摘 要： 采用高效液相色譜法測(cè)定四妙勇安湯物質(zhì)基準(zhǔn)的指紋圖譜及含量。使用ZORBAX SB-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.2%磷酸為流動(dòng)相，梯度洗脫，流量為0.8 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm，柱溫為25 ℃。建立15批四妙勇安湯物質(zhì)基準(zhǔn)的高效液相色譜指紋圖譜，運(yùn)用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（國(guó)家藥典委員會(huì)2012 A版）進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，對(duì)共有峰進(jìn)行藥味歸屬，建立了綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷的含量測(cè)定方法。15批四妙勇安湯物質(zhì)基準(zhǔn)相似度均大于0.90，指紋圖譜中含有11個(gè)共有峰，其中歸屬于金銀花5個(gè)，玄參2個(gè)，當(dāng)歸2個(gè)，甘草2個(gè)。綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為2.24%、0.59%、0.14%。建立的15批四妙勇安湯高效液相色譜指紋圖譜精密度、穩(wěn)定性良好，能夠較好的反映其化學(xué)成分組成，可用于四妙勇安湯物質(zhì)基準(zhǔn)的質(zhì)量控制與評(píng)價(jià)。

 

關(guān)鍵詞： 四妙勇安湯基準(zhǔn)； 高效液相色譜法； 指紋圖譜； 綠原酸； 哈巴苷； 哈巴俄苷

 

 

四妙勇安湯是國(guó)家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的首批100首來(lái)源于古代經(jīng)典名方的中藥復(fù)方制劑之一，處方經(jīng)典簡(jiǎn)潔，效用顯著。此方最早收載于漢代《華佗神醫(yī)秘傳》，后收載于清代名醫(yī)鮑相敖所著《驗(yàn)方新編》中[1]，由金銀花、玄參、當(dāng)歸、甘草四味中藥組成[2]，具有清熱解毒，活血止痛之功效[3]，主要用于毒熱壅盛所致的瘡疽癰瘍之證[4]，臨床上主要用于治療血栓閉塞性脈管炎、糖尿病足、動(dòng)脈硬化閉塞癥[5?8]，取得了較好的療效。目前還廣泛用于痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、結(jié)節(jié)性紅斑等的治療[9?10]。

近年來(lái)對(duì)四妙勇安湯的提取制備工藝及質(zhì)量控制研究已有報(bào)道[11?12]，但對(duì)四妙勇安湯物質(zhì)基準(zhǔn)(指按傳統(tǒng)工藝煎煮所得湯劑經(jīng)低溫干燥而得的干浸膏)的指紋圖譜研究及指標(biāo)成分含量測(cè)定涉及較少。中藥復(fù)方制劑成分復(fù)雜，指紋圖譜能夠較全面地反映其所含化學(xué)成分的種類(lèi)和數(shù)量，能夠?qū)ζ溥M(jìn)行整體描述和評(píng)價(jià)，有利于控制中藥材質(zhì)量，促進(jìn)中藥現(xiàn)代化發(fā)展。

為了能夠較為全面系統(tǒng)地了解四妙勇安湯物質(zhì)基準(zhǔn)所含化學(xué)成分的種類(lèi)和數(shù)量[13]，筆者建立了四妙勇安湯物質(zhì)基準(zhǔn)的HPLC指紋圖譜，并且研究了指紋圖譜中各色譜峰的來(lái)源，為四妙勇安湯物質(zhì)基準(zhǔn)的進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)奠定了基礎(chǔ)。

 

 

1、 實(shí)驗(yàn)部分

 

 

1.1 主要儀器與試劑

高效液相色譜儀：SHIMADZA LC-20AT型，配二極管陣列檢測(cè)器，日本島津儀器公司。

電子天平：NewClassic MS105DU型，感量為0.01 mg，瑞士梅特勒-托利多儀器公司。

超聲波清洗器：KQ500D型，昆山市超聲儀器有限公司。

煎藥壺：D5.5-L型，潮州市潮安區(qū)康雅順電器有限公司。

真空干燥箱：BZF-50型，上海博訊醫(yī)療生物儀器股份有限公司。

高速多功能粉碎機(jī)：HCP-1000A型，浙江省永康市金穗機(jī)械制造廠。

超純水發(fā)生器：Milli-Q Reference型，美國(guó)密理博公司。

綠原酸對(duì)照品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.0%，批號(hào)110753-202018，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

