前言
近年來大家關(guān)注的主流滅菌方案有美國注射劑協(xié)會發(fā)布的《濕熱滅菌程序的驗證：滅菌程序的設(shè)計、開發(fā)、確認及日常監(jiān)控》、 歐盟推出的《制劑、原料藥、輔料和內(nèi)包材滅菌指南》、日本厚生省的《通過最終滅菌方法生產(chǎn)無菌藥物的準則》及中國的《化學(xué)藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導(dǎo)原則（試行）》。
針對如此繁多的滅菌指導(dǎo)原則，本文就和大家聊聊如何在符合申報條件下選擇更具有科學(xué)性和優(yōu)勢的滅菌方案？以及滅菌到底在滅些什么？終端滅菌注射劑最終走向何方？
一、 無菌藥品
1.1 無菌藥品的概念
《化學(xué)藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導(dǎo)原則（試行）》針對無菌藥品給出了準確的概述，即是指法定藥品標準中列有無菌檢查項目的制劑和原料藥，一般包括注射劑、無菌原料藥及滴眼劑等。
由于目前無菌檢驗手段的局限性，不存在絕對意義的無菌，現(xiàn)在大家所理解的無菌只是概率意義上的“無菌”，即采用科學(xué)合理的SAL（無菌保證水平）保證最終產(chǎn)品的PUSN（無菌保證值）達到≤10E-6。
1.2 兩個重要概念
先和大家聊聊比較容易混淆兩個概念，即SAL和PUSN：
SAL（英文全稱：Sterility Assurance Level）：無菌保證水平，通過科學(xué)合理的滅菌/除菌工藝、良好的無菌保證體系及嚴格執(zhí)行藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范( GMP )使藥品中活微生物存在的概率低至某個可接受的水平，SAL的主體是滅菌/除菌工藝。
PNSU（英文全稱：Probabilityofa Nonsterile Unit）：無菌保證值，是指通過科學(xué)合理的滅菌/除菌工藝，制劑產(chǎn)品的無菌保證值必須≤10-6，PNSU的主體是產(chǎn)品。
1.3 本文涉及的范圍
面對如此紛繁復(fù)雜的無菌技術(shù)，本文僅涉及采用終端滅菌工藝的最終滅菌產(chǎn)品，以點破面，來了解各國無菌策略的異同。
二、 主流國家的滅菌策略
2.1 美國注射劑協(xié)會
美國注射劑協(xié)會（PDA）發(fā)布的《濕熱滅菌程序的驗證：滅菌程序的設(shè)計、開發(fā)、確認及日常監(jiān)控》，PDA的理念是根據(jù)滅菌物品熱穩(wěn)定性科學(xué)合理的選擇相適應(yīng)的滅菌程序。
PDA的無菌指南分為過度殺滅和根據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)計滅菌這兩大滅菌策略，過度殺滅程序強調(diào)的是被滅菌產(chǎn)品獲得F0PHY( 物理殺滅時間) 和F0BIO (生物殺滅時間)至少為12 min ，根據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)計滅菌程序強調(diào)的是針對不同種類產(chǎn)品，科學(xué)合理的選擇不同的滅菌方式；雖然也有過度殺滅程序，但是不糾結(jié)F0和8min的關(guān)系。
2.2 歐盟
歐盟推出的《制劑、原料藥、輔料和內(nèi)包材滅菌指南》，以水溶性產(chǎn)品的滅菌決策樹終端滅菌工藝為例，歐盟的理念是盡可能地提高生產(chǎn)工藝的無菌保證水平，用以保證產(chǎn)品的無菌保證值。
歐盟的無菌指南強調(diào)的是滅菌條件首選121℃，15min，其次就是選擇F0≥8min，SAL≤10-6，提出了產(chǎn)品各組份可以根據(jù)產(chǎn)品特性分別科學(xué)合理的選擇不同的滅菌方式，盡可能地提高生產(chǎn)工藝的無菌保證水平。
2.3 日本
日本厚生省的《通過最終滅菌方法生產(chǎn)無菌藥物的準則》，日本的理念是更加注重對終端熱處理的應(yīng)用。
日本的無菌指南強調(diào)的是F0值<8min，即熱處理工藝的運用，利用生物指示劑和微生物負載結(jié)合法，科學(xué)合理的選擇更高的無菌保證水平，此無菌策略需要進行嚴格的滅菌驗證及日常微生物（物料及環(huán)境）負荷檢測，這個和沒有滅菌選擇決策樹是日本的無菌指南的兩大特點，所以大家現(xiàn)階段在仿制日本注射劑需要特別注意其滅菌方式，盡量避開不符合國內(nèi)無菌指南的產(chǎn)品。
2.4 中國
國內(nèi)的《化學(xué)藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導(dǎo)原則（試行）》，基本上借鑒并簡化了歐盟的《制劑、原料藥、輔料和內(nèi)包材滅菌指南》。
