根據(jù)國家癌癥中心發(fā)布的《2022年全國癌癥報告》數(shù)據(jù)顯示，2020年我國新發(fā)卵巢癌人數(shù)為6萬人，死亡4萬人。卵巢癌確診晚、復發(fā)率高、五年生存率低，死亡率居女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之首[1]。
《“健康中國2030”規(guī)劃綱要》提出，“到2030年，總體癌癥生存率提高15%”的要求。卵巢癌五年生存率為40.5%，因缺乏有效檢測手段，近十年來卵巢癌五年生存率僅提升0.4%，顯著低于宮頸癌提升的14.4個百分點[2,3]。
卵巢癌的早期診斷具有重大意義，得到早期確診的患者，5年生存率接近90%。然而卵巢癌的早期診斷一直是困擾臨床醫(yī)生多年的問題，自CA125于上世紀80年代被發(fā)現(xiàn)并廣泛應用于臨床診斷以來，過去40多年未有更好的診斷產(chǎn)品突破CA125的檢測性能。雖然已經(jīng)廣泛為臨床所使用，但目前傳統(tǒng)的經(jīng)陰道超聲和腫瘤血清標志物CA125、HE4等檢測方法，對于早期卵巢癌診斷的敏感性低，存在局限性[4]。尤其是血清CA125，在早期卵巢癌中敏感性僅為43.5-65.7%[5]，在其他婦科良性疾病和非惡性腫瘤中也有不同程度升高，容易造成假陽性，無法滿足臨床對于卵巢癌早期精準診斷的需求。因此，在卵巢癌疾病領域，一直以來，三個70%始終困擾著臨床醫(yī)生和患者：約70%的患者確診時已是晚期；盡管手術聯(lián)合含鉑化療一線治療緩解率可達80%以上，但70%的卵巢癌患者會在初次治療后兩三年內(nèi)復發(fā)；70%的患者生存時間都不超過五年[6]。
上海思路迪生物醫(yī)學科技有限公司（簡稱“思路迪診斷”）研發(fā)的人外泌體CA125、HE4、C5a檢測試劑盒（商品名：泌思優(yōu)TM），基于外泌體技術在臨床應用上的突破，并以優(yōu)異的檢測性能成為全球首款完成多中心臨床試驗且審評批準的基于外泌體技術的卵巢癌體外診斷產(chǎn)品[7]。泌思優(yōu)TM的橫空出世有望成為卵巢癌早期診斷的“利器”，通過幫助臨床實現(xiàn)卵巢癌的診斷前移，最終提升卵巢癌的5年生存率，為卵巢癌患者帶來福音。
關于外泌體
外泌體是一種直徑在30-150 nm的胞外囊泡，在外泌體的形成過程中，細胞中多種蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸分子等內(nèi)容物被選擇性地包裹進入外泌體，并通過主動過程釋放到血液、尿液等多種體液中，介導細胞間通訊，因此在人體生理和病理發(fā)展過程中，發(fā)揮重要作用。
2013年，諾貝爾生理或醫(yī)學獎授予從事細胞囊泡運輸調(diào)控機制研究的3位科學家，James E. Rothman、Randy W. Schekman和Thomas C. Südhof，由此將外泌體的相關研究推向了新的高潮。
目前，全球每年發(fā)表外泌體相關研究近5000篇，主要集中在外泌體在生理和病理過程中的調(diào)控作用機制研究、外泌體在疾病診斷標志物中的研究，以及使用體外細胞分泌的外泌體用于疾病治療和藥物遞送工具的探索研究。由于外泌體在疾病診斷和治療中的巨大潛在價值，已經(jīng)吸引了大量的生物技術創(chuàng)業(yè)者和資本進入該領域，在疾病診斷、疾病治療和藥物遞送三個主要應用領域，都已經(jīng)有生物技術公司主導的臨床試驗在進行中。
雖然外泌體自首次于上世紀90年代發(fā)現(xiàn)在腫瘤發(fā)展轉移中有重要作用，至今已近30年，但同其它諸如mRNA疫苗、CART-細胞治療和ADC抗體耦聯(lián)藥物等顛覆性生物技術在獲批前的“無人區(qū)”探索階段時遇到的挑戰(zhàn)一樣，外泌體技術在轉化于臨床應用時，其中許多難點還尚待攻克。例如用于疾病診斷標志物開發(fā)時，在創(chuàng)新標志物發(fā)現(xiàn)和外泌體分離純化穩(wěn)定性達到體外診斷注冊法規(guī)要求方面尚存在挑戰(zhàn)；用于疾病治療時，其生產(chǎn)得率、純度、均一性和生產(chǎn)批次穩(wěn)定性的難題尚需攻關；用于藥物遞送時，藥物的包裹、體內(nèi)遞送效率和體內(nèi)代謝穩(wěn)定性方面還在技術攻關初期。
