本文旨在對(duì)某些與主成分結(jié)構(gòu)相似的化合物（如手性異構(gòu)體）根據(jù)線性斜率比值計(jì)算的校正因子偏離1的原因進(jìn)行分析。

在做雜質(zhì)檢測(cè)分析方法（如有關(guān)物質(zhì)）的方法驗(yàn)證時(shí)，某些結(jié)構(gòu)式與主成分接近的已知雜質(zhì)，根據(jù)線性斜率的比值計(jì)算卻發(fā)現(xiàn)斜率偏離1較大，理論上可以不加校正因子計(jì)算檢測(cè)結(jié)果的組分竟然需要加上校正因子。這并不是什么太大的問題，但是有時(shí)候手性異構(gòu)體的校正因子不是1，那就是問題了。因?yàn)檫@不符合常理，如果方法驗(yàn)證時(shí)出現(xiàn)異構(gòu)體的校正因子不是1，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)上異構(gòu)體的檢測(cè)結(jié)果需要加校正因子計(jì)算的話，極可能引起審評(píng)老師的質(zhì)疑。

一般情況下，異構(gòu)體的校正因子不是1，都是某些方面出了問題，下文將可能導(dǎo)致異構(gòu)體校正因子不是1的原因進(jìn)行分析。

1、待測(cè)物為成鹽化合物

以API為例，如果待測(cè)物為成鹽化合物（如枸櫞酸托瑞米芬），那么可以知道在做方法驗(yàn)證時(shí)，主成分對(duì)照品應(yīng)該為成鹽的形態(tài)。如果異構(gòu)體對(duì)照品為自制對(duì)照品，合成的同事很可能提供的是沒有成鹽的形態(tài)。很多同仁不會(huì)注意到這個(gè)細(xì)節(jié)，需要注意的是，如果該雜質(zhì)具有與主成分類似的結(jié)構(gòu)，也可以成鹽，那么即使獲得的對(duì)照品是未成鹽的形態(tài)，在進(jìn)行計(jì)算時(shí)應(yīng)當(dāng)折成與主成分相同的形態(tài)，即如果主成分是以成鹽形態(tài)的濃度，該雜質(zhì)也應(yīng)當(dāng)是成鹽形態(tài)的濃度。

以枸櫞酸托瑞米芬為例，藥典收載了其E-異構(gòu)體的檢測(cè)方法。在做該方法驗(yàn)證時(shí)，如果E-異構(gòu)體的對(duì)照品為未成鹽形態(tài)，則如果根據(jù)線性斜率比值計(jì)算的校正因子應(yīng)該是0.68。如果以成鹽形態(tài)計(jì)算，則校正因子應(yīng)是0.68÷（1-192.14/598.10）≈1。這種情況下，該雜質(zhì)在原料藥與制劑中的校正因子一致。

當(dāng)然，如果該雜質(zhì)不具有與主成分相同的成鹽基團(tuán)，即使其他基團(tuán)與主成分一致，也應(yīng)以不成鹽形態(tài)計(jì)算校正因子。這種情況下，如果制劑的規(guī)格以未成鹽形態(tài)計(jì)算，則該雜質(zhì)在原料藥與制劑中的校正因子不一致；如果制劑的規(guī)格以成鹽形態(tài)計(jì)算，則該雜質(zhì)在原料藥與制劑中的校正因子一致。

以上內(nèi)容比較難以理解，且為個(gè)人之見，請(qǐng)讀者仔細(xì)斟酌。

2、雜質(zhì)對(duì)照品純度不足

如果雜質(zhì)對(duì)照品純度不夠，可以想象即使校正因子的真實(shí)值為1，計(jì)算出的結(jié)果也會(huì)偏離1。雜質(zhì)對(duì)照品大多難以獲得，自行制備的量一般數(shù)量較少，難以按照質(zhì)量平衡法進(jìn)行標(biāo)定，一般標(biāo)定時(shí)大多為通過液相檢測(cè)主成分純度的方式。這就留下了實(shí)際純度與檢測(cè)純度不一致的隱患，如水分、溶劑、無機(jī)鹽等液相無法檢出的雜質(zhì)含量較高，即有可能導(dǎo)致實(shí)際純度遠(yuǎn)低于檢測(cè)純度。于是計(jì)算的雜質(zhì)的校正因子偏離真實(shí)值。

分析人員在獲得自制對(duì)照品時(shí)，應(yīng)當(dāng)評(píng)估對(duì)照品純度可能存在的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)雜質(zhì)對(duì)照品的合成工藝進(jìn)行評(píng)估，對(duì)可能導(dǎo)致純度不足的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)姆治觥＠缱詈笠徊綖辂}析，需評(píng)估雜質(zhì)對(duì)照品中無機(jī)鹽含量過高的風(fēng)險(xiǎn)；其他如水分、溶劑含量過高的風(fēng)險(xiǎn)也需要進(jìn)行類似的分析。

3、主成分與雜質(zhì)各級(jí)別的線性色譜峰不在同一個(gè)色譜圖中

一般情況下，建議線性驗(yàn)證時(shí)，如果需要計(jì)算校正因子，應(yīng)當(dāng)配制各級(jí)別濃度的主成分與各雜質(zhì)的混合溶液，使得不同級(jí)別的主成分與雜質(zhì)峰在同一個(gè)色譜圖中。這樣排除了儀器響應(yīng)值存在偏差的風(fēng)險(xiǎn)，如果主成分與雜質(zhì)分別進(jìn)行線性驗(yàn)證，則增加了因?yàn)閮x器響應(yīng)偏差導(dǎo)致校正因子偏離真實(shí)值的風(fēng)險(xiǎn)。

4、主成分線性溶液濃度與雜質(zhì)相差過大

一般情況下，如果需要計(jì)算校正因子，主成分與雜質(zhì)各級(jí)別線性溶液的濃度應(yīng)當(dāng)接近。雖然根據(jù)朗伯比爾定理，響應(yīng)值與濃度成線性關(guān)系，即斜率是固定的；但是我們都知道這是理想的狀態(tài)，現(xiàn)實(shí)中各種復(fù)雜的環(huán)境會(huì)使得響應(yīng)值偏離朗伯比爾定理。因此為了減少校正因子偏離真實(shí)值的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)當(dāng)使得主成分與雜質(zhì)各級(jí)別線性溶液的濃度接近。

如果主成分的線性驗(yàn)證范圍遠(yuǎn)大于其他雜質(zhì)，建議在與雜質(zhì)相同的線性驗(yàn)證范圍內(nèi)與雜質(zhì)濃度一致，并取該范圍內(nèi)的數(shù)據(jù)進(jìn)行校正因子的計(jì)算。

5、其他

限于經(jīng)驗(yàn)及知識(shí)的限制，筆者只能想到以上的四個(gè)原因可能導(dǎo)致校正因子偏離真實(shí)值，如睿智的讀者有其他觀點(diǎn)，歡迎指點(diǎn)迷津。