本文主要介紹了生物梅里埃法國股份有限公司 研發的醫療器械“頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）”的臨床前研發實驗。

一、頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）的產品主要組成成分

由頭孢他啶（MIC 范圍：0.016-256 µg/mL）和阿維巴坦（4 µg/mL）組成的藥敏條。

二、頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）的產品預期用途

本產品用于定量檢測頭孢他啶/阿維巴坦對革蘭陰性需氧菌的最低抑菌濃度。 

本產品含預先設定好的抗生素濃度梯度，用于檢測抗生素對瓊脂培養基上過夜培養后的微生物的最低抑菌濃度 

（MIC）。 

根據 EMA 和／或 FDA 對該抗菌藥物的標示，頭孢他啶／阿維巴坦（Ceftazidime/Avibactam）對下列革蘭氏陰性需氧菌有活性。 

在體外和臨床感染中都有活性： 

Citrobacter freundii 弗氏檸檬酸桿菌 

Enterobacter cloacae 陰溝腸桿菌 

Escherichia coli 大腸埃希菌 

Klebsiella oxytoca 產酸克雷伯菌 

Klebsiella pneumoniae 肺炎克雷伯菌 

Proteus mirabilis 奇異變形桿菌

Serratia marcescens 粘質沙雷氏菌 

Pseudomonas aeruginosa 銅綠假單胞菌 

以下體外數據可用，但臨床意義尚不明確： 

Citrobacter koseri 克氏檸檬酸桿菌 

Enterobacter aerogenes 產氣腸桿菌 

Morganella morganii 摩氏摩根菌 

Providencia rettgeri 雷氏普羅威登斯菌 

Providencia stuartii 斯氏普羅威登斯菌 

Proteus vulgaris 普通變形桿菌

三、頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）的產品包裝規格

30 條/盒 

四、頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）的產品檢驗原理

頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）（后面簡稱“Etest CZA 藥敏條”），是一種纖薄惰性材質的無孔塑料條，用于確定細菌對抗菌藥物敏感性。其一側（A）是 MIC 讀數標尺(μg/mL），另一側（B）是預先設定好的抗生素濃度梯度。 

將 Etest CZA 藥敏條應用至接種過的瓊脂表面時，預成型的抗生素梯度立即轉移到瓊脂基質中，然后直接在 Etest CZA 藥敏條下方形成連續、呈指數梯度的抗生素濃度。培養期間可見細菌生長并出現一個以 Etest CZA 藥敏條為中心、兩邊對稱的抑菌圈。在細菌生長完全被抑制的地方，即抑菌圈尖端與 Etest CZA 藥敏條的相交處，從刻度上讀取 MIC 值（µg/mL）。 

雖然 Etest CZA 藥敏條的操作過程與紙片擴散法類似，例如，接種物的準備、瓊脂培養基和培養條件的選擇，但 Etest CZA 藥敏條并不是一種（紙片）擴散法，與傳統的紙片法在概念上完全不同。Etest CZA 藥敏條的抗菌藥物濃度梯度是預成型、預先設定好且不依賴于擴散。 

六、頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）的主要原材料的選擇 

本產品的主要原材料包括抗生素頭孢他啶和阿維巴坦，這些原材料均是通過外購的方式獲得。生物梅里埃制定了主要原材料的技術要求和質量標準并經檢驗合格。 

七、頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）的質控設置情況 

產品說明書列出了質控菌株和 MIC 質控范圍，用于確認試劑和檢測程序是否符合要求。質控菌株均為 CLSI 推薦的ATCC 菌株，包括大腸埃希菌 ATCC 25922、大腸埃希菌 ATCC 35218、肺炎克雷伯菌 ATCC 700603 和銅綠假單胞菌 ATCC 27853。 

八、頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）的分析性能評估研究

本產品分析性能評估內容包括精密度研究和質控菌株檢測的準確性研究。生物梅里埃提交了有效運行的質量管理體系下生產的三批產品性能評估資料。 

在精密度研究中，生物梅里埃使用三批產品對 30 株分離株進行檢測，包括 22 株腸桿菌科細菌和 8 株銅綠假單胞菌。 

考慮不同天數、不同操作者等因素，每個批次每個菌株進行27 次檢測，得到每批 810 個檢測結果，三個批次共 2430 個檢測結果。三個批次的重現性分別為 99.63%，99.75%和 98.64%，整體重現性結果為 99.5%，符合重現性不低于 95%的可接受標準。 

在質控菌株檢測的準確性研究中，使用三批產品在精密度研究的每個檢測日對 5 株 CLSI 推薦的質控菌株（大腸埃希菌 ATCC 25922、大腸埃希菌 ATCC 35218、肺炎克雷伯菌ATCC 700603 、銅綠假單胞菌 ATCC 27853 和金黃色葡萄菌ATCC 29213）進行檢測。全部質控菌株的檢測結果均在 CLSI 規定的范圍內，且試驗日間所有質控菌株的檢測結果的變化范圍在±1/2 稀釋度（常規對倍稀釋之間）范圍內。 

采用 CLSI 推薦的微量肉湯稀釋法作為參考方法，比較研究頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）對臨床分離株的檢測結果。微量肉湯稀釋法依據 CLSI M07-A10 推薦的方法制備。境外臨床研究共收集了1239 個臨床分離株，包括 1087 株腸桿菌科細菌和 152 株銅綠假單胞菌。其中 1087 株腸桿菌科細菌包括弗氏檸檬酸桿菌、克氏檸檬酸桿菌、產氣腸桿菌、陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、產酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌、摩氏摩根菌、奇異變形桿菌、普通變形桿菌、雷氏普羅威登斯菌、斯氏普羅威登斯菌和粘質沙雷菌。 

本產品檢測腸桿菌科細菌的分類一致率為 99.8%（EUCAST 折點）和 99.6%（FDA 折點），基本一致率為 99.1% （EUCAST 折點或 FDA 折點）；檢測銅綠假單胞菌的分類一 致率和基本一致率均為 99.3%（EUCAST 折點或 FDA 折點）。 

檢測結果均符合可接受標準。 

九、頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）的陽性判斷值研究 

依據 EUCAST 折點或 FDA 折點進行藥敏結果(敏感或耐藥)的判讀，設置本產品的 MIC 值。對于腸桿菌和銅綠假單胞菌，敏感折點均為≤8/4 µg/mL（EUCAST 折點或 FDA 折點），耐藥折點為>8/4 µg/mL（EUCAST 折點）或≥16/4 µg/mL（FDA 折點），沒有中介折點。 

十、頭孢他啶/阿維巴坦濃度梯度瓊脂擴散藥敏條（濃度梯度瓊脂擴散法）的穩定性研究 

貨架效期穩定性：采用三批試劑進行研究，試劑保存在2-8℃條件下，分別于保存第 0 個月、第 6 個月、第 9 個月、第 12 個月、第 13 個月、第 15 個月、第 19 個月、第 24 個月和第 27 個月時取出試劑進行檢測。檢測了 5 種 ATCC 菌株，包括大腸埃希菌 ATCC 25922、大腸埃希菌 ATCC 35218、肺炎克雷伯菌 ATCC 700603 和銅綠假單胞菌 ATCC 27853和金黃色葡萄菌 ATCC 29213。檢測結果均符合可接受標準（CLSI 規定的范圍內）。因此，確定產品在 2-8℃儲存條件下，可穩定保存 24 個月。