摘 要：注射用凍干制劑作為注射劑中的常用劑型之一，在藥品注冊申報中占較高比例。基于劑型特點、風險防范，梳理總結了注射用凍干制劑新藥申報中常見的藥學問題，包括未進行合理的滅菌或無菌工藝篩選與研究，未結合品種特點開展處方工藝開發，有關物質分析方法的檢出能力研究不充分，配伍穩定性、輸液管路相容性研究不全面等。結合相關行業指南及指導原則，從處方工藝開發、質量研究、穩定性研究等方面，闡述了注射用凍干制劑藥學審評的基本考慮，以期為該類制劑的研發申報和技術評價提供參考。
注射劑是一種重要的臨床常用藥物劑型，主要分為注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液等。其中以冷凍干燥法制備的注射用無菌粉末稱為注射用凍干制劑［1］。該類制劑是將無菌藥品溶液迅速降溫至共晶點以下，再在真空條件下加熱，通過升華的方式除去水分，制備成凍結狀態良好的無菌粉針注射劑。
基于冷凍干燥的制備工藝特點，注射用凍干制劑具有適用于熱敏性藥物、含水量低、提高藥物穩定性、復溶性良好、便于貯藏和運輸等優點。該劑型作為注射劑重要組成之一，在臨床中廣泛應用，在藥品注冊申報中占據較高比例。據統計，2017—2022年，按受理號計，國家藥品監督管理局受理的申 報 上 市 或 臨 床 的 化 藥 注射劑 3112 個，其中注射用粉針劑申請數量為 910 個，占注射劑申請數量的 29%。注 射 用 粉 針 申 請 中 ，新 藥 臨 床 試 驗 申請（IND）258個、新藥上市申請（NDA）64個、仿制藥上市申請（ANDA）557個、驗證性臨床31個（數據來源于藥智數據https：//db.yaozh.com/）。
目前國內外尚無專門針對注射用凍干粉針新藥藥學研究的指導原則。本文基于國際人用藥品注冊技術協調會（ICH）Q系列指導原則以及國內外已發布的注射劑相關指導原則，結合注射凍干制劑特點，圍繞化學藥品注射用凍干制劑在新藥注冊申報中的藥學常見問題，從處方工藝、質量研究、穩定性研究等方面，總結并闡述了藥學研究方面的審評關注點及基本考慮，以期規范該劑型的研發。
1、處方工藝
1.1 無菌工藝選擇的合理性
注射劑為無菌制劑，其無菌保證水平直接關系患者的生命安全，是注射劑最關鍵的質量屬性之一。與仿制藥相比，新藥開發缺乏可參考的原研信息，且在新藥注射劑的研發過程中，原料藥理化特性、有關物質、處方工藝等研究是不斷完善和深入的。因此，新藥注射用凍干制劑在研究立項、劑型選擇、處方工藝開發階段，應首先進行滅菌工藝選擇，確認無菌工藝選擇的合理性。目前的申報資料中，該部分常見的問題是未提供滅菌工藝的選擇依據及篩選研究數據，或提供的研究不夠充分。
滅菌工藝篩選需參照指導原則滅菌工藝選擇決策樹進行研究，注射劑應首選終端滅菌工藝［無菌保證水平（SAL）≤1×10−6］［2］。在評估能否進行終端滅菌時，研究者應進行全面研究，包括篩選最佳 pH 值、篩選輔料、包裝容器、優化滅菌程序和生產條件等，并在處方工藝開發部分介紹相關研究情況［3］。
雜質、無菌是影響注射劑安全性的重要評價指標，因此在滅菌工藝篩選研究中，科學評估降解雜質可以接受水平和滅菌或無菌工藝的選擇，是需要綜合評估的研究工作，需要綜合考量無菌保證水平和雜質可接受水平，對于能采用終端滅菌工藝的品種應選擇終端滅菌工藝。單純基于降解雜質超出ICH Q3B 界定限［4］而排除終端滅菌，在某些情形下是依據不充分的。比如，還需考慮超出界定限的降解雜質是否為體內代謝產物，或者是否已有安全性試驗數據來論證支持雜質的安全性等。
