氯化鉀（potassium chloride）是一種電解質(zhì)補充劑，鉀離子是大多數(shù)身體組織的主要細胞內(nèi)陽離子，鉀離子參與許多基本的生理過程，包括維持細胞內(nèi)張力、神經(jīng)沖動的傳遞、心臟、骨骼和平滑肌的收縮以及維持正常的腎功能。

氯化鉀在臨床上用于治療和預防低鉀血癥。由于鉀為內(nèi)源性物質(zhì)，是正常人體必需飲食成分，其生物等效性研究存在較大特殊性，在一致性評價和仿制藥申報工作中，氯化鉀緩釋片的生物等效性研究申報資料存在各種各樣的問題，本文擬分析這些問題，并提出相關建議。本文內(nèi)容僅從學術角度進行科學探討，不作為注冊申報的依據(jù)。

參比制劑的選擇

氯化鉀從1950年開始作為藥用。

由Novartis公司開發(fā)的氯化鉀緩釋片于1975年4月在FDA獲批上市，商品名SLOW-K，規(guī)格為8mEq（相當于0.6g氯化鉀），因非安全有效性原因已撤市，1976年2月在日本獲批，規(guī)格為600mg。

Abbvie公司的氯化鉀緩釋片于1980年6月在FDA獲批上市，商品名K-TAB，規(guī)格為10mEq（相當于0.75g氯化鉀），隨后上市規(guī)格8和20mEq（分別相當于0.6和1.5g氯化鉀）。

Upsher-Smith Labs公司的氯化鉀緩釋片于1986年4月在FDA獲批上市，商品名為KLOＲ-CON，規(guī)格為8和10mEq（分別相當于0.6和0.75g氯化鉀）。適應證：對于用富含鉀食物的飲食管理或利尿劑劑量減少不足夠的患者，用于治療和預防伴有或不伴有代謝性堿中毒的低鉀血癥；用法用量：治療低鉀血癥劑量為40～100mEq/d，分劑服用，限制劑量為40mEq/劑；預防低鉀血癥典型劑量為20mEq/d。目前未見該品種在我國進口上市。

目前，原國家食品藥品監(jiān)督管理總局于2017年7月21日［總局《關于發(fā)布仿制藥參比制劑目錄（第八批）的通告》（2017年第116號）］，公布了8（相當于0.6g氯化鉀）和10mEq（相當于0.75g氯化鉀）規(guī)格氯化鉀緩釋片仿制藥研究的參比制劑，申報資料應當提供充分證據(jù)證明參比制劑來源。

試驗設計

鉀是正常的飲食成分，在穩(wěn)態(tài)條件下，從胃腸道吸收的鉀的量約等于從尿中排泄的量。通常鉀的飲食攝入為50～100mEq/d。

氯化鉀生物等效性試驗研究周期長，干擾因素多，生物樣品收集特殊，若因試驗設計不合理而不能充分證明生物等效性，則既造成人力物力浪費，亦影響申報的速度。

氯化鉀緩釋片的生物等效性研究一般采用隨機、開放、空腹單次給藥、雙交叉體內(nèi)研究，在正常健康男性和非孕女性的一般人群中開展生物等效性研究，試驗包括平衡期、基線期和給藥期。具體試驗設計要點如下。