國內(nèi)的無菌指導(dǎo)原則強調(diào)的是過度殺滅法（F0≥12min）和殘存概率法（min 8≤F0），這兩種滅菌工藝不合適只能選擇無菌生產(chǎn)工藝，并沒參照PDA及日本指南，在F0＜8min的熱處理上使無菌保證水平達到≤10-6，這樣簡單粗暴的滅菌工藝選擇有好有壞。
好處：
（1）降低制藥企業(yè)滅菌工藝選擇的難度；
壞處：
（1）相當(dāng)一部分的注射劑無法仿制,尤其參比制劑是日本廠家的；
（2）一部分的注射劑一致性評價無法進行，F(xiàn)0值<8min的；
（3）會降低注射劑的無菌保證水平，終端熱處理變成無菌生產(chǎn)工藝，帶來臨床安全問題；
（4）昂貴的生產(chǎn)成本及更低的無菌保證水平，不利于國內(nèi)產(chǎn)品出口；
三、 如何在符合申報條件下選擇更具有科學(xué)性和優(yōu)勢的滅菌方案？
3.1 仿制藥滅菌方案
查詢參比制劑處方工藝或經(jīng)參比制劑重復(fù)滅菌推測，選擇與參比制劑相同且不低于國內(nèi)無菌指導(dǎo)原則的滅菌方案，如日本相當(dāng)多的注射劑采用F0<8min的終端熱處理方案，國內(nèi)現(xiàn)階段對于F0<8min的終端熱處理方案不認可，若采用殘存概率法（min 8≤F0），產(chǎn)品的理化指標容易超參比制劑且不符合質(zhì)量標準，采用無菌生產(chǎn)工藝又難以達到參比制劑的無菌保證值，所以在調(diào)研仿制項目時需考量參比制劑的無菌保證水平即滅菌/除菌工藝是否符合國內(nèi)的無菌指導(dǎo)原則。
3.2 創(chuàng)新藥滅菌方案
創(chuàng)新藥的滅菌方案應(yīng)依據(jù)各組分的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點、處方工藝研究及理化指標穩(wěn)定性，以患者的臨床收益為核心，現(xiàn)階段按國內(nèi)無菌指導(dǎo)原則（注射劑滅菌工藝選擇的決策樹）科學(xué)合理的選擇更具有科學(xué)性和優(yōu)勢的滅菌方案。
四、 滅菌到底在滅些什么？
滅菌通俗的講就是通過科學(xué)合理的滅菌/除菌工藝、良好的無菌保證體系及嚴格執(zhí)行藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范( GMP )使藥品中活微生物存在的概率低至某個可接受的水平，即這個可接受的水平必須≤10-6。
滅菌的核心是患者的臨床收益，科學(xué)合理的滅菌是根據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)計滅菌程序，是針對不同種類產(chǎn)品選擇不同的滅菌方式，在產(chǎn)品的無菌保證值和質(zhì)量之間尋找一個平衡點，即在滿足產(chǎn)品無菌保證值的前提下使用一切可以使用的滅菌/除菌工藝來提高產(chǎn)品質(zhì)量，盡最大可能提高患者的臨床收益。
滅菌到底在滅些什么？滅菌為患者滅掉了安全風(fēng)險，留下了藥品療效。
五、 終端滅菌注射劑最終走向何方？
我推測現(xiàn)階段國家發(fā)布的《化學(xué)藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導(dǎo)原則（試行）》是基于當(dāng)前的認知的過渡性指導(dǎo)原則。
我們身處技術(shù)大爆炸時代，隨著國內(nèi)科技水平的提高，對滅菌和無菌工藝研究更加的深入，以前的滅菌/無菌策略經(jīng)驗在以后不再全盤適用，不再拘泥于簡單的滅菌決策樹，更多基于患者臨床收益為核心的滅菌/無菌策略必將涌現(xiàn)。
終端滅菌注射劑最終走向何方？
當(dāng)前：采用國內(nèi)無菌指導(dǎo)原則的滅菌方案；
以后：會綜合采用基于產(chǎn)品特性的滅菌方案，即對不同種類產(chǎn)品，科學(xué)合理的選擇不同的滅菌方式，模糊F0和8min的關(guān)系，終端熱處理工藝也將會被考慮使用；
未來：隨著對滅菌和無菌工藝研究的深入（盡最大可能提高患者臨床收益），全套設(shè)備系統(tǒng)性能的提升（更高的無菌保證水平，可以全程即時的微生物負荷水平監(jiān)測），自動化邁入新的階段（消除人為的干擾），會更加科學(xué)合理的設(shè)計滅菌/無菌工藝（針對性的設(shè)計產(chǎn)品獨有的滅菌/無菌工藝）。
六、 總結(jié)
以患者的臨床收益為核心是我們制藥工作者的出發(fā)點和落腳點，現(xiàn)行的滅菌/無菌工藝帶來的臨床安全問題會隨著時間的推移逐漸顯現(xiàn)，這可能也是國家基于當(dāng)前的認知做出的無奈之舉。
相信隨著國內(nèi)科技水平的提高，我國的無菌指南會綜合學(xué)習(xí)并改進發(fā)達國家的無菌策略，更加科學(xué)合理的選擇產(chǎn)品的無菌工藝，保障患者的臨床收益。
參考文獻
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