在滅菌或無菌工藝篩選研究中，采用的有關物質檢查方法需注意能夠有效分離和檢出潛在的降解產物，尤其是終端滅菌條件下的降解雜質。如果研究采用的有關物質方法學驗證中未涵蓋熱降解條件樣品考察，或熱降解（如 60 ℃、30 min）條件無法代表終端滅菌條件下產生的降解產物，采用該有關物質方法進行滅菌工藝篩選研究是不妥的。這也是申報資料中常被研究者忽略的問題。應盡可能避免產生因方法缺乏指示性，而對研究結果產生誤判的情形。滅菌或無菌工藝的研究與有關物質分析方法研究應緊密結合，綜合評價。
新藥注射用凍干制劑應在關鍵臨床試驗前確認采用無菌工藝的合理性，需要時申請人可及時與藥學審評團隊進行溝通交流。
1.2 處方工藝研究
新藥注射用凍干制劑的處方工藝研究是否充分，是保證藥品質量的基本前提，是決定產品質量特性是否滿足擬定的臨床用藥開發目標的重要因素。原輔料特性、藥液穩定性、無菌保證水平、凍干工藝穩健性、相容性［5］、密封性［6］等是注射用凍干制劑處方工藝研究的重要方面。目前申報資料中常見的問題是處方開發信息不全面；未關注輔料特性對制劑質量的潛在影響；工藝研究考察指標存在缺失；配液、過濾、凍干等工藝參數過于寬泛；工藝保持時限未進行充分驗證；未建立有效的源頭控制和過程控制等。處方工藝研究也是申報生產階段最常被發回補充的部分。
建議參考ICH Q8指導原則［7］相關要求，全面開展注射用凍干制劑的處方工藝研究。基于產品開發的目標質量屬性，明確凍干制劑的關鍵質量屬性，并圍繞制劑關鍵質量屬性，考察原輔料關鍵物料屬性，篩選處方設計，研究關鍵工藝和工藝參數。只有對風險進行了充分的識別和把控，才能更有利于合理建立有效的源頭控制和過程控制。
結合新藥申報資料中所發現的問題，建議申請人關注以下6個方面的問題：
1.2.1處方設計
合理的處方設計是形成良好的凍干制劑的重要基礎。共晶點或共熔點是凍干制劑首先需測定的重要溫度參數，根據共熔點溫度確定是否需加入添加劑，如為提高凍干效率通常選擇共熔點較高的凍干保護劑。需根據品種特性必要時選擇適宜的緩沖劑、抗氧化劑、螯合劑、pH調節劑等，另外還需關注藥液中固體物質濃度、每瓶容器內藥液裝量對凍干工藝的影響。
1.2.2輔料特性
需關注輔料特性對制劑質量的潛在影響。比如，某些輔料中可能存在過氧化物，對于易氧化原料藥，則需要結合原輔料相容性必要時增加過氧化物的內控。
1.2.3生產工藝
需結合品種特點，開展全面、詳細的生產工藝研究。包括但不限于以下方面：如原輔料加入順序、配液溫度、pH 值、是否需充氮、光線控制等，應基于研究建立合理的控制。需結合除菌過濾驗證、培養基模擬灌裝驗證和工藝驗證情況，明確除菌過濾參數（如濾芯型號、過濾溫度、壓差或體積流量、過濾時間和完整性檢查等）、灌裝參數（如灌裝速度、灌裝時間等）、凍干參數等。結合包材除熱原驗證、包裝密封性驗證情況，明確工藝中包材清洗滅菌、密封性檢查等工藝參數。同時，穩健的凍干工藝是影響凍干制劑產品質量和穩定性的內在要素之一。建議充分考慮處方組成、裝量、容器及凍干機的性能，結合共晶點、共熔點等研究，對凍干曲線3個階段（預凍、第一階段干燥、第二階段干燥）的關鍵參數進行研究，例如各階段溫度、升或降溫的速率、保溫時間、真空度等參數信息，并結合工藝驗證明確具體的凍干工藝參數。
