摘要：該文通過電子問卷和現場交流兩種方法，調研了上海市 47 家無菌藥品代表企業生產過程消毒現狀，了解企業生產過程消毒現狀及存在的風險問題，以期為生產企業合理規范使用消毒劑以及相關標準的制定完善提供支持。結果發現生產企業使用的消毒劑種類多達 16 種，其中乙醇使用比例最高(74％)，其次是成品殺孢子劑(36％)、苯扎溴銨(34％)、季銨鹽類(30％)等；47 家企業有 34 種消毒劑組合；21％的企業未進行消毒效果驗證，僅有 38％的企業會采用生產環境分離菌株進行消毒效果驗證；核心生產區域的消毒方式共有 12 種不同組合，其中擦拭-噴灑-熏蒸的組合方式占比最高(38％)。主要問題有：部分無菌藥品企業存在消毒劑產品種類選擇不全面，無法覆蓋可能出現的微生物污染風險；消毒劑輪換措施不合理，未結合標準規范要求和實際操作定制科學方案；消毒劑驗證方案無法充分體現消毒劑的有效和適用性。

藥品尤其是注射液、注射用無菌粉末、眼用制劑等高風險無菌產品中的污染微生物，是影響藥品質量安全的重要因素，往往會造成臨床患者感染，甚至導致死亡等嚴重不良后果[1—3]。發生在我國的“欣弗事件”“刺五加事件”，以及 2018 年“院內凝膠劑感染事件”等，主要是由微生物原因引起的，對公眾直接造成了致命的傷害[4—6]。此外，2015 年至 2017 年美國 FDA 公布的藥品召回事件中，由微生物污染風險引起的召回事件占到近 50％[7]。

藥品中的污染微生物可能來源于藥品生產、運輸、使用等多個環節[8—10]，其中加強藥品生產過程中微生物控制是防止問題藥品流入市場的關鍵[11]。無菌藥品在生產過程中會受到環境負載微生物的污染威脅，因此使用消毒劑對生產環境進行消毒滅菌是非常必要的。目前國內外《藥品生產質量管理規范》(Good Manufacture Practice of Medical Products，簡稱 GMP)都明確規定制藥企業在生產過程中要使用消毒劑。雖然我國 GMP 2010 年版附錄 1 明確要求企業應按操作規程對潔凈區域的清潔和消毒[12]，但目前無論是 GMP 還是《中華人民共和國藥典》(ChP)，對制藥企業消毒劑的選擇、消毒效果的驗證均無具體規定，導致藥品生產企業在開展相關工作時無標準可循，無法完全有效保障藥品的微生物質量安全。

本研究對上海市 47 家無菌藥品企業消毒劑的使用現狀進行了調研，主要目標是了解無菌藥品企業消毒劑使用過程中存在的問題，為合理規范企業消毒劑的使用以及我國制藥企業消毒劑相關標準的制定完善提供支持。

1、研究方法

1.1調研方法

調研對象為上海市無菌藥品生產企業，目的是了解生產過程消毒劑使用現狀與存在問題。調研方法包括電子問卷和企業現場交流兩種形式，其中問卷要求企業質量負責人進行填寫。調研問卷由上海市醫藥質量協會與 2020 年 11 月向 47 家無菌藥品企業發放，共回收 47 份有效調查問卷。調研企業涉及無菌原料藥、大容量注射液、小容量注射液、血液制品、生物制品、粉針劑以及植入劑等產品類型。在問卷調查基礎上，選取 10 家代表性企業進行現場交流。

1.2調研對象

調研的 47 家企業生產的無菌藥品類型包含化學藥、生物制品、中藥及生化藥，其中以化學藥(26 家)和生物制品(16 家)為主(圖 1)；無菌藥品劑型則涵蓋了注射液、無菌粉末、眼用制劑、凍干粉針劑、涂劑、吸入液體制劑和植入劑等，其中以注射液(35 家)和無菌粉末(15 家)劑型最多(圖 2)。

1.3數據分析

使用 Excel 等統計分析軟件進行數據處理和分析。

2、結果與分析

2.1無菌藥品企業使用消毒劑種類及組合信息統計結果

調研結果表明 47 家無菌藥品生產企業使用的消毒劑種類多達 16 種(圖 3)，其中乙醇的使用比例最高(74％)，其次是成品殺孢子劑(36％)、苯扎溴銨(34％)、成品季銨鹽類(30％)，而洗必泰、聚六亞甲基胍則分別僅有 1 家企業使用。