納入/排除標準

建議進行生物等效性試驗，受試者數(shù)量應足夠多。參加的受試者年齡在20～40歲，并且體重為理想體重的±10%范圍內(nèi)。

受試者從試驗開始前7d不得進行劇烈的體育活動，直至出院。受試者從試驗開始前48h不得飲用含酒精的飲料，直至試驗完成。

有下列情況的受試者不可參加試驗：

①通過體檢和/或臨床實驗室檢查，發(fā)現(xiàn)有明顯的嚴重的腎、胃腸道、心血管、肝臟、神經(jīng)、腎上腺垂體功能障礙。

②目前或在試驗開始前6個月內(nèi)，使用任何形式的煙草。

③在試驗開始前30d內(nèi)，使用任何已知的酶誘導劑或抑制劑。

④具有毒品或酒精濫用史。

⑤對受試藥物或類似化合物有過敏史。

⑥在試驗開始前2周內(nèi)，使用任何處方或非處方藥（OTC）。

食宿標準

受試者應有統(tǒng)一的飲食標準，包括具體的鉀、鈉、熱量及液體的攝入量。液體的攝入量應保持在3000～5000mL/d，以保證整個研究期間有足夠的尿液排泄。

正常的液體攝入量為1300～2500mL/d，該試驗標準高于正常的液體攝入量。

嚴格控制鉀、鈉、熱量和液體的實際攝入量是試驗成功與否的關鍵因素。最后報告中應有關于膳食組成的詳細資料。

受試者的居住環(huán)境條件應當可控，盡可能為室內(nèi)。應避免過多體育活動出汗而導致鉀流失。受試者應在規(guī)定的時間飲食，盡量按標準攝入推薦量，避免不必要的體力活動。此外，應詢問受試者是否有任何長期的腹瀉或出汗過多，以防由此導致結果無效。給藥后，對受試者每天進行大便潛血檢查。

尿液和血液樣本的采集

每次尿樣收集應詳細記錄體積，分別保留樣品測試管和備份管并冷凍儲存。應測定肌酐清除率以確保受試者尿量足夠。可合并每個受試者24h以內(nèi)的尿樣（測試和備份以外的）以進行尿肌酐測定。

同時應測定血肌酐：在每天大致相同時間采集血液樣本進行血肌酐測定。通常血液樣本的采集可設置在尿液采集時間點的中點。

試驗設計

建議該試驗設計為2個分周期，每個分周期為8d，共16個白天和17個夜晚，在d7和d15分別給藥。建議每個8d分周期的試驗步驟應相同。建議時間表如下。

飲食平衡期（d1～4和d9～12）：

①建議整個研究期間執(zhí)行統(tǒng)一的飲食標準。具體飲食標準如下所述，以提供每日攝入的鉀、鈉和熱量。鉀：50～60mEq；鈉：160～180mEq；熱量：2500～3500。

②按如下所述標準飲用液體：上午7點開始飲用500mL常溫水；之后12h內(nèi)，每小時飲用200mL。在晚上19點到次日上午7點，受試者可根據(jù)醫(yī)囑，飲用額外定量的液體。

③在飲食平衡期間無需收集尿樣。

基線期（d5～6和d13～14）：

①基線期執(zhí)行研究統(tǒng)一制定的飲食標準和飲用液體標準，并與平衡期相同。

②每天應收集每個受試者的尿樣，建立受試者個體的鉀排泄基線水平。

③尿液收集間隔時間應在0～1，1～2，2～4，4～6，6～8，8～12，12～16和16～24h。

④尿液收集應在上午7點時開始。在d5和d13，受試者可不收集尿樣。在d6和d14，在上午7點開始收集，并完成16～24h樣品。

⑤在d6和d14，收集血液樣本，測定肌酐清除率。

給藥期（d7和d15）：

①空腹狀態(tài)下生物等效性試驗：空腹1夜（8h）后，上午7點，用500mL常溫水送服受試或參比80mEq。

②用藥后，受試者應保持直立（直立，站立或緩慢行走）至少3h。

③執(zhí)行研究統(tǒng)一制定的飲食標準和飲用液體標準，并與平衡期、基線期相同。

④尿液采集時間應與第5，16，13，14d相同。

⑤應收集血樣，測定肌酐清除率。

⑥用藥后收集檢測大便樣本。

用藥后（d8和d16）：

執(zhí)行研究統(tǒng)一制定的飲食標準和飲用液體標準，并與平衡期、基線期、給藥期相同。

出院（d17）：受試者在上午7點，收集完最后的尿液樣后，可以出院。

方法學驗證和生物樣品分析

本品BE研究中的待測物為尿中鉀。

申報資料中采用的測試方法可見電感耦合等離子體發(fā)射光譜或火焰原子發(fā)射光譜法等。應當參考《中華人民共和國藥典》現(xiàn)行版《生物樣品定量分析方法驗證指導原則》等文件，開展方法學驗證，全面考察殘留、選擇性、標準曲線、準確度和精密度、最低定量下限、提取回收率、基質(zhì)效應、稀釋可靠性、穩(wěn)定性。

應當注意生物基質(zhì)或者替代基質(zhì)的合理使用。目前部分申報資料替代基質(zhì)描述不清楚、使用混亂，影響生物樣品定量分析結果，進而可能影響最終藥動學結果及生物等效性結果。

申報資料應當按照《總局關于發(fā)布化學藥品新注冊分類申報資料要求（試行）的通告》（2016年第80號）及《總局關于發(fā)布化學藥品仿制藥口服固體制劑質(zhì)量和療效一致性評價申報資料要求（試行）的通告》（2016年第120號）要求，提供完整的方法學驗證及生物樣品相關資料。