1.2.4工藝保持時限
工藝保持時限應有充分的研究驗證數據支持。無菌藥品的生產應盡可能縮短藥液從開始配制到滅菌（或除菌過濾）的間隔時間，應通過研究確定藥液配制后至過濾前的放置時間、過濾至灌裝前的放置時間、過濾時間、藥液過濾開始至灌裝結束時間等工藝時限。藥液從配制開始的藥液可放置時限需通過考察藥液穩定性研究確定，考察項目包括但不限于性狀、溶液顏色與澄清度、pH 值、有關物質、含量、可見異物、不溶性微粒、微生物限度等。藥液過濾時間、壓力、流量等參數應有細菌截留驗證［8］支持。除菌過濾開始至灌裝結束、灌裝開始至進箱結束時限、物料（如分裝容器、無菌器具）滅菌后的最長放置時間等應有培養基模擬灌裝驗證［9］的支持。比如，對于對空氣中氧或二氧化碳敏感的品種，還需結合產品特性，必要時需關注生產過程中各工序樣品與空氣接觸時間的控制，尤其是半加塞凍干前等與空氣接觸風險高的環節。
1.2.5過量灌裝
如涉及過量灌裝應進行合理論證和說明。注射用凍干制劑在臨床使用時需轉移至注射器或與基礎輸液配伍后使用，藥液轉移過程中可抽取體積如不能滿足要求，則可能引起臨床給藥劑量不足。建議參考ICH Q8相關要求，結合實際抽提損失量，合理論證本品灌裝量和裝量控制范圍。
1.2.6無菌保證
注射用凍干制劑作為無菌藥品，由于無菌藥品的特殊性及無菌檢查的局限性，其無菌保證水平需要通過合理設計和全面驗證的滅菌或無菌工藝過程、良好的無菌工藝保證體系以及在生 產 過 程 中 嚴 格 執 行 藥 品 生 產 質 量 管 理 規范（GMP）予以保證。研究者應參照《化學藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導原則（試行）》等相關技術要求，開展規范、全面的除菌過濾驗證和無菌工藝模擬驗證。
1.3 生產批量
注射用凍干制劑擬定的商業化生產批量應具有相應無菌生產工藝驗證和工藝驗證的支持。新藥注射用凍干制劑生產批量通常建議符合《化學仿制藥注冊批生產規模的一般性要求（試行）》，即注射劑的注冊批 3 批中的 2 個批次應至少達到（1）擬定商業化生產規模的 10%；或（2）如果每瓶或每支的灌裝量大于 2.0 mL，則為每批 50 L，如果灌裝量不超過 2.0 mL，則為每批 30 L；上述（1）或（2）應選擇批量更大的（包裝后）。申請人申報多種灌裝規格（如1、2、3 mL）時，建議批量應至少達到50 L。第3 個批次可以低于擬定商業化生產規模的 10%，但應至少達到注冊批最大批量的25%（包裝后）［10］。
需要關注的是，如存在 1 批藥液使用多臺凍干機進行凍干的情形，還應符合 2010 年版 GMP 相關要求，即凍干產品應以同一批配制的藥液使用同一臺凍干設備在同一生產周期內生產的均質產品為一批［11］。每臺凍干機每次生產的產品設為 1 個批次，以便于追溯管理。使用多臺凍干機時需明確每臺凍干機的編號，并且每臺凍干機應有模擬灌裝驗證和工藝驗證的支持。建議申請人在生產工藝信息表中明確總配液量及每臺凍干機生產 1 次的批量。
新藥注射用凍干制劑在不同臨床研究階段，普遍會存在批量放大的問題，需關注批量放大對產品關鍵質量屬性的影響。尤其對于特殊凍干注射劑，如脂質體、微球等，批量放大通常具有較高風險，建議在關鍵臨床試驗前確定生產批量，盡量與擬定商業化生產批量一致。另外，針對用于罕見病治療的注射用凍干制劑的注冊批生產規模，申請人可在關鍵臨床試驗前與藥審中心進行溝通。
