔ)充申請（PAS）。

如果根據(jù)預(yù)測CPCA確定NDSRI等于或低于FDA推薦的AI限度，生產(chǎn)企業(yè)或申請人仍應(yīng)制定適當(dāng)?shù)目刂撇呗裕源_保亞硝胺水平不高于AI限度。申請人應(yīng)向FDA報(bào)告對已批準(zhǔn)藥物的相應(yīng)變更。如果檢測到的NDSRI水平超過FDA建議的AI限值，應(yīng)參見第V章B節(jié)中的建議（即本文中4.2部分內(nèi)容）。

4.1.2  對于正在研究和正在審評過程中的藥品的推薦時(shí)間線提交前階段：FDA建議申請人在提交首次申請之前，應(yīng)對NDSRI進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估，并酌情進(jìn)行確證性檢測。但是，如果在首次申請?zhí)峤粫r(shí)尚未完成風(fēng)險(xiǎn)評估及確證性檢測（如適用），且未提交藥物主文件（DMF）變更或申請變更，上述材料可以通過修正案形式提交。此類修訂應(yīng)在首次申請?zhí)峤缓蟊M快提交，以盡量減少對申請審評時(shí)間線的任何潛在不良影響。

待FDA審評的申請：待審品種的申請人應(yīng)盡快對產(chǎn)品進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估，并在確證性檢測發(fā)現(xiàn)NDSRI水平高于該指南推薦的AI限度時(shí)通知FDA。如果檢測到的NDSRI水平超過推薦的AI限度，申請人應(yīng)酌情修訂申請。FDA將與申請人共同努力在審評周期內(nèi)解決問題。

一般而言，對于任何藥物批次，若檢出NDSRI水平高于推薦的AI限度，藥品生產(chǎn)企業(yè)不應(yīng)該放行分銷，并可能需要從市場上撤回藥品。生產(chǎn)企業(yè)如果啟動召回應(yīng)聯(lián)系FDA，F(xiàn)DA可根據(jù)情況行使自由裁量權(quán)，防止或緩解藥品短缺。

維持上市藥品供應(yīng)的其他考慮如果在售藥品批次中檢出的NDSRI水平超過FDA推薦的AI限值，或生產(chǎn)企業(yè)的變更或召回有可能導(dǎo)致藥品供應(yīng)短缺，生產(chǎn)企業(yè)和申請人應(yīng)通過郵件立即聯(lián)系CDER藥物短缺工作人員。若FDA被告知藥品供應(yīng)可能中斷，F(xiàn)DA需根據(jù)具體問題具體分析的原則評估每種情況。FDA可能會直接與申請人溝通，考慮是否在短期內(nèi)推薦臨時(shí)AI限度。如果FDA推薦了臨時(shí)AI限度，通常表示不反對在特定時(shí)期特定的情況下根據(jù)具體問題具體分析的原則放行含有NDSRI水平不高于臨時(shí)AI限度的藥品（即使該放行有可能不遵循cGMP要求）。

在特定情況下，如果多家藥品生產(chǎn)企業(yè)被批準(zhǔn)銷售NDSRI水平不高于推薦的臨時(shí)AI限值的藥品，F(xiàn)DA將會在官網(wǎng)上發(fā)布推薦的臨時(shí)AI限度[14]。生產(chǎn)企業(yè)作為責(zé)任主體，決定是否放行藥品批次，并確保其藥品的生產(chǎn)符合所有適用要求（包括cGMP），F(xiàn)DA希望申請人密切監(jiān)控并及時(shí)向FDA報(bào)告任何用藥不良反應(yīng)或其他可能影響產(chǎn)品質(zhì)量或安全的問題。

如果在藥品中發(fā)現(xiàn)NDSRI水平超過FDA推薦的AI限度，F(xiàn)DA建議申請人采取控制措施減少或避免NDSRI產(chǎn)生。申請人應(yīng)提交科學(xué)合理的論證依據(jù)，以證明其AI限度高于FDA推薦的AI限度的合理性。使用安全性數(shù)據(jù)可能有助于支持更高的AI限度，如獲得特定化合物的數(shù)據(jù)或?qū)μ娲衔镞M(jìn)行交叉參照評估。申請人應(yīng)注意，F(xiàn)DA可能要求提供本指導(dǎo)原則之外的其他安全性數(shù)據(jù)以支持替代AI限度。如果采用特定化合物的數(shù)據(jù)或交叉參照評估方法，建議采取以下措施：