不同企業使用的消毒劑組合信息如表 1 所示。統計分析結果表明不同企業選擇的消毒劑組合具有非常強的多樣性，47 家企業有 34 種不同的消毒劑組合，其中乙醇-過氧化氫-苯扎溴銨組合使用比例最高(5 家企業)，其次是乙醇-成品季銨鹽類-成品殺孢子劑(3 家企業)和酸性苯酚-堿性苯酚-成品殺孢子劑(3 家企業)。此外，有 3 家企業分別使用了最多的 5 種消毒劑，有 2 家企業分別僅使用了 2 種醇類消毒劑。

2.2消毒劑驗證試驗參考標準規范統計分析結果

為確保消毒劑的有效性，在使用前應對其消毒效力進行評估。調研結果表明 47 家無菌藥企中有 37 家(79％)公司，在其自有微生物實驗室或委托第三方檢驗實驗室開展了消毒效果驗證，但仍然有 21％的企業未進行相關驗證工作(圖 4)。而在進行消毒效果驗證試驗時，僅有38％的企業在標準菌株范圍外，納入了生產環境分離菌株進行驗證，而其余的 40％的企業僅選擇推薦的參考菌株進行驗證。

根據調研信息，制藥企業進行驗證試驗時參考的標準或規范詳見表 2，共涉及 12 個國內外標準規范，包括 4 個國內標準規范和 8 個國外標準規范。其中有 49％的企業參考《消毒技術規范》，其次為《藥品 GMP 指南(無菌藥品)》和 ChP。

2.3核心生產區域污染微生物消毒方式統計分析結果

47 家無菌藥品企業核心生產區域污染微生物的消毒方式如表 3 所示。結果表明制藥企業采用的消毒方式主要有擦拭、噴灑、熏蒸、紫外照射、氣相滅菌(過氧化氫)和氣體滅菌(臭氧)等 6 種方式，共有 12 種消毒方式組合，其中擦拭-噴灑-熏蒸的消毒方式組合使用率最高(38％)，其次是擦拭-熏蒸(13％)，有 11％的企業僅采用熏蒸方法進行核心生產區域污染微生物的消毒處理。

3、討論

無菌藥品企業制定完善的潔凈區域清潔和消毒管理規程，不僅可以規范企業人員消毒劑使用程序確保消毒效果，又能預防藥品發生微生物污染，保障藥品質量和微生物安全[13]。其中恰當的消毒劑產品選擇和應用對于控制環境微生物負載和污染至關重要[14]。

本研究調研結果表明制藥企業使用的消毒劑種類多達 16 種，具有較強多樣性。其中乙醇的使用比例最高(74％)，其次是苯扎溴銨等季銨鹽類消毒劑共占比 64％。乙醇和季銨鹽類消毒劑分別為中水平和低水平消毒劑，具有殺滅細菌繁殖體、部分真菌和病毒的功能，但無法殺滅細菌芽孢[12]。研究表明能夠形成芽孢的細菌在藥品生產環境中的污染率高達 13％，僅次于與人員操作相關的微球菌(38％)和葡萄球菌(21％)[1]。因此殺孢子劑的使用是無菌藥品生產中微生物污染控制必不可少的環節。歐盟 GMP 附錄 1 無菌產品和 USP<1072 消毒劑與滅菌劑>中均明確提到了生產過程使用殺孢子劑的要求[15—16]。常用的殺孢子劑主要包括戊二醛、過氧化氫、二氧化氯、過氧乙酸和次氯酸鈉和以上某幾種成分的混合物等。本次調研結果顯示有 36％的企業選擇了商業成品殺孢子劑，有部分企業使用了過氧化氫、過氧乙酸、84 消毒液(次氯酸鈉)等補充其芽孢殺滅能力。但仍有 12 家企業(26％)選擇的消毒劑未涵蓋對芽孢菌污染的控制，存在生產過程微生物污染失控的風險。殺孢子劑一般具有強氧化性，過度使用可能導致設備腐蝕，生產人員長期暴露也會產生潛在的安全問題[17]。因此建議企業在對環境監控數據和趨勢全面評估的基礎之上，制定合理的消毒劑使用方案，定期或者預防性使用殺孢子劑，在保證人員和設備安全的前提下，達到良好的污染控制效果。