哈巴苷對(duì)照品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為96.8%，批號(hào)110729-201707，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

哈巴俄苷對(duì)照品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為96.8%，批號(hào)110730-202110，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

阿魏酸對(duì)照品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.4%，批號(hào)110773-201915，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

3.5-O-二咖啡酰奎寧酸對(duì)照品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.0%，批號(hào)111894-202205，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

4.5-O-二咖啡酰奎寧酸對(duì)照品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為99.0%，批號(hào)111782-202208，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

甘草苷對(duì)照品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95.0%，批號(hào)111610-202209，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

甘草酸銨對(duì)照品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為96.2%，批號(hào)110731-202122，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

金銀花、當(dāng)歸、玄參、甘草藥材樣品：產(chǎn)地及批號(hào)見(jiàn)表1，通過(guò)隨機(jī)數(shù)表法對(duì)表1中不同品種及批次藥材進(jìn)行隨機(jī)組合，見(jiàn)表2，北京園禾方圓植物科技股份有限公司。

表1   四妙勇安湯飲片來(lái)源信息

Tab. 1   Source information of Simiao Yong'an Decoction herbal pieces

 

表2   四妙勇安湯基準(zhǔn)物隨機(jī)組合

Tab. 2   Random combination table of Simiao Yong'an Decoction

乙腈：色譜純，賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司。

磷酸：色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。

實(shí)驗(yàn)用水為純化水。

1.2 色譜條件

色譜柱：ZORBAX SB-C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm，美國(guó)安捷倫科技有限公司)；柱溫：25 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；流動(dòng)相：A相為乙腈，B相為0.2%(體積分?jǐn)?shù)，下同)磷酸溶液，流量為0.8 mL/min，梯度洗脫，洗脫程序見(jiàn)表3；進(jìn)樣體積：10 μL，理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)應(yīng)不低于5 000。

表3   梯度洗脫條件

Tab. 3   Conditions of mobile phase in gradient elution

 

1.3 溶液制備

四妙勇安湯基準(zhǔn)樣品溶液：按照處方比例稱(chēng)取金銀花90 g、玄參90 g、當(dāng)歸60 g、甘草30 g，加水浸泡1 h，煎煮兩次，第一次50 min，第二次40 min，煎液濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.30～1.35 (60 ℃)，減壓干燥制成干膏粉。取干膏粉適量(含金銀花約0.5 g)，精密稱(chēng)定，置于50 mL容量瓶中，加水適量超聲20 min，取出放冷，加水稀釋至標(biāo)線，搖勻，用0.45 μm濾膜濾過(guò)。

單味藥材溶液及陰性對(duì)照溶液：按處方組成分別稱(chēng)取金銀花、玄參、當(dāng)歸、甘草各單味藥材以及處方中缺金銀花、玄參、當(dāng)歸、甘草各單味藥材的陰性對(duì)照，按樣品溶液制備方法制備各單味藥材溶液及陰性對(duì)照溶液。

綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷對(duì)照品貯備溶液：精密稱(chēng)取綠原酸對(duì)照品、哈巴苷對(duì)照品、哈巴俄苷對(duì)照品適量，加入70%(體積分?jǐn)?shù)，下同)乙腈溶解，制得質(zhì)量濃度分別為928.00、229.20、63.20 μg/mL的對(duì)照品貯備溶液。

綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷混合對(duì)照品溶液：取綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷貯備溶液適量，加入70%乙腈，制成混合對(duì)照品溶液，綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷質(zhì)量濃度分別為232.00、57.30、15.80 μg/mL。

阿魏酸、3.5-O-二咖啡酰奎寧酸、4.5-O-二咖啡酰奎寧酸、甘草苷、甘草酸銨對(duì)照品溶液：分別稱(chēng)取阿魏酸對(duì)照品、3.5-O-二咖啡酰奎寧酸對(duì)照品、4.5-O-二咖啡酰奎寧酸對(duì)照品、甘草苷對(duì)照品、甘草酸銨對(duì)照品適量，加入70%乙腈，制成質(zhì)量濃度均約為100 μg/mL的對(duì)照品溶液。

空白溶劑：取水作為空白溶劑。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

取四妙勇安湯基準(zhǔn)樣品溶液，按1.2色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖。將15批樣品的HPLC色譜圖導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》(2012版)，進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)。依照對(duì)照品溶液的出峰時(shí)間，對(duì)共有峰進(jìn)行藥味歸屬；按照外標(biāo)法計(jì)算綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷的含量。

