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各種基線問題的解決辦法

嘉峪檢測網        2025-07-24 20:02

 基線漂移也是高效色譜中常見的問題之一,它指的是色譜圖基線在較長時間范圍內的非特異性波動(如連續不斷地上升和、下降或者循環),這種波動可能影響色譜峰的準確識別和定量分析。

 

基線漂移

 

各種基線問題的解決辦法

 

原因分析

 

① 柱溫波動。(即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。)

②流動相不均勻。(流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導致的漂移。)

③流通池被污染或有氣體。

④檢測器出口阻塞。(高壓造成流通池窗口破裂,產生噪音基線)

⑤流動相配比不當或流速變化。

⑥柱平衡慢,特別是流動相發生變化時。

⑦流動相污染、變質或由低品質溶劑配成。

⑧樣品中有強保留的物質(高K’值)以饅頭峰樣被洗脫出,從而表現出一個逐步升高的基線。

⑨使用循環溶劑,不提倡。未調整檢測器。

⑩檢測器沒有設定在最大吸收波長處。

 

解決方法

①控制好柱子和流動相的溫度,在檢測器之前使用熱交換器。
②使用HPLC級的溶劑,高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣,使用中使用在線脫氣或氦氣脫氣。

③用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。(不要用鹽酸) 
④取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。

⑤更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。

⑥用中等強度的溶劑進行沖洗,更改流動相時,在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。使用離子對試劑、緩沖鹽更應注意平衡柱。

⑦檢查流動相的組成。使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑。

⑧改變分析條件。使用保護柱,如有必要,在進樣之間或在分析過程中,定期用強溶劑沖洗柱子。

⑨重新設定基線。使用新的流動相。

⑩將波長調整至最大吸收波長處。重選檢測波長。

各種基線問題的解決辦法

 

基線波動

 

基線波動:

①氣相色譜儀(FID檢測器)

收集極被污染或者電路板噪音,檢查收集極,或者找專業人員檢查維修電路板;

色譜柱問題或者進樣口被污染,重裝或更換色譜柱,清洗進樣口;

氣體有問題,氣體受到污染或者質量較差,更換氣體;

檢測器被污染或進樣口隔墊降解,考慮清洗檢測器或更換隔墊。


②液相色譜儀

泵、流動相、檢測器(氘燈、流通池)等有問題:泵:停泵,無噪音,泵頭或流動相有問題,檢修泵;

有噪音,檢測器的問題,排查檢測器元件問題;

氘燈:Agilent Lab Advisor,能量測試,如果不通過,換燈,將時間清零;

流通池:Agilent Lab Advisor,測試,如果不通過,進行在線清洗;

流動相:將流通池注滿水,一段時間后,若基線平穩,則流動相有問題,更換流動相;

另外,儀器在風口時,受環境影響,基線可能有出現規律的波動。

 

總之,在使用氣相色譜儀或者液相色譜儀進行樣品分析檢測時,可能會遇到如上所述的色譜圖問題,也會遇到其他各種各樣的問題,當遇到問題時,首先應該分析可能的原因,挨個排查、解決,遇到問題并不可怕,解決問題的過程就是經驗積累的過程。

 

基線噪音

基線噪音也稱基線噪聲,一般是這樣規定的:它在數值上是最小檢測限的二分之一或者三分之一倍。當然不同的儀器,不同的操作條件它們的基線噪聲都是不一樣的,當我們把譜圖放大時,看到的基線上的一些小的波動,這就是基線噪聲。

各種基線問題的解決辦法

基線噪音

 

基線噪音原因及解決辦法

 

1、檢測器/記錄儀電子元件的問題

解決方法:斷開檢測器和記錄儀的電源,檢查并更正。

流動相脫氣不完全,檢測器和泵有空氣。

解決方法:對流動相進行脫氣,當流動相脫氣越好,基線就會越好。對系統進行沖洗以除去檢測器或泵中的空氣。

 

2、漏液

解決方法:檢查接頭是否松動,泵是否漏液,是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要,更換密封。檢查流通池是否漏液。

梯度比例問題(梯度的延遲)

解決方法:對系統進行一個梯度測試,來檢查梯度混合是否準確和一致。(梯度洗脫:可以用程序控制,在不同的時間實現兩種以上的流動相以不同比例混合,流動相比例發生變化極性也隨之變化,對進入色譜柱不同極性的樣品進行梯度式洗脫速度也發生了變化,從而實現更好的分離)

溫度影響(柱溫過高或檢測器未加熱)

解決方法:控制色譜柱和流動相的溫度,在檢測器前使用熱交換器。

流動相或色譜柱污染、變質

解決方法:更換流動相,清洗儲液器、過濾器,沖洗并重新平衡系統;更換系統的色譜柱。

采樣頻率不合適

解決方法:通過理論上的計算,N=16(T/W)^2(N是柱效,T是保留時間,W是峰寬。)可以根據計算結果來調整檢測器合適的采樣頻率。

 

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來源:Internet

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