清潔驗(yàn)證是指有文件和記錄證明所批準(zhǔn)的清潔規(guī)程能有效清潔設(shè)備，使之符合藥品生產(chǎn)的要求。《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》(GMP)第一百四十三條規(guī)定，清潔方法應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，證實(shí)其清潔的效果，以有效防止污染和交叉污染。清潔驗(yàn)證應(yīng)當(dāng)綜合考慮設(shè)備使用情況、所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置以及相應(yīng)的取樣回收率、殘留物的性質(zhì)和限度、殘留物檢驗(yàn)方法的靈敏度等因素。

清潔驗(yàn)證針對(duì)的是生產(chǎn)設(shè)備的清潔工藝。本文結(jié)合平時(shí)工作實(shí)踐談?wù)剬?duì)清潔驗(yàn)證的體會(huì)。

清潔驗(yàn)證的依據(jù)和目的

清潔驗(yàn)證除按照GMP及《確認(rèn)與驗(yàn)證》附錄(以下簡(jiǎn)稱附錄)外，還可參照《ISPE清潔驗(yàn)證指南》《WHO清潔驗(yàn)證指南》《ASTM-HBEL指南》《FDA清潔工藝驗(yàn)證檢查指南》《制藥機(jī)械（設(shè)備）在位清洗、滅菌通用技術(shù)要求》等。

附錄第三十八條規(guī)定，為確認(rèn)與產(chǎn)品直接接觸設(shè)備的清潔操作規(guī)程的有效性，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行清潔驗(yàn)證。應(yīng)當(dāng)根據(jù)所涉及的物料，合理地確定活性物質(zhì)殘留、清潔劑和微生物污染的限度標(biāo)準(zhǔn)。清潔驗(yàn)證的目的是證明設(shè)備對(duì)產(chǎn)品、洗滌劑和微生物殘留物的清洗一致并達(dá)到可接受的水平，以防止可能的污染和交叉污染。

清潔驗(yàn)證的原則

證明該方法能夠去除污染物或?qū)⑽廴窘档椭量山邮艿乃健＜次锪蠚埩袅康颓也粫?huì)對(duì)人造成影響、所用的清潔劑被去除、限度是可達(dá)到的，并能通過(guò)檢驗(yàn)方法驗(yàn)證的。

只要引進(jìn)一種新產(chǎn)品，就應(yīng)該研究設(shè)備的使用和潛在污染物的特性，以評(píng)估其是否對(duì)清潔驗(yàn)證提出了挑戰(zhàn)性研究。

直接接觸物料的生產(chǎn)設(shè)備必須進(jìn)行清潔驗(yàn)證，同一產(chǎn)品批次間的清潔方法不需要進(jìn)行清潔驗(yàn)證，只需達(dá)到目視清潔即可。

清潔驗(yàn)證的內(nèi)容

附錄第四十一條規(guī)定，驗(yàn)證應(yīng)當(dāng)考慮清潔方法的自動(dòng)化程度。當(dāng)采用自動(dòng)化清潔方法時(shí)，應(yīng)當(dāng)對(duì)所用清潔設(shè)備設(shè)定的正常操作范圍進(jìn)行驗(yàn)證；當(dāng)使用人工清潔程序時(shí)，應(yīng)當(dāng)評(píng)估影響清潔效果的各種因素，如操作人員、清潔規(guī)程詳細(xì)程度（如淋洗時(shí)間等），對(duì)于人工操作而言，如果明確了可變因素，在清潔驗(yàn)證過(guò)程中應(yīng)當(dāng)考慮相應(yīng)的最差條件。

清洗與滅菌規(guī)程驗(yàn)證。通過(guò)驗(yàn)證，檢查清洗、滅菌規(guī)程能否達(dá)到徹底清潔設(shè)備和滅菌的目的。即清洗程序和參數(shù)的驗(yàn)證，滅菌程序和參數(shù)的驗(yàn)證，生產(chǎn)結(jié)束至開(kāi)始清洗時(shí)間的驗(yàn)證，清潔后設(shè)備存放時(shí)間及存儲(chǔ)條件的驗(yàn)證。

在清潔驗(yàn)證過(guò)程中對(duì)潛在的微生物污染進(jìn)行評(píng)價(jià)。如需要，還應(yīng)當(dāng)評(píng)價(jià)細(xì)菌內(nèi)毒素污染。

當(dāng)采用階段性生產(chǎn)組織方式時(shí)，應(yīng)當(dāng)綜合考慮階段性生產(chǎn)的最長(zhǎng)時(shí)間和最大批次數(shù)量，以作為清潔驗(yàn)證的評(píng)價(jià)依據(jù)。

當(dāng)采用最差條件產(chǎn)品的方法進(jìn)行清潔驗(yàn)證模式時(shí)，應(yīng)當(dāng)對(duì)最差條件產(chǎn)品的選擇依據(jù)進(jìn)行評(píng)價(jià)，每個(gè)使用的清潔方法都應(yīng)當(dāng)進(jìn)行最差條件驗(yàn)證。

清潔驗(yàn)證的程序

一是制定驗(yàn)證方案。GMP第一百四十七條規(guī)定，應(yīng)當(dāng)根據(jù)確認(rèn)或驗(yàn)證的對(duì)象制定確認(rèn)或驗(yàn)證方案，并經(jīng)審核、批準(zhǔn)。確認(rèn)或驗(yàn)證方案應(yīng)當(dāng)明確職責(zé)，并至少有質(zhì)量部、設(shè)備部、生產(chǎn)部等部門(mén)參與驗(yàn)證。

