醫療器械無菌檢驗常見問題答疑匯總

問1、疑似長菌的培養基轉入新鮮培養基的操作環境是哪個房間？

答：由于疑似長菌是不確定供試品里真正有微生物存在，所以疑似長菌的培養基轉入新鮮培養基操作環境，仍然要求在百級條件下進行操作，以防環境不符合要求帶來污染，導致試驗結果不準確，以免造成誤判、錯判。

問2、供試品無菌檢查時做陽性對照試驗，陽性對照應在無菌室還是陽性對照室操作？

答：供試品無菌檢查時要求做陽性對照試驗，陽性對照管是分別需要兩個環境間才能完成。在無菌室是接種規定量供試品；在陽性室則是接種不大于100cfu對照菌懸液。

問3、培養基已經有質量報告，培養基還需要做無菌性和靈敏度檢查嗎？

答：培養基即使有質量報告，新購買培養基的無菌性和靈敏度檢查需要再驗收。因為培養基是微生物試驗的基礎，若培養基的無菌性或靈敏度不符合規定，則檢驗結果應無效。《中國藥典》2020版培養基質量管理要求應建立接收標準并進行符合性驗收，包括品名、批號、數量、生產單位、外觀性狀、處方和使用說明，有效期、貯藏條件、生產商提供的質量報告等。

問4、生孢用FTM計數培養18小時了，現在還未長，33攝氏度培養，是什么原因呢?

答：注：由于學員所提問的題目描述不夠完整，無法完成答題。那么，那就科普一下有關生孢梭菌生物學特性和培養注意事項吧：生孢梭菌是革蘭氏染色陽性菌，以周身鞭毛運動，為一群嚴格厭氧芽孢梭菌，電鏡下細胞大小(0.3～0.4)μm×(1.4～6.6)μm。呈梭狀芽孢桿菌，兩端鈍圓，單個或短鏈存在。在FTM固體培養基上菌落直徑2～6mm，中部突起，白色至淡黃色，邊緣假根狀，半透明，表面無光澤。

生化試驗：能分解蛋白質和糖類。發酵葡萄糖和麥芽糖，產丁酸和少量乙酸等。存在于土壤、傷口和腸道內。屬于亞硫酸鹽還原梭狀芽孢桿菌，過氧化氫酶陰性。

培養注意事項：在FTM固體培養基上操作時，因氧氣會對厭氧菌產生毒害作用，因此整個操作過程應在專門的無氧設備中進行。如在正常空氣中操作，從厭氧菌暴露在空氣中開始到放入厭氧環境中培養結束，整個過程應盡可能快速操作，一般不超過15分鐘，暴露時間越長，厭氧菌越容易死亡，不容易成功。需在厭氧條件下接種，培養溫度為30～35度，可采用厭氧罐、厭氧培養箱、厭氧產氣包等方式提供厭氧環境，除了確保氣體環境無氧之外，有些厭氧菌通常還需要5%-10%的二氧化碳、氫氣等氣體促進生長并提高厭氧菌對氧氣的耐受性，更容易培養成功。在裝量為50mlFTM流體培養基試管中（無需厭氧環境培養），生長的微生物分散成小米狀，注意菌數點計選擇在30～50之間，否則菌數太多無法計數。

問5、陽性間傳遞窗對室外是正壓嗎？

答：是的。