2、質量研究
注射用凍干制劑應需涵蓋一般注射劑的質量標準控制項目，如有關物質、含量、無菌等。同時，凍干制劑還應為完整的塊狀物或海綿狀物，具有足夠的強度，不易碎成粉，外形飽滿不萎縮，色澤均一，干燥充分，保持藥物穩定，加入溶劑后能快速復溶。新藥注射用凍干制劑從臨床至上市注冊申報期間，伴隨著質量研究的不斷深入，分析方法發生變更的情形較為普遍。質量研究部分常見的問題有：未充分評估變更后分析方法的檢測能力，尤其是有關物質分析方法；溶液顏色檢查方法的靈敏度不滿足品種特性需要；較難復溶的產品未合理建立復溶時間檢查方法等。
對于新藥注射用凍干制劑而言，有關物質分析方法發生變更時，在評估變更前后方法檢出能力時，除了常規的分析方法學驗證外，還需額外關注待測樣品的合理選擇。建議采用含一定量雜質的樣品（如適度降解、加速或長期穩定性末期樣品）進行變更前后方法檢測能力的對比研究。必要時，還需結合對毒理批樣品采用變更后方法的檢測結果，重新評估雜質安全性依據是否充分。
新藥注射用凍干制劑質量標準建立關鍵依據毒理批樣品、關鍵臨床試驗批樣品和注冊樣品（含工藝驗證樣品）、注冊穩定性試驗樣品。例如，有關物質特定雜質限度設定，首先需有毒理學試驗樣品實測數據支持，同時結合關鍵臨床試驗批樣品、注冊穩定性試驗樣品和注冊樣品（含工藝驗證樣品）的分析數據，綜合確定。因此，新藥注射用凍干制劑研發過程中，需要特別注意毒理批樣品、關鍵臨床批樣品的良好保存。如果穩定性試驗中發現新的毒理學試驗樣品未涵蓋的超出界定限的降解產物，需參照相關技術指南說明其限度的安全性依據，必要時重新開展毒理學研究。在申報生產階段，還需關注關鍵臨床批、穩定性批、工藝驗證批樣品之間的質量一致性。
另外，結合申報資料的常見問題，建議申請人關注以下3個方面：（1）若穩定性考察提示溶液的顏色可能出現變化時，需將溶液的顏色修訂入質量標準，若注射劑溶液顏色與有色雜質相關，建議采用靈敏度可滿足檢測要求的顏色檢查方法，如吸光度法等。（2）較難復溶的產品需關注復溶時間檢查方法的合理性和可操作性，建議參照臨床實際配伍使用方法，明確振搖方式、振搖頻率或強度等。（3）對于不溶性微粒、可見異物存在較高風險的品種，建議將品種特性酌情制定質量標準，必要時可考慮參考說明書用法配制上述檢查項的供試品溶液，以便于使考察結果與臨床使用具有一定的相關性。同時，建議結合產品特性控制適宜的含水量。各檢查項限度的制定應具有合理性依據，需參考相關技術要求，并結合多批次樣品實測情況制定合理控制限度。
3、穩定性研究
注射用凍干制劑穩定性研究除了需參照 ICHQ1等指導原則［12］開展常規穩定性研究外，還需額外關注合理開展配伍穩定性、輸液管路相容性研究。配伍穩定性及輸液管相容性的研究結果，直接反映出進入患者體內前的藥液質量特性，與安全給藥密切相關，是非常重要的研究工作，應予以足夠的重視。目前該部分的研究還不完善，是申報生產階段較為常見的發回補充的原因。
