【問】通常我們在分析天然藥物成分的時候結構復雜，無法考察組分的PKa值，我們如何去選擇最合適的流動相或者是拖尾該怎么改善呢？

【答】如果天然產物中沒有易電離的極性基團，就不需要用緩沖鹽調節pH。如果天然產物中既有酸性基團，也有堿性基團，譬如有pKa=6.2的羧基和pKa=9.0的氨基的兩性物質，建議將pH用磷酸鹽緩沖鹽控制在2.4（如果是諸如月旭的Ultimate LP-C18這樣的耐酸色譜柱，還可以調得更低）。如果pH控制在6.2-9.0之間，兩個基團都處于離子態，保留能力最差，是最不可取的。如果不清楚復雜物質中含有什么基團，也請將pH調到2.4或更低。因為pH調低，起碼抑制了酸性基團的電離而處于中性分子狀態，而增加酸性基團這個部分在反相色譜中的保留能力；另外低pH還抑制了硅醇基的活性，有利于獲取對稱的峰形。情況不明時候，為什么不建議調高pH呢？一方面一般色譜柱都不能承受pH9以上的條件；即使是像月旭的Xtimate系列一樣能耐12.5的柱子，調高pH和調低pH相比，還有一個硅醇基活性大的劣勢。