 

2、 結(jié)果與討論

 

2.1 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化

2.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

采用二極管陣列檢測(cè)器在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)對(duì)綠原酸、哈巴苷及哈巴俄苷對(duì)照品溶液進(jìn)行掃描，綠原酸、哈巴苷及哈巴俄苷對(duì)照品溶液紫外吸收光圖譜見(jiàn)圖1。由圖1可見(jiàn)，綠原酸對(duì)照品溶液在218、326 nm處有較強(qiáng)吸收；哈巴苷對(duì)照品溶液在195 nm處有較強(qiáng)吸收，哈巴俄苷對(duì)照品溶液在280 nm處有較強(qiáng)吸收，但這幾個(gè)吸收峰并不重疊。3種對(duì)照品溶液在紫外末端均有吸收，因此綜合考慮下，確定檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm。

圖1   綠原酸、哈巴苷及哈巴俄苷對(duì)照品的紫外吸收光譜

Fig. 1   UV spectrograms of chlorogenic acid，harpagide，harpagoside reference substances

2.1.2 流動(dòng)相的選擇

分別考察甲醇-0.1%磷酸、乙腈-0.1%磷酸、乙腈-0.2%磷酸三種流動(dòng)相體系，以不同梯度進(jìn)行分析，以色譜峰峰形、分離度等為考察指標(biāo)。以甲醇-0.1%磷酸為流動(dòng)相時(shí)，綠原酸色譜峰形較差，色譜保留時(shí)間較長(zhǎng)，與前后雜質(zhì)峰的分離度均小于1.5；以乙腈-0.1%磷酸為流動(dòng)相時(shí)，綠原酸峰形較好，但是與前后雜質(zhì)峰的分離度均小于1.5；以乙腈-0.2%磷酸為流動(dòng)相時(shí)，綠原酸峰形較好，與前后雜質(zhì)峰的分離度均大于1.5，哈巴苷、哈巴俄苷與前后雜質(zhì)峰的分離度均符合要求，所有色譜峰能達(dá)到基本分離，因此最終選擇乙腈-0.2%磷酸流動(dòng)相體系，梯度洗脫。

2.1.3 含量測(cè)定中指標(biāo)成分的選擇

四妙勇安湯君藥為金銀花[14]，用藥量占總藥量的三分之一；臣藥為玄參，用藥量亦為同樣占總藥量的三分之一。金銀花的主要成分為綠原酸，玄參的主要成分為哈巴苷與哈巴俄苷[15]，所以選擇測(cè)定這3種指標(biāo)成分的含量，以保證四妙勇安湯物質(zhì)基準(zhǔn)的有效性和穩(wěn)定性。

2.1.4 樣品溶液制備方法

在指紋圖譜方法建立時(shí)，對(duì)S1樣品制備方法進(jìn)行了考察。提取溶劑為水，考察不同提取方式(超聲法、回流法)及提取時(shí)間(分別為10、20、30、60 min)下目標(biāo)成分測(cè)定結(jié)果，結(jié)果見(jiàn)表4。綜合分析后選擇提取率最高的組合即超聲20 min的提取方法。

表4   不同提取方式及不同提取時(shí)間下綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定結(jié)果

Tab. 4   different extraction methods and different extraction times of chlorogenic acid，harpagide，harpagoside

 

2.2 四妙勇安湯基準(zhǔn)樣品指紋圖譜

2.2.1 HPLC指紋圖譜的建立及相似度評(píng)價(jià)

取15批基準(zhǔn)樣品粉末適量(相當(dāng)于金銀花0.5 g)，按1.3方法制備樣品溶液，再按1.2色譜條件進(jìn)樣，記錄其HPLC指紋圖譜，然后將15批基準(zhǔn)樣品的HPLC色譜圖導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》(2012版)，進(jìn)行指紋圖譜分析，以S1為參照?qǐng)D譜，時(shí)間窗寬度0.1 s，設(shè)置中位數(shù)法，全譜峰匹配，生成對(duì)照指紋圖譜。空白溶劑圖譜、基準(zhǔn)樣品對(duì)照?qǐng)D譜及15批疊加圖譜，見(jiàn)圖2～圖4。