（1）致突變性評估[14-15]：當(dāng)使用細(xì)菌致突變試驗(yàn)（Ames試驗(yàn)）檢測NDSRI時(shí)，F(xiàn)DA建議采用經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OECD）指導(dǎo)原則471[16]中提到的全部測試菌株，采用預(yù)孵育法，使用濃度為30%的大鼠和倉鼠S9，S9通常是采用CYP450誘導(dǎo)劑（如苯巴比妥和β-萘黃酮組合）處理的動物而制備的。此外，應(yīng)采用推薦的30 min預(yù)孵育時(shí)間作為檢測致突變性信號的最佳條件。

（2）基于替代品的交叉參照評估：NDSRI可能根據(jù)替代化合物推測一個(gè)合理的AI限度，該AI限度是基于該替代化合物出現(xiàn)十萬分之一的癌癥風(fēng)險(xiǎn)確定，且可能高于根據(jù)NDSRI預(yù)測的致癌性分類而確定的AI限度。當(dāng)基于替代化合物進(jìn)行交叉參照評估時(shí)，申請人可根據(jù)ICH M7（R2）中所述的建議進(jìn)行（Q）SAR分析，以預(yù)測潛在致突變性。FDA建議選擇具有可靠致癌性數(shù)據(jù)的替代化合物，但FDA認(rèn)為通常難以獲得一種能充分代表NDSRI結(jié)構(gòu)和機(jī)制特征且經(jīng)過可靠測試的亞硝胺替代化合物。因此，由于下述化合物具有較可靠的致突變和致癌性數(shù)據(jù)，在經(jīng)過合理論證的情況下應(yīng)考慮將其用作替代化合物：N-亞硝基二甲胺（NDMA），N-亞硝基哌啶（NPIP），4-(甲基亞硝胺)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮（NNK），N-亞硝基吡咯烷（NPYR）和N-亞硝基嗎啉（NMOR）。

FDA說明，本節(jié)所述的證明擬定的替代AI限度合理的方法，應(yīng)在實(shí)施前采用補(bǔ)充或修正案形式提交給FDA。

5.結(jié)語

FDA的“亞硝胺類藥物相關(guān)雜質(zhì)推薦可接受攝入量限度行業(yè)指導(dǎo)原則”，重點(diǎn)討論了如何利用亞硝胺類雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)預(yù)測其致癌潛力，并根據(jù)致癌潛力類型確定該雜質(zhì)可接受攝入量限度的方法，該方法是對ICH M7（R2）中提供的方法的補(bǔ)充。當(dāng)前國內(nèi)尚未發(fā)布亞硝胺類藥物相關(guān)雜質(zhì)推薦可接受攝入量限度相關(guān)的指導(dǎo)原則，對于致突變雜質(zhì)的限度要求目前國內(nèi)主要參考ICH M7（R2），我國藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)正在參與ICH M7亞硝胺雜質(zhì)亞組對于亞硝胺雜質(zhì)的國際協(xié)調(diào)工作。由于近年來國際上對N-硝基化合物的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系的科學(xué)研究已取得一定進(jìn)展，且亞硝胺類雜質(zhì)常在多種藥物制劑或API中發(fā)現(xiàn)，提供FDA對該議題及時(shí)的相關(guān)技術(shù)要求，期望能為國內(nèi)含亞硝胺類雜質(zhì)的藥物監(jiān)管和藥物開發(fā)評價(jià)提供一定的借鑒和思考，降低藥品的潛在致癌性風(fēng)險(xiǎn)，保障患者或受試者的健康安全。

本文僅介紹了FDA發(fā)布的《亞硝胺類藥物相關(guān)雜質(zhì)推薦可接受攝入量限度行業(yè)指導(dǎo)原則》，不代表當(dāng)前國家藥品監(jiān)督管理局對亞硝胺類藥物相關(guān)雜質(zhì)的監(jiān)管要求。

參考文獻(xiàn)