藥動學結果分析

應對尿藥濃度數(shù)據(jù)進行藥動學參數(shù)的估算分析，提供受試者服藥后不同時間段的個體尿藥濃度列表、尿液體積列表、鉀離子排泄量列表、尿鉀量-時間數(shù)據(jù)、排泄速率-時間數(shù)據(jù)和尿藥排泄速率-時間變化曲線圖等數(shù)據(jù)。提供未經(jīng)基線校正和經(jīng)基線校正的受試者給予受試制劑和參比制劑后主要藥動學參數(shù)。

生物等效性結果分析

藥物的凈效應可由用藥期間鉀排泄量扣除鉀基線排泄量（在基線期）獲得。基線數(shù)據(jù)應為2d基線期得到的2次讀數(shù)的平均值，并且為特定受試者和特定周期（如受試者#12，其周期Ⅱ基線排泄量只能用來調(diào)整其在周期Ⅱ期間藥物的日口服劑量）。

每個受試者的尿鉀濃度數(shù)據(jù)應包括以下信息：①每個收集期的排泄量（Ae）。②從0～24h的累積尿排泄量（Ae0～24h）。③從0～48h的累積尿排泄量（Ae0～48h）。④尿排泄的最大速率（Ｒmax）。⑤最大尿排泄的時間（Tmax）。⑥在每個收集間隔的排泄率（Ｒ）。⑦各收集間隔的中點（t）。

所有數(shù)據(jù)應通過基線數(shù)據(jù)和非基線數(shù)據(jù)校準處理。統(tǒng)計分析（P=0.05）應通過對基線數(shù)據(jù)的ANOVA（方差分析）處理，通過對累積尿排泄（Ae0～24h）和尿排泄數(shù)據(jù)的最大速率（Ｒmax）的自然對數(shù)處理后可獲得90%置信區(qū)間。通過雙單側檢驗方法確定90%置信區(qū)間。

食物中K+，Na+量以及所含的熱量等均會影響到體內(nèi)的K+平衡，嚴格控制鉀、鈉、熱量和液體的實際攝入量是試驗的關鍵因素。應當合理設計試驗，確保基線期與給藥期飲食一致，符合相關要求，并在申報資料中報告膳食組成的詳細資料。

對Ae（0～24h），Ae（0～48h），Ｒmax經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后進行方差分析（ANOVA）。計算主要指標的幾何均值比率（受試制劑/參比制劑）的90%置信區(qū)間。應當提供經(jīng)基線調(diào)整后的相關結果以及未經(jīng)基線校正的相關結果。

申報資料中常見僅提供經(jīng)基線校正的生物等效性結果，應提供基線期相關原始數(shù)據(jù)，并同時提供經(jīng)基線校正和未經(jīng)基線校正的結果，以便全面評估試驗質(zhì)量及制劑生物等效性。

申報資料中常見的另一個問題是對生物等效性集（bioequivalenceset，BES）的確定不合理。如某試驗中某受試者完成第1周期后脫落，申報資料未將此受試者納入BES集進行生物等效性評估。

根據(jù)原國家食品藥品監(jiān)督管理總局2018年10月29日發(fā)布的《生物等效性研究的統(tǒng)計學指導原則》，生物等效性集（BES）為通常包括至少1個周期且具有至少1個可評價藥動學參數(shù)的統(tǒng)計分析集。在前述案例中應當將該受試者第1周期數(shù)據(jù)納入BES集并進行生物等效性評估。

安全性

制劑安全性是生物等效性研究考察的重要方面，申報資料中應包含受試者的病史、體檢報告以及所有不良事件記錄。

由于鉀對人體生理功能的重要作用以及氯化鉀緩釋片制劑的特殊性，在研究過程中應重點關注相關安全性。應當設定不良事件嚴重程度的判斷依據(jù)和標準，提供詳細的不良事件列表并對制劑相關性進行合理判斷。

目前部分申報資料信息的采集不夠全面，對制劑相關性的判斷不合理，如某試驗中，對于同為服藥后2d的同一癥狀，分別判斷與制劑無關和與制劑有關。

綜上所述，在氯化鉀緩釋片的一致性評價和仿制藥申報中，應當充分認識氯化鉀緩釋片生物等效性研究中的特殊之處，科學、合理地設計試驗，關注試驗過程中的關鍵環(huán)節(jié)，對試驗結果進行科學、充分的分析，并按照相關要求提供充分的資料。