移液槍是實(shí)驗(yàn)室中常用的精確測(cè)量和轉(zhuǎn)移液體的工具，正確使用移液槍不僅關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，還關(guān)系到實(shí)驗(yàn)人員的安全。因此，掌握移液槍的正確使用方法和注意事項(xiàng)至關(guān)重要。您知道嗎，如果只是簡(jiǎn)單地遵從接下來(lái)這些技巧，您移液的準(zhǔn)確性和重復(fù)性將可能會(huì)得到5%的提高。

1.最優(yōu)的量程范圍

大多數(shù)移液器的正常操作體積范圍是指示量程的（10-100）%。盡管這一范圍是可操作范圍，但隨著體積設(shè)定的下降性能參數(shù)將會(huì)發(fā)生變化。

100uL移液器的準(zhǔn)確性參數(shù)在指示量程的50-100%的時(shí)為±0.8%。然而如果你移取10μL(或者指示量程的10%)，不準(zhǔn)確度將會(huì)提高3倍，或者為（2.5-3）%。

所以獲得最佳性能的最優(yōu)量程范圍是指示量程的35-100%。盡量避免將一個(gè)移液器的體積設(shè)定少于最大體積的10%，而應(yīng)該用小量程的移液器來(lái)進(jìn)行小體積移液操作。

2.吸頭浸入深度

正確的吸頭浸入深度可以提高準(zhǔn)確性高達(dá)5%，尤其對(duì)微量移液器相當(dāng)重要。對(duì)于微量移液器，吸頭應(yīng)該浸入（1-2）mm，而對(duì)于大量程的移液器，浸入深度應(yīng)為（6-10）mm。

如果吸頭浸入的太深，吸頭內(nèi)部的空氣就會(huì)被壓縮，造成過(guò)多的液體被吸入。殘留在吸頭表面的液體也可能會(huì)影響結(jié)果。

吸頭如果浸入的不夠充分，那么可能會(huì)吸入空氣，就會(huì)造成氣泡的形成和移取體積不準(zhǔn)。兩者都會(huì)造成不準(zhǔn)確的移液體積，

3.正確的吸液角度

吸液時(shí)吸頭盡可能以90度角浸入到樣品中，最好不要偏離垂直位置超過(guò)20°對(duì)于微量體積的移液器，以垂直角度移取溶液可以提高2.5%的準(zhǔn)確性。

偏離垂直超過(guò)20°吸液將會(huì)導(dǎo)致不準(zhǔn)確的量取-過(guò)多的液體將會(huì)被吸入，造成移液不準(zhǔn)確。以60度角浸入，將會(huì)使你的液體吸取量超過(guò)所設(shè)定的0.7%。

4.保持一致性

保持一致的移液節(jié)奏和速度將會(huì)幫助你得到理想的、重復(fù)性更高的結(jié)果。保持節(jié)奏和速度的一致性可以將準(zhǔn)確性提高5%。

保持一致的樣品分配、一致的樣品排液

注意區(qū)分潤(rùn)洗吸頭和不適合潤(rùn)洗的情況

潤(rùn)洗吸頭2-3次可以在吸頭內(nèi)形成同質(zhì)膜，這樣可以提高0.2%的準(zhǔn)確度性。

潤(rùn)洗可以中和微量移液中的毛細(xì)效應(yīng)，對(duì)于大體積移液，這可以使吸頭內(nèi)部溫度與樣品溫度一致。

當(dāng)移取熱的和冷的溶液時(shí)潤(rùn)洗會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生不利影響，如從冰浴中移液或者溶液溫度超過(guò)37攝氏度，潤(rùn)洗可能會(huì)造成高達(dá)5%的錯(cuò)誤率。

5.避免溫度變化

恒定的室溫:移液和校準(zhǔn)的理想溫度是21.5℃士1℃。避免在有風(fēng)或者有陽(yáng)光直射，溫度變化較大的區(qū)域操作，這些區(qū)域可能會(huì)降低移液的精準(zhǔn)度。

保證足夠的平衡時(shí)間:除非另有其他要求，否則請(qǐng)保證足夠的時(shí)間來(lái)使您的液體樣品和移液器達(dá)到平衡溫度。

手溫效應(yīng)長(zhǎng)時(shí)間使用移液器，來(lái)自手的熱量可能會(huì)加熱移液器一導(dǎo)致移液器內(nèi)部的空氣受熱膨脹從而會(huì)產(chǎn)生不準(zhǔn)確的結(jié)果。

圖    移液槍的使用方法

6.移液槍的校準(zhǔn)方法

6.1.準(zhǔn)備超純水、萬(wàn)分之一天平(如果校正 0.5~2.5ul量程的，至少要十萬(wàn)分之的天平)、溫濕度計(jì)、恒溫室，還需準(zhǔn)備一個(gè)小口容器，防止水分揮發(fā)。

6.2.按移液器總量程的 100%、50%、10%分別進(jìn)行第三和第四步。

6.3.吸頭要反復(fù)吸取超純水三次后，吸取固定容積的超純水，推入放置在天平上的小口容器中，待數(shù)據(jù)穩(wěn)定讀取天平數(shù)值，同時(shí)記錄溫度。重復(fù) 10次。

6.4.將測(cè)量的數(shù)據(jù)用 ISO8655 中的計(jì)算公式計(jì)算獲得對(duì)應(yīng)溫度下的體積，取平均值。

6.5.根據(jù)三個(gè)測(cè)量點(diǎn)的偏差，用移液器專(zhuān)用的校正扳手通過(guò)移液器的校正窗進(jìn)行調(diào)整。

6.6.重復(fù) 3、4 步，直至偏差在 ISO8655 的要求內(nèi)為止。

7.移液槍維護(hù)和保養(yǎng)

如不使用，要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧。

最好定期清洗移液槍?zhuān)梢杂梅试硭?0%的異丙醇，再用蒸餾水清洗，自然晾干。

高溫消毒之前，要確保移液器能適應(yīng)高溫。

校準(zhǔn)是可以在20-25度環(huán)境中，通過(guò)重復(fù)幾次秤量蒸餾水的方法來(lái)進(jìn)行

使用時(shí)要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時(shí)吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，方法時(shí)吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，看看液面是否下降。

結(jié)語(yǔ)

如今全自動(dòng)儀器的推進(jìn)，移液槍使用的頻率越來(lái)越少了，習(xí)慣了機(jī)器自動(dòng)加樣，反而導(dǎo)致一部分人不會(huì)正確使用傳統(tǒng)移液槍?zhuān)且埔簶屧谵D(zhuǎn)移標(biāo)本或者質(zhì)控品的時(shí)候，又不能沒(méi)有。本文詳細(xì)介紹了移液過(guò)程中的如何提高精度，比如做BCA項(xiàng)目，潤(rùn)洗槍頭和不潤(rùn)洗差距很大，看完本篇文章，你應(yīng)該會(huì)了吧？

參考資料：

[1]ISO 8655-1-2002 活塞式容量測(cè)量?jī)x器,第1部分:術(shù)語(yǔ)、一般要求和用戶(hù)使用建議

[2]ISO 8655-2-2002 活塞式容量測(cè)量?jī)x器,第 2 部分:活塞式吸量管

[3]ISO 8655-6-2002 活塞式容量測(cè)量?jī)x器,第6部分:確定測(cè)量誤差的重量分析法