樹脂半薄切片是一種以樹脂作為支撐載體，經過取材固定、清洗、脫水、滲透、包埋、切片染色獲得的組織切片，與石蠟切片相比，其厚度更薄（300nm-1um之間）、分辨率更高、染色不用脫樹脂等特點。

LR White樹脂是一種多羥基丙烯酸樹脂，具有較高的親水性，易于滲透和切片，對于染液的親和性良好，廣泛用于組織結構研究。

具體操作流程如下：

1、取材固定

選取觀測目標位置，用雙面刀片切取2mm左右的組織，于固定液中浸泡固定24h。固定完成后于4℃冰箱保存，待不同處理全部取樣完畢后進行后續實驗。

固定液可以采用2.5%戊二醛、4%多聚甲醛或者二者的混合液，對于不易滲透的組織，固定時可采用抽真空的方式加速固定液滲透。

2、脫水

脫水顧名思義，就是將組織中的水分去除，便于樹脂滲透。脫水不徹底，樹脂滲透受阻，組織結構受損，嚴重的在切片時就直接在水面上碎成粉末狀；脫水過度會造成組織內含物抽提過度。不管是哪一種狀態都對組織結構的保存不利。

具體操作流程：吸棄原有溶液，向離心管中分別加入30%-50%-70%-90%-100%-100%乙醇，每級脫水30min。

3、滲透

滲透是指采用樹脂和乙醇的混合液以及純樹脂逐步將組織內的有機試劑取代成純樹脂。

具體操作流程：分別配置LR White樹脂與乙醇的梯度混合液（30%、50%、70%）進行滲透，其中30%樹脂1h-50%樹脂3h-70%樹脂5h-100%樹脂5h兩次。

4、聚合

將滲透好的組織調整方向后放入包埋模具中，于60℃烘箱聚合24h。

注意，在放置組織時可以采用牙簽挑取，利用牙簽尖端附著的微量樹脂液滴，將組織包裹移動。盡量不要使用鑷子，鑷子夾取的力度不合適，會造成組織變性，從而影響結構。

5、切片

聚合好的組織，先用刀片將多余的樹脂去掉，暴露組織后于切片機上進行切片。切片采用玻璃刀，切下的片子于水槽中展開，利用撈片環將切片撈起，置于載玻片上45℃烤干。

注意：玻璃刀需要用玻璃刀制刀機進行制備，制備好的玻璃刀粘上水槽后即可進行切片，玻璃刀制備的狀態會影響切片效果（褶皺、刀痕、卷曲等）。

6、染色鏡檢

染色時先將載玻片置于烤片機上進行預熱（45℃），根據實驗需求選取不同的染液進行染色即可。切好的片子可以統一放置在切片盒中，待所有實驗組織都切完后進行統一染色。

本文以甲苯胺藍為例：滴加1%甲苯胺藍5ul，于烤片機上進行恒溫染色，待染液液滴周圍出現金色環帶后，用蒸餾水清洗掉多余染液，于烤片機上烤干后鏡檢。