二是選取取樣部位。附錄第四十六條規(guī)定，清潔驗(yàn)證方案應(yīng)當(dāng)詳細(xì)描述取樣的位置、所選取的取樣位置的理由以及可接受標(biāo)準(zhǔn)。設(shè)備及部件的易拆卸程度和清洗的自動(dòng)化程度決定了設(shè)備清洗方式的同時(shí)亦決定了取樣部位。例如:各種難以清洗到的部位以及自動(dòng)清洗的排放口等位置。

三是決定取樣方法。設(shè)備的結(jié)構(gòu)在決定清洗方法(浸泡、淋洗、擦拭等)的同時(shí)亦決定了取樣方法，如最終淋洗液取樣或擦拭取樣。淋洗取樣適用于不宜接觸到的表面、不便拆卸的設(shè)備，尤其適用于設(shè)備表面平坦，管道多且長(zhǎng)的液體制劑和生產(chǎn)設(shè)備。擦拭取樣能對(duì)難清潔部位直接取樣，通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)牟潦萌軇⒉潦霉ぞ吆筒潦梅椒ǎ蓪⑶逑催^(guò)程中未溶解的、已干結(jié)的或溶解度很小的物質(zhì)擦拭下來(lái)，將擦拭好的棉簽放置于盛有純化水（或其他溶劑）的燒杯中，在超聲振蕩器上洗脫一定時(shí)間后，配制成一定濃度作為樣品溶液。

四是回收率試驗(yàn)。回收率試驗(yàn)不是直接在生產(chǎn)設(shè)備上來(lái)進(jìn)行， 而是將殘留物的標(biāo)準(zhǔn)溶液涂布在設(shè)備相同材質(zhì)的板材或管道中。使用規(guī)定的取樣工具和取樣溶劑，按照取樣要求的方法進(jìn)行擦拭或者淋洗取樣。樣品按照要求進(jìn)行處理以后，使用適合的檢測(cè)工具進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算出回收率。

五是確定殘留物限量標(biāo)準(zhǔn)（MACO）。殘留限度是由產(chǎn)品的殘留量和共用的生產(chǎn)設(shè)備共同決定的。附錄第三十八條規(guī)定，應(yīng)當(dāng)根據(jù)所涉及的物料，合理地確定活性物質(zhì)殘留、清潔劑和微生物污染的限度標(biāo)準(zhǔn)。FDA在其《清潔工藝驗(yàn)證檢查指南》中指出：“FDA不打算為清潔驗(yàn)證設(shè)立一個(gè)通用方法或限量標(biāo)準(zhǔn)，那是不切實(shí)際的，因?yàn)樵纤幓蛑苿┧幤笏迷O(shè)備和生產(chǎn)的產(chǎn)品千差萬(wàn)別，確立殘留物限量不僅必須對(duì)所有有關(guān)物質(zhì)有足夠的了解，而且所定的限度必須是現(xiàn)實(shí)的、能達(dá)到和可驗(yàn)證的。”如使用清潔劑，其去除方法及殘留量應(yīng)該進(jìn)行確認(rèn)，其產(chǎn)品成分應(yīng)該清晰、明確。微生物限度可作為清洗后消毒劑消毒效果的確認(rèn)，和清潔劑的要求一樣，當(dāng)使用的消毒劑會(huì)產(chǎn)生殘留時(shí)，也需要對(duì)消毒劑的殘留進(jìn)行去除和確認(rèn)。所以設(shè)備消毒使用的消毒劑最好選擇沒(méi)有殘留的，比如75%酒精。

六是限度標(biāo)準(zhǔn)確定原則。具體如下：根據(jù)分析方法客觀能達(dá)到的能力，如濃度限度為1/100000(10mg/kg)；依據(jù)生物活性數(shù)據(jù)，如最低日治療劑量（MTDD）的1/1000；以目檢為依據(jù)限度，如不得有可見(jiàn)的殘留物。特殊情況下的限度制定，考慮活性成分生成其他物質(zhì)或轉(zhuǎn)化成雜質(zhì)，活性物質(zhì)殘留限度標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)當(dāng)基于毒理試驗(yàn)數(shù)據(jù)或毒理學(xué)文獻(xiàn)資料的評(píng)估建立。

七是選擇檢測(cè)方法。殘留物限度應(yīng)按2020年版《中國(guó)藥典》規(guī)定的“UV法、HPLC法”及TOC法；微生物限度應(yīng)按2020年版《中國(guó)藥典》規(guī)定的“微生物限度檢查法”檢查；細(xì)菌內(nèi)毒素應(yīng)按2020年版《中國(guó)藥典》規(guī)定的“細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法”檢查。

八是優(yōu)選TOC法。TOC法與HPLC法和UV法不同，屬于非專屬性方法，是檢測(cè)所有含碳化合物，包括活性組分、輔料和清潔劑的理想方法。對(duì)于TOC法來(lái)說(shuō)，無(wú)論其來(lái)源是產(chǎn)品、清潔劑、化學(xué)品、溶劑，還是副產(chǎn)物及微生物污染，無(wú)需設(shè)置其他參數(shù)，靈敏度高（1ppb C），已經(jīng)逐漸被制藥行業(yè)所接受，為制藥企業(yè)節(jié)省了時(shí)間和人力成本。測(cè)定結(jié)果的單位用ppb (ug碳/L)和ppm (mg碳/L)來(lái)表示。

九是確定設(shè)備清洗形式。如人工清洗、CIP還是混合清洗，清洗方式方法、清潔劑、清潔工藝按照《制藥機(jī)械（設(shè)備）在位清洗、滅菌通用技術(shù)要求》執(zhí)行。