中國 GMP 附錄 1 第 43 條規定：“一般情況下所采用的消毒劑種類應當多于一種”[12]。本次調研結果顯示全部企業都選擇兩種及以上的消毒劑進行輪換，但從實際使用的消毒劑種類信息表明企業對 GMP 中“消毒劑種類應多于一種”的描述存在理解誤區。2022 年最新發布的歐盟 GMP 附錄 1 中對消毒劑的輪換進行了明確闡述，即“應使用多于一種不同作用機制的消毒劑，以保證對細菌和真菌都有效”[15]。因此企業應將不同作用機制和廣譜有效作為制定消毒劑輪換措施時主要考慮因素。此外，本次調研發現部分企業選擇使用多種甚至同種不同供應商的消毒劑進行輪換，如兩種酚類、季銨鹽類、醇類或此類產品交疊輪換使用，以防止耐受性環境菌株的出現，導致消毒方案過于復雜。PDA TR70 表明不同于臨床中抗生素耐藥情況，消毒劑因其效力強(＞99.9％)、作用快(5～10 min)、使用濃度高的特點，迄今還沒有明確論據支持消毒劑耐受性突變菌株的出現[18]。過于復雜的消毒劑產品和應用方案，例如本次調研中發現一些企業使用高達 5 種消毒劑，往往會增加工作人員的操作失誤風險、人員培訓負擔，因此建議企業根據標準要求進一步優化消毒方案。

為確保消毒劑的適用性和有效性，根據 GMP 等相關標準要求，應對消毒劑消毒效果進行驗證[19]。本次調研發現約 20％的企業未進行消毒劑消毒效果驗證，存在質量保證風險。雖然標準法規中明確要求用戶應對消毒劑消毒效果進行驗證，但現有國內外的標準驗證方法主要針對消毒劑生產廠家而非藥品生產企業。藥品企業可根據實際應用情況，如表面材質，環境溫濕度，潔凈室污染程度等，對接種量、作用表面或判定標準等進行調整，建立更加合理科學的驗證方案。在進行消毒效果驗證時，試驗菌株的選擇對于消毒劑的適用性和有效性的評判至關重要。一般情況下，標準驗證方法中僅要求使用標準菌株。但其菌種選擇范圍與藥品生產環境菌種的實際分布存在一定差異。USP 1072[16]和 PDF TR70[18]等相關標準和技術指南中都有將實際生產環境分離菌株加入驗證方案的要求。因此企業在制定消毒劑消毒效果驗證方案時，可根據過往環境監控數據，將生產區域高頻分離污染菌種，以及文獻中報道的藥品生產環境中易污染、難殺滅的菌種納入驗證范圍；并定期對環境監控數據進行分析，評估污染菌種分布和發展趨勢，及時補充更新消毒劑驗證數據。本次調查的無菌藥品企業中，僅有49％的企業將環境分離菌株納入消毒劑消毒效果驗證。通過現場調研問詢，主要有兩方面原因：一是很多企業不具備微生物菌種鑒定能力，因而無法對具體環境分離菌株信息進行確認；二是企業未意識到環境菌株對消毒劑消毒效果驗證的重要性及實際意義。因此提升制藥企業生產中的微生物污染控制相關理論基礎和技術能力，是幫助完善消毒制度，保證產品質量的重中之重。

無菌藥品生產企業核心生產區域一旦發生微生物超標，輕則導致停工停產影響生產效率，重則導致產品污染、召回甚至影響企業聲譽，因此合理使用、規范使用消毒劑對于保障產品質量安全至關重要。通過本次對無菌藥品生產企業消毒劑使用現狀的調研分析，可初步發現目前生產過程中消毒劑使用存在的主要問題包括：①消毒劑產品種類選擇不全面，無法覆蓋可能出現的微生物污染風險；②輪換機制不合理，未結合標準規范要求和操作實際定制科學方案；③消毒效果驗證數據不完整，消毒劑驗證方案無法充分體現消毒劑的有效性和適用性。綜上所述，制定適用于制藥企業的消毒效果驗證標準方法或指導原則必要且緊迫，本次調研數據可為企業制定微生物污染控制策略、合理使用消毒劑，以及相關標準法規及技術指南的制修訂提供數據支持。