圖2   空白溶劑色譜圖

Fig. 2   chromatogram of blank solvent

圖3   四妙勇安湯基準(zhǔn)對(duì)照?qǐng)D譜

Fig. 3   reference fingerprint chromatogram of Simiao Yong'an decoction substance benchmarks

圖4   15批四妙勇安湯基準(zhǔn)樣品指紋圖譜疊加

Fig. 4   15 batches fingerprint chromatogram of Si miao Yong'an decoction substance benchmarks

2.2.2 共有峰的指認(rèn)及歸屬

經(jīng)過(guò)對(duì)15批基準(zhǔn)樣品的HPLC指紋色譜圖的比較，認(rèn)定其中11個(gè)峰作為共有峰。通過(guò)對(duì)基準(zhǔn)樣品、單味飲片、對(duì)照品、陰性樣品及空白溶劑的圖譜比對(duì)，指認(rèn)1#峰為哈巴苷；3#峰為綠原酸；5#峰為阿魏酸；6#峰為甘草苷；7#峰為3.5-O-二咖啡酰奎寧酸；8#峰為4.5-O-二咖啡酰奎寧酸；9#峰為哈巴俄苷；10#峰為甘草酸銨。確定了11個(gè)共有峰的歸屬，其中2#、3#、4#、7#、8#峰來(lái)自于金銀花；峰5#、11#來(lái)自于當(dāng)歸；1#、9#峰來(lái)自于玄參；6 #、10 #峰來(lái)自于甘草。

2.2.3 指紋圖譜精密度試驗(yàn)

精密稱(chēng)取S1樣品，平行稱(chēng)取6份，按1.3方法制備樣品溶液，按1.2色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖。以共有峰3號(hào)(綠原酸)為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，并計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表5。各共有峰相對(duì)保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2%，相對(duì)峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3%，表明該方法精密度良好。

表5   15批基準(zhǔn)樣品指紋圖譜方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果（n=6）

Tab. 5   validation method used for15 batches fingerprint chromatogram of Simiao Yong'an decoction substance benchmarks

 

2.2.4 指紋圖譜穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密稱(chēng)取S1樣品，按1.3方法制備樣品溶液。按1.2色譜條件，分別于0、2、4、6、8、24 h進(jìn)樣，記錄色譜圖。以共有峰3號(hào)(綠原酸)為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，并計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(見(jiàn)表5)。測(cè)得各共有峰相對(duì)保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2%，相對(duì)峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3%，表明樣品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.5 指紋圖譜相似度計(jì)算結(jié)果

采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》(2012版)，以15批基準(zhǔn)樣品的HPLC指紋圖譜生成的對(duì)照指紋圖譜為參照，進(jìn)行整體相似度評(píng)價(jià)，見(jiàn)表6。15批基準(zhǔn)樣品相似度均大于0.90，表明其差異較小，制備工藝穩(wěn)定、重現(xiàn)性良好。

表6   15批基準(zhǔn)樣品相似度測(cè)定結(jié)果

Tab. 6   the similarity of the 15 batches substance benchmarks

2.3 四妙勇安湯基準(zhǔn)樣品中3種指標(biāo)成分含量測(cè)定

2.3.1 線性方程和檢出限

分別精密吸取對(duì)照品貯備溶液適量，置于同一容量瓶中，加入70%乙腈稀釋至標(biāo)線，得不同質(zhì)量濃度的系列對(duì)照品線性混合溶液。取上述溶液按1.2色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以各成分對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(x)、峰面積為縱坐標(biāo)(y)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，計(jì)算線性方程，見(jiàn)表7。取混合對(duì)照品溶液逐級(jí)稀釋?zhuān)?dāng)信噪比為3時(shí)，測(cè)得綠原酸、哈巴苷及哈巴俄苷的檢出限分別為為0.01、0.05、0.02 μg/mL。

表7   三種指標(biāo)成分的線性方程與線性范圍

Tab. 7   Regression equation and linear range of three components

 

2.3.2 精密度試驗(yàn)

精密稱(chēng)取S1樣品，按1.3方法平行制備6份樣品溶液，按1.2色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表8。由表8可見(jiàn)，綠原酸、哈巴苷及哈巴俄苷含量測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.88%、1.80%、1.90%，表明該方法的精密度良好。

表8   精密度試驗(yàn)結(jié)果

Tab. 8   Test results of precision

 