基于上述一系列技術難點，雖然有不少外泌體相關的疾病診斷、治療和藥物遞送臨床試驗在進行中，但完成臨床試驗并且達到預期效果的少之又少。
思路迪診斷領跑全球外泌體研發(fā)賽道，率先突破外泌體技術臨床應用瓶頸
泌思優(yōu)TM技術的核心優(yōu)勢在于利用外泌體——細胞釋放的小囊泡——所包含的豐富信息，在疾病早期診斷中顯示出巨大價值[8]。具體而言，利用外泌體蛋白作為生物標志物具有明顯優(yōu)勢：在血漿/血清中能被鑒定為潛在標志物的目標蛋白占比只有1%，在外泌體中的比例卻高達75% [9,10]，這使得在新型標志物在發(fā)現(xiàn)和使用過程中，可以大幅減少由高豐度蛋白造成的干擾；同時，由于外泌體內(nèi)含物受到磷脂雙分子膜的保護，具有很高的穩(wěn)定性，進一步降低了標志物的降解，還能通過外泌體得到富集，從而保證了外泌體標志物作為診斷產(chǎn)品的高靈敏度和高特異性。
另外，思路迪診斷自主研發(fā)的負壓納米超濾結合逆向疏水聚集沉降技術分離提取外泌體，相比傳統(tǒng)的外泌體分離制備技術具備高穩(wěn)定性和易操作等優(yōu)勢，克服了外泌體技術臨床應用的瓶頸，使外泌體技術能真正服務臨床，服務患者。
創(chuàng)新性的多標志物組合，突破傳統(tǒng)單一標志物的性能局限
除使用外泌體蛋白作為標志物診斷疾病外，泌思優(yōu)TM的另一大創(chuàng)新是基于外泌體蛋白的多靶標生物標志物組分析。前期研究通過基于臨床隊列的外泌體質(zhì)譜組學研究和數(shù)據(jù)挖掘分析，不僅發(fā)現(xiàn)外泌體來源的CA125和HE4能顯著提升卵巢癌良惡性鑒別準確性，還創(chuàng)新性的發(fā)現(xiàn)了新型生物標志物C5a（補體系統(tǒng)核心蛋白C5a），而前期研究顯示C5a的表達異常與卵巢癌的發(fā)生發(fā)展密切相關[11]。在后續(xù)標志物開發(fā)過程中，由于外泌體來源的標志物含量普遍低于血液來源標志物，因此泌思優(yōu)TM首次將高效的外泌體提取方法與高敏的化學發(fā)光免疫分析法相結合，從外周血分離外泌體，再檢測外泌體中CA125、HE4以及C5a的濃度，通過隊列訓練計算出OCS分值，并經(jīng)過多中心獨立臨床隊列驗證，最終實現(xiàn)了比傳統(tǒng)的單一標志物來源更優(yōu)的臨床診斷性能。這種以生物標志物組作為標志物，而非傳統(tǒng)單一蛋白來源作為標志物指標，也是未來標志物開發(fā)的趨勢。
多中心臨床大樣本隊列，歷史性的突破檢測性能瓶頸，革命性的改變卵巢癌診療現(xiàn)狀
經(jīng)過多年外泌體技術攻關和標志物研究，克服了外泌體高效穩(wěn)定分離制備、多標志物組合發(fā)現(xiàn)、篩選和訓練，以及臨床樣本外泌體多指標組合檢測穩(wěn)定性等一系列技術難題后，2019年，由重慶大學附屬腫瘤醫(yī)院周琦教授牽頭，聯(lián)合中山大學附屬孫逸仙紀念醫(yī)院林仲秋教授、中國科學院大學附腫瘤醫(yī)院朱筧青教授和鄭州大學第一附屬醫(yī)院韓麗萍教授啟動多中心臨床注冊研究，該研究前瞻性納入大約1500例附件包塊女性患者，以病理診斷為金標準分析了泌思優(yōu)TM診斷卵巢癌的性能。結果顯示：泌思優(yōu)TM檢測卵巢癌的總體敏感性為95.5%，在上皮性卵巢癌和附件良性包塊的鑒別診斷中特異性達到90.2%，尤其是對于Ⅰ期卵巢癌的患者，檢測敏感性為89.7%，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)的血清CA125（27.8-64.3%）[5]。
同時在CA125陰性的卵巢癌患者中，展現(xiàn)出72.7%的靈敏度和98.4%的特異性，減少了卵巢癌的漏診和誤診風險。對于上皮性卵巢癌中占比最多、惡性程度最高的高級別漿液性卵巢癌，泌思優(yōu)TM的診斷敏感性達到98.3%。而且，和ROMA指數(shù)（一種基于血清來源CA125和HE4的計算組合）敏感性受絕經(jīng)前后影響較大不一樣的是，泌思優(yōu)TM無論在絕經(jīng)前還是絕經(jīng)后女性中，都展現(xiàn)出優(yōu)異的敏感性，分別為94.3%和96.2%，這大大提高了絕經(jīng)前女性患卵巢癌的診斷率。