對于需配伍使用的新藥凍干注射劑，應按擬定說明書用法開展配伍穩定性考察，必要時還需考慮擬定上市的說明書用法與關鍵臨床試驗配伍方法是否一致，從而科學地評價產品在與稀釋溶劑配伍后的穩定性，以支持擬上市藥品配伍安全性與關鍵臨床試驗藥品相當。考察條件通常包括配伍溶劑種類、濃度、放置條件（時間、溫度、光照）、輸液管路（種類、材質）等。需在配伍穩定性考察過程中結合配伍溶液的理化特點，擬定與配伍溶液質量相關的考察指標，關注不溶性微粒的變化情況，并提供實測數據。對擬配伍藥物的考察指標應明確分析方法，對方法的專屬性和靈敏度等進行適當的驗證。例如，與葡萄糖注射 液 配 伍 的 藥 液 ，需 考 察5-羥甲基糠醛。如配伍溶液偏酸、偏堿或含有機溶劑，應評估與考察藥品與給藥器具的相容性。對于微量藥物，應關注給藥器具對藥物的吸附性。對于穩定性差的產品，建議采用多批自制制劑（含近效期批次）開展配伍穩定性研究。
4、包材相容性研究
直接接觸藥品的藥用包材作為注射用凍干粉針制劑的重要組成之一，包材質量將直接影響藥品的質量。應基于藥品特性及包材相容性研究結果，合理選擇適宜的包裝材料。國家食品藥品監督管理局《關于加強藥用玻璃包裝注射劑藥品監督管理的通知（食藥監辦注〔2012〕132號）》規定：應根據藥品的特性選擇能保證藥品質量的包裝材料；偏酸、偏堿及對pH敏感注射劑，應選擇121 ℃顆粒法耐水性為1級及內表面耐水性為HC1級藥用玻璃或其他適宜的包裝材料。建議參考《化學藥品注射劑與藥用玻璃包裝容器相容性研究技術指導原則（試行）》［13］、《化學藥品與彈性體密封件相容性研究技術指導原則（試行）》［14］等相關技術指導原則，開展包裝材料和容器的相容性研究。
5、結語
隨著《化學藥品注射劑仿制藥質量和療效一致性評價技術要求》［15］、《化學藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導原則（試行）》等相關技術要求的發布實施，對我國注射劑的研發和生產提出了更高的要求。
新藥注射劑與仿制藥相比，其研究開發更具難度和挑戰性，而注射用凍干制劑作為無菌藥品，其無菌保障水平是制劑安全性的重要前提。此類化學藥品的處方工藝開發，應首先關注滅菌或無菌工藝的篩選與研究，一方面需要注意通過處方（如 pH值、輔料篩選）、工藝（如除氮、滅菌程序、生產條件）、包材等方面對滅菌工藝進行研究篩選；另一方面需要充分研究驗證有關物質等分析方法對潛在降解雜質的檢出能力（如熱降解條件是否合理、是否采用降解樣品對不同色譜條件進行篩選，必要時還需考慮不同原理的色譜條件等），兩者應相互結合 ，共同論證和評價滅菌或無菌工藝選擇的合理性。
在明確滅菌或無菌工藝合理性的基礎上，建議參考相關行業指南及指導原則，圍繞品種特性，全面開展處方工藝研究，包括進行合理的處方設計、研究輔料特性對制劑質量的潛在影響，工藝過程控制和工藝參數研究，穩健的凍干工藝的開發、生產批量的合理擬定，工藝保持時限的研究與驗證，滅菌或無菌工藝過程的全面驗證等。在質量研究方面，對于新藥而言，還需關注從臨床至上市注冊申報期間的分析方法變更及質量橋接，穩定性期間新出現的雜質的安全性依據是否充分，關注雜質是否含警示結構，是否有安全性水平的數據支持等。在穩定性研究方面，除了常規穩定性研究外，還需額外關注結合臨床使用合理開展配伍穩定性、輸液管路相容性研究等。同時，應結合藥液特性合理選擇包裝材料，并參照指導原則開展包材相容性研究。
本文未涵蓋注射用粉針劑的所有技術要求，研究者作為申報產品的責任主體，應結合產品特性，參照國內外相關技術指南開展全面的藥學研究，為患者提供更高質量的藥品。