2.3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密稱(chēng)取S1樣品，按1.3方法制備樣品溶液，按1.2色譜條件，分別在第0、2、4、6、8、24 h進(jìn)樣，記錄色譜圖，數(shù)據(jù)見(jiàn)表9。由表9可見(jiàn)，綠原酸、哈巴苷及哈巴俄苷峰面積測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.46%、0.58%、0.62%，表明樣品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

表9   穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

Tab. 9   Results of stability test

 

2.3.4 樣品加標(biāo)回收試驗(yàn)

精密稱(chēng)取S1樣品，按照對(duì)照品量與樣品中待測(cè)成分量0.8∶1、1∶1、1.2∶1的比例加入綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷對(duì)照品各3份(n=9)，按1.3方法制備樣品溶液，按1.2色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定樣品中3種指標(biāo)成分的含量，計(jì)算加樣回收率，見(jiàn)表10。由表10可見(jiàn)綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷平均回收率分別為99.91%、99.84%、100.34%；測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.72%、0.93%、1.85%，表明該方法樣品加標(biāo)回收率良好。

表10   樣品加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果

Tab. 10   Results of test for sample spike recovery

 

3、 結(jié)語(yǔ)

 

按照中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)，計(jì)算15批四妙勇安湯基準(zhǔn)樣品指紋圖譜相似度均大于0.90，同時(shí)對(duì)11個(gè)共有峰進(jìn)行了來(lái)源歸屬，其中歸屬于金銀花、玄參、當(dāng)歸、甘草的色譜峰分別為5個(gè)、2個(gè)、2個(gè)、2個(gè)。通過(guò)對(duì)照品保留時(shí)間及紫外光譜吸收曲線對(duì)比，對(duì)其中8個(gè)色譜峰進(jìn)行了定性鑒別。15批四妙勇安湯基準(zhǔn)樣品中綠原酸、哈巴苷、哈巴俄苷平均含量分別為2.24%、0.59%、0.14%。所建立的四妙勇安湯基準(zhǔn)HPLC指紋圖譜能夠反映其所含化學(xué)成分的種類(lèi)和數(shù)量，實(shí)現(xiàn)了關(guān)鍵質(zhì)量屬性成分的表征。該指紋圖譜具有科學(xué)性、合理性及可行性，能為其質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)提供依據(jù)。

 

參考文獻(xiàn)

1 趙紅霞，于智敏，耿穎，等.四妙勇安湯方源探析［J］.中國(guó)中藥雜志，2020，45（5）：1 209.

    ZHAO Hongxia，YU Zhimin，GENG Ying，et al. Exploration on origin of Simiao Yong'an decoction［J］. China Journal of Chinese Materia Medica，2020，45（5）：1 209.

 

2 何錄文，張愛(ài)華，薛俊茹，等.四妙勇安湯的組方考證及臨床研究進(jìn)展［J］.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2019，47（5）：31.

    HE Luwen，ZHANG Aihua，Xue Junru，et al. Textual research on the composition and clinical research progress of Simiao Yong'an decoction［J］. Acta Chinese Medicine and Pharmacology，2019，47（5）：31

 

3 朱文卿，任漢書(shū)，鄭媛媛，等.金銀花的功能性成分及其生物活性研究進(jìn)展［J］.食品工業(yè)科技，2021，42（13）：412.

    ZHU Wenqing，REN Hanshu，ZHENG Yuanyuan，et al. Research progress in functional components and bioactivity of honeysuckle［J］. Science and Technology of Food Industry，2021，42（13）：412.

 

4 蔡祎晴，王晨璐，劉雪寒，等.四妙勇安湯在消渴病脫疽中的應(yīng)用探析［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2024，39（2）：618.

    CAI Yiqing，WANG Chenlu，LIU Xuehan，et al. Discussion on the application of Simiao Yong'an decoction in the treatment of consumptive thirst gangrene［J］. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy，2024，39（2）：618.

 

5 李慧宇，孫暉，張愛(ài)華，等.四妙勇安湯治療血栓閉塞性脈管炎化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展［J］.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)刊，2022，24（4）：393.

    LI Huiyu，SUN Hui，ZHANG Aihua，et al. Research progress on chemical constituents of Simiao Yongan decoction and its pharmacological effects in the treatment of thromboangiitis obliterans［J］. Chinese Journal of Medicinal Guide，2022，24（4）：393.