此外，在小于45歲的女性中，泌思優(yōu)TM診斷卵巢癌的敏感性亦達到92.7%，提示泌思優(yōu)TM在易于發(fā)生早期卵巢癌的年齡段女性中的優(yōu)異性能。這些數(shù)據(jù)表明：泌思優(yōu)TM可以作為一個很好的卵巢癌診斷的血液學標志物，有利于卵巢癌的早期診斷，同時研究數(shù)據(jù)亦提示，其在附件腫物良惡性鑒別和無癥狀的高危人群風險卵巢癌篩查也顯示出較大的應用潛力。
外泌體技術全球首款卵巢癌，體外診斷產(chǎn)品獲批帶來的潛在產(chǎn)業(yè)效應
基于外泌體的自身生物學特征、與疾病發(fā)生發(fā)展過程的密切聯(lián)系，使得其成為當下國際科學研究和產(chǎn)業(yè)研發(fā)最前沿的技術路徑之一。
目前，外泌體已被證實可以應用于腫瘤、免疫系統(tǒng)和感染性疾病的診斷研究，未來可以針對不同疾病的特異性標志物批量開發(fā)診斷試劑盒。同時，外泌體因廣泛存在于各種體液中，可突破血腦屏障，還可以用于早老癡呆等其他神經(jīng)系統(tǒng)疑難疾病的早期診斷。在不同復雜性疾病的診斷、療效評估和復發(fā)預測上具有廣闊的發(fā)展前景。泌思優(yōu)TM的獲批，也從另一個側面反映國家藥品監(jiān)督管理部門對創(chuàng)新技術的擁抱和支持。可以想見不久的未來，隨著外泌體技術不斷成熟，會有更多依托于該技術開發(fā)的創(chuàng)新醫(yī)療產(chǎn)品申報和進入臨床，外泌體技術應用有望從外泌體診斷拓展到細胞分泌的外泌體治療和基于外泌體的藥物遞送等創(chuàng)新性技術和產(chǎn)品。
結語
歷時八年研發(fā)，思路迪診斷攻克了外泌體技術領域一系列世界級技術難題，打通了“bench to bedside”的產(chǎn)品轉化路徑，成功推出了全球首款外泌體卵巢癌體外診斷產(chǎn)品。泌思優(yōu)TM的上市也將推動外泌體技術在各大疾病領域的快速轉化，形成一系列創(chuàng)新診斷和其他醫(yī)療應用產(chǎn)品，解決諸多復雜疑難疾病的診斷和治療難題。同時思路迪診斷在醫(yī)療創(chuàng)新“無人區(qū)”探索的成功，也將進一步強化中國醫(yī)藥創(chuàng)新生態(tài)體系的力量，助力產(chǎn)生更多創(chuàng)新碩果。
*產(chǎn)品預期用途和性能指標詳見產(chǎn)品說明書
參考：
[1] 國家衛(wèi)健委《卵巢癌診療指南）(2022年版）
[2] 2021年國家癌癥中心統(tǒng)計數(shù)據(jù)
[3] 國家衛(wèi)生健康委員會2018年6月8日例行新聞發(fā)布會文字實錄，中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會，
2018年6月8日，http://www.nhc.gov.cn/wjw/xwdt/201806/d5a307f70cb84538847e18af2de1f715.shtml
[4] 鄒玉鵬，李力.腫瘤防治研究,2017;44（9）:631-635
[5] Biochim Biophys Acta Rev Cancer. 2021 Apr;1875(2):188503.
[6] 三個70%困擾著臨床醫(yī)生和卵巢癌患者，光明網(wǎng)，2022年5月13日，
https://m.gmw.cn/baijia/2022-05/13/35726645.html
[7] 上海一全球首款卵巢癌體外診斷產(chǎn)品獲批上市，人民日報客戶端上海頻道，2024年1月23日，
https://wap.peopleapp.com/article/7323614/7160111
[8]《外泌體研究、轉化和臨床應用專家共識》，轉化醫(yī)學雜志2018年12月第7卷第6期
[9] Bleijerveld, O.B., Zhang, Y.N., et al, PROTEOMICS-Clinical Applications,7(7-8), 2013; pp.490-503.
[10] Boukouris, Stephanie and S. Mathivanan. Clinical applications. 2015; 9 34 :358-67.
[11] Merle NS, Noe R, Halbwachs-Mecarelli L, Front Immunol. 2015;6:257
