一、前言

美國藥典USP<60>收載了洋蔥伯克霍爾德菌（以下簡稱Bcc菌）的相關要求及檢測方法，FDA于 2021年9月發布了微生物控制的指南草案《Microbiological Quality Considerations in Non-sterile Drug Manufacturing》（非無菌藥品生產中的微生物質量考量），里面也包括Bcc菌在內的相關要求，但現行版中國藥典尚未收錄Bcc菌的相關要求。為與國際接軌，同時更好控制產品的微生物質量，中國藥典正在進行與Bcc菌相關內容的制修訂工作。

二、我國微生物質量控制的發展趨勢

考慮到要與國際接軌，國家藥典委員會正在制修訂微生物質量控制方面的通則內容，截圖如下：

中檢院也于今年5月份開展了微生物質量控制方面的相關培訓，具體培訓內容截圖如下：

從以上內容可以看出：我國的微生物質量控制趨勢正在與國際接軌，在非無菌藥品微生物質量控制中引入水分活度的概念（關于水分活度的相關內容詳見USP<1112>），使微生物質量控制更加科學；同時引入新型控制菌--Bcc菌的檢查方法，逐步與FDA和USP趨同。關于Bcc菌的相關介紹詳見下文。

三、洋蔥伯克霍爾德菌（Bcc菌）的研究趨勢

Bcc菌與現有的微生物限度檢查并不沖突，Bcc菌是微生物限度檢查的補充，它是一種有害微生物，屬于控制菌的一種。在美國，Bcc菌是非無菌藥品召回的首要原因。由于其危害性較大，美國藥典及FDA近期出臺的相關指南均重點關注了Bcc菌，在現有微生物限度檢查（一般包括需氧菌總數、霉菌酵母菌總數及控制菌檢查）的基礎上對Bcc菌提出了新的要求，其具體檢測方法詳見USP<60>。現有的關于微生物限度檢測所遵循的技術要求匯總如下表所示：

各國藥典及ICH指南中關于微生物限度控制的對比

由于Bcc菌的危害性較大，我國于近期也開始關注水性非無菌藥品中的Bcc菌污染問題。國家藥典委已將Bcc菌控制納入中國藥典2020年版增補本（目前該標準草案處于審議階段，可持續關注中國藥典2020年版增補本的動態），2021年11月26日發布的《化學藥品創新藥上市申請前會議藥學共性問題及相關技術要求》通告中規定：對于吸入、口服、粘膜、皮膚和鼻腔給藥的水溶液非無菌制劑，一般應參照相關技術要求對Bcc菌進行研究，制定相應的控制策略。即，目前藥典委和CDE均關注到了Bcc菌。

Bcc菌是一組革蘭氏陰性菌，包括20多種有效菌種。該菌屬于有害微生物之一，對免疫力低下的人群傷害較大，可能會引起感染甚至死亡。制藥用水和生產過程中使用的天然成分是藥品中Bcc菌的主要來源，即Bcc菌在固體制劑中出現的風險較小，其主要出現在水性非無菌藥品中。由于Bcc菌污染而導致的不良反應事件及藥品召回越來越多，所以建議生產商在生產水性非無菌藥品時嚴格遵循GMP，以更好保證產品的微生物質量：

★為工藝操作的設計和控制建立風險管理計劃，以防止Bcc菌污染；

★使用強悍的工藝用水系統（生產商必須對水系統進行穩健的設計，包括旨在防止有害微生物的控制措施以及用于監測、清潔和維護的程序）；

★確保各組分均符合微生物負荷量的適當標準；

★對設備進行恰當的消毒和清潔；

★采用經驗證的抽樣程序，以定期對Bcc菌的存在進行中控檢測和成品測試。

Bcc菌的危害性較大，為保證產品質量及患者安全，生產商在水性非無菌藥品生產中需重點關注該菌的污染問題。我國監管部門也在近期出臺了相關技術要求，在現有微生物限度檢查的基礎上，對水性非無菌藥品中的Bcc菌提出新的要求，建議對水性非無菌藥品開展Bcc菌檢查和風險評估，以更好控制水性非無菌藥品的微生物質量。

案例分析：洋蔥伯克霍爾德氏菌（Burkholderia cepacia，以下簡稱Bcc菌）對口服溶液的污染

FDA執法報告（2012年至2019年）顯示，Bcc菌是非無菌藥物召回的首要原因，有102次。其中，2016年5月，美國疾病控制與預防中心（CDC）向FDA通報了涉及Bcc菌污染的9個州13家醫院患者患嚴重疾病和死亡的案例，這款被Bcc菌污染的產品是一種用于治療便秘的水性OTC藥品。FDA和CDC的檢測顯示，超過10批口服液產品被Bcc菌污染。Bcc菌臨床分離株與產品分離株相匹配。調查還發現，該公司用于生產該產品的水系統中含有Bcc菌。FDA和CDC確定合同生產商是這次污染的源頭，設計不良的水系統（冷系統；不連續循環）、系統監控不足、生產控制不善以及微生物檢測方法不充分，這些都給消費者帶來了嚴重的風險。合同生產商生產的所有液體產品最終都被召回。

案例分析和討論：制藥用水和生產過程中使用的天然成分是藥品中Bcc菌的最可能來源。因此，嚴格執行cGMP對確保產品質量和患者安全至關重要，包括設計良好的水系統、完善的生產過程控制及日常監測、經過充分驗證的有效的微生物檢測方法等等，通過以上控制措施，使水性非無菌藥品免受Bcc菌污染，更好保證產品質量和患者安全。

四、小結

Bcc菌是一種新型的控制菌，中國藥典尚未正式收錄該控制菌。由于Bcc菌的危害較大，故建議生產商重點關注水性非無菌產品中的Bcc菌污染問題。在現有微生物限度檢查的基礎上，對水性非無菌藥品中的Bcc菌提出新的要求，以更好保證藥品的微生物質量及患者安全。由于Bcc菌的檢測方法比較復雜，美國藥典已在通則USP<60>中詳細描述了Bcc菌的檢測方法，建議中國藥典也盡快將Bcc菌的檢測列入制修訂計劃。

參考文獻

1.Analysis of FDA Enforcement Reports (2012-2019) to Determine the Microbial Diversity in Contaminated Non-Sterile and Sterile Drugs. https://www.americanpharmaceuticalreview.com/Featured-Articles/518912-Analysis-of-FDA-Enforcement-Reports-2012-2019-to-Determine-the-Microbial-Diversity-in-Contaminated-Non-Sterile-and-Sterile-Drugs/

2.Microbiological Quality Considerations in Non-sterile Drug Manufacturing.FDA.2019-09. https://www.fda.gov/media/152527/download

3. USP<1112>.APPLICATION OF WATER ACTIVITY DETERMINATION TO NONSTERILE PHARMACEUTICAL PRODUCTS

4. 王似錦,余萌,胡昌勤，等.14 株伯克霍爾德菌的鑒定分析［J］．中國抗生素雜志，2019，44( 10) : 1214-1219