 

6 葉曄，劉駿逸，劉又文.脛骨橫向骨搬移聯(lián)合四妙勇安湯在糖尿病足中的應(yīng)用效果分析［J］.中國(guó)燒傷創(chuàng)瘍雜志，2021，33（4）：243.

    YE Ye，LIU Junyi，LIU Youwen. Analysis of the applicalion effect of tibial transverse transport combined with Simiao Yong'an decoction in treating diabetic foot［J］. The Chinese Journal of Burns Wounds & Surface Ulcers，2021，33（4）：243.

 

7 王繼雪，楊稀瑞，呂勃川，等.四妙勇安湯通過(guò)JAK/STAT信號(hào)通路治療下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥的機(jī)制研究［J］.海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2021，27（5）：373.

    WANG Jixue，YANG Xirui，LYU Bochuan，et al. Mechanism of Simiao Yong'an decoction in the treatment of arteriosclerosis obliterans of lower extremity through JAK/STAT signaling pathway［J］. Journal of Hainan Medical University，2021，27（5）：373.

 

8 陳馨濃，葛其卉，趙一璇，等.四妙勇安湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化巨噬細(xì)胞泡沫化的影響［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2023，43（6）：705.

    CHEN Xinnong，GE Qihui，ZHAO Yixuan，et al. Effect of Simiao Yongan decoction on macrophage foam cell formation in atherosclerosis［J］. Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine，2023，43（6）：705.

 

9 潘靜.四妙勇安湯治療濕熱型痛風(fēng)臨床觀察［J］.中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2023，21（2）：110.

    PAN Jing. Clinical observation on Simiao Yongan decoction in the treatment of dampness-heat gout［J］. Chinese Medicine Modern Distance Education of China，2023，21（2）：110.

 

10 唐定書(shū)，杜茂濤，龍淼.四妙勇安湯加味治療結(jié)節(jié)性紅斑32例臨床觀察［J］.四川中醫(yī)，2007，25（11）：92.

    TANG Dingshu，DU Maotao，LONG Miao. Clinical observation on 32 cases with nodular erythema by modified Simiao Yong'an decoction［J］. Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine，2007，25（11）：92.

 

11 張星，賴(lài)文靜，林夏，等. Box-Behnken設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化經(jīng)典名方四妙勇安湯煎煮工藝研究［J］.中草藥，2023，54（10）：3 109.

    ZHANG Xing，LAI Wenjing，LIN Xia，et al. Optimization of decocting process of Simiao Yong'an Decoction by Box-Behnken design-response surface methodology［J］. Chinese Traditional and Herbal Drugs，2023，54（10）：3 109.

 

12 李慧紅，李敏，關(guān)紅亞，等.反相高效液相色譜法測(cè)定加味四妙勇安湯中綠原酸和梓醇的含量［J］.中國(guó)醫(yī)院用藥評(píng)價(jià)與分析，2023，23（1）：36.

    LI Huihong，LI Min，GUAN Hongya，et al. Determination of chlorogenic acid and catalpol in modified Simiao Yong'an decoction by reversed phase high-performance liquid chromatography［J］. Evaluation and Analysis of Drug-Use in Hospitals of China，2023，23（1）：36.

 

13 孫克寒，楊會(huì)，王淑琪，等.基于UPLC-LTQ-Orbitrap-MS分析四妙勇安湯的化學(xué)成分［J］.中國(guó)中藥雜志，2022，47（10）：2 658.

    SUN Kehan，YANG Hui，WANG Shuqi，et al. Identification of chemical constituents in Simiao Yong'an Decoction based on UPLC-LTQ-Orbitrap-MS［J］. China Journal of Chinese Materia Medica，2022，47（10）：2 658.

 

14 張可興，劉樹(shù)民.四妙勇安湯現(xiàn)代研究進(jìn)展［J］.中國(guó)藥物依賴(lài)性雜志，2019，28（6）：415.

    ZHANG Kexing，LIU Shumin. Research progress of Simiao Yong'an decoction［J］. Chinese Journal of Drug Dependence，2019，28（6）：415.

 

15 陳麗新，梁偉.玄參化學(xué)成分及藥理作用的研究進(jìn)展［J］.特產(chǎn)研究，2023，45（1）：147.

    CHEN Lixin，LIANG Wei. Research progress on chemical constituents and pharmacological effects of radix scrophulariae［J］. Special Wild Economic Animal and Plant Research，2023，45（1）：147.