您當(dāng)前的位置：檢測(cè)資訊 > 科研開(kāi)發(fā)
嘉峪檢測(cè)網(wǎng) 2021-04-03 20:24
在制藥企業(yè)中，同一設(shè)備可能會(huì)用于多種產(chǎn)品的生產(chǎn)，在藥品生產(chǎn)結(jié)束后，對(duì)生產(chǎn)用到的相關(guān)設(shè)備進(jìn)行有效的清潔，是防止藥品污染和交叉污染的必要手段。
在GMP條款中一直強(qiáng)調(diào)關(guān)于清潔、防止交叉污染的的條款，早在1963年美國(guó)頒布GMP條例（133.4）中就寫(xiě)到“生產(chǎn)設(shè)備必須保持潔凈有序的狀態(tài)”。為了達(dá)到相關(guān)法規(guī)規(guī)范的要求，藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)保證產(chǎn)品的殘留可以通過(guò)一定的清潔程序從設(shè)備表面清除，并提供書(shū)面證據(jù)證明各種污染和交叉污染已被有效防止。
設(shè)備的清潔程序取決于殘留物的性質(zhì)、設(shè)備的結(jié)構(gòu)、材質(zhì)和清洗的方法，對(duì)于確定的設(shè)備和產(chǎn)品，清潔效果取決于清洗的方法，書(shū)面的、確定的清潔方法即所謂的清潔規(guī)程。清潔工藝的運(yùn)行參數(shù)包括清潔劑種類、濃度、接觸時(shí)間、溫度等各種參數(shù)。
在制藥工業(yè)中，清潔的概念是指設(shè)備中各種殘留物（包括微生物及其代謝產(chǎn)物）的總量低至不影響下批產(chǎn)品的規(guī)定的療效、質(zhì)量和安全性的狀態(tài)。通過(guò)有效的清洗，可將上批生產(chǎn)殘留在生產(chǎn)設(shè)備中的物質(zhì)減少到不會(huì)影響下批產(chǎn)品的療效、質(zhì)量和安全性的程度。清潔驗(yàn)證即對(duì)清潔規(guī)程的效力進(jìn)行確認(rèn)，通過(guò)科學(xué)的方法采集足夠的證據(jù)，以證實(shí)按規(guī)定的方法清潔后的設(shè)備，能始終如一的達(dá)到預(yù)定的清潔標(biāo)準(zhǔn)。
通常的做法是將清潔驗(yàn)證分為四個(gè)階段，方法開(kāi)發(fā)階段、方案準(zhǔn)備階段、方案實(shí)施階段、驗(yàn)證狀態(tài)維護(hù)階段，圖1將各個(gè)階段進(jìn)行流程化，以下分別對(duì)其進(jìn)行闡述。
根據(jù)產(chǎn)品性質(zhì)、設(shè)備特點(diǎn)、生產(chǎn)工藝及所使用的原輔料等因素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室模擬，擬定清潔方法并制定清潔規(guī)程，對(duì)清潔人員進(jìn)行操作培訓(xùn)。
首先應(yīng)該準(zhǔn)備清潔驗(yàn)證計(jì)劃，列出清潔驗(yàn)證的設(shè)計(jì)與策略，對(duì)生產(chǎn)設(shè)備進(jìn)行詳細(xì)考察，確定有代表性的，難清潔的部位作為取樣點(diǎn)；計(jì)算設(shè)備內(nèi)表面積，根據(jù)產(chǎn)品的相關(guān)性質(zhì)選定某種物質(zhì)作為參照物質(zhì)，確定清潔后允許的最大殘留量為合格標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證中通過(guò)檢驗(yàn)其含量確定設(shè)備清潔的程度，必要時(shí)還要考察清潔劑的殘留量；根據(jù)驗(yàn)證共同要
求制訂并批準(zhǔn)驗(yàn)證方案，開(kāi)發(fā)驗(yàn)證有關(guān)的取樣方法和檢驗(yàn)方法，以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，在驗(yàn)證開(kāi)始前需要對(duì)有關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn)。
按照批準(zhǔn)的驗(yàn)證方案開(kāi)展試驗(yàn)獲取數(shù)據(jù)，評(píng)價(jià)結(jié)果得出結(jié)論。如驗(yàn)證的結(jié)果表明清潔程序無(wú)法確保設(shè)備清潔達(dá)到預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，則需要查找原因、修改程序并重新驗(yàn)證，直至結(jié)果合格。
已經(jīng)通過(guò)驗(yàn)證的清潔方法隨即進(jìn)行維護(hù)階段，對(duì)已投入運(yùn)行的清潔方法進(jìn)行監(jiān)控，對(duì)清潔方法的變更實(shí)行變更管理，根據(jù)監(jiān)測(cè)的結(jié)果來(lái)看各種生產(chǎn)活動(dòng)中，所采用的清潔方法能達(dá)到的實(shí)際效果，以確定再驗(yàn)證的周期進(jìn)行再驗(yàn)證。
圖1 清潔驗(yàn)證四個(gè)階段
可將清洗過(guò)程分為物理方法與化學(xué)方法，物理方法包括沖淋、擦洗、真空除塵，使用物理清洗的方法須考慮殘留物的溶解性、批量、及其在設(shè)備表面的粘附程度。化學(xué)清洗機(jī)制包括溶解、乳化、濕潤(rùn)、鰲合、分散、水解、氧化作用等。
殘留物與清洗液接觸、被潤(rùn)濕、脫離設(shè)備表面等共同的過(guò)程，在此以最普遍的清洗機(jī)制—溶解為例進(jìn)行詳細(xì)討論。
以溶解為機(jī)制的清洗過(guò)程主要是通過(guò)溶劑對(duì)殘留物的溶解作用以及流動(dòng)的清洗液對(duì)殘留物的沖擊而使附著在設(shè)備表面的殘留物進(jìn)入溶劑中。微觀上看溶解的速度取決于單位時(shí)間內(nèi)由溶質(zhì)表面進(jìn)入溶液的溶質(zhì)分子數(shù)與從溶液中回到溶質(zhì)表面的分子數(shù)之差。一旦差值為零，表面溶解過(guò)程達(dá)到動(dòng)態(tài)平穩(wěn)，此溶液即為飽和溶液。溶解過(guò)程中從溶質(zhì)表面很快形成一層薄薄的飽和溶液，飽和溶液中的溶質(zhì)分子不斷向溶液深處擴(kuò)散，形成從溶質(zhì)表面到溶液深處的一個(gè)遞減的濃度梯度。如果飽和層的溶質(zhì)分子不能迅速進(jìn)入非飽和的溶液深處，就會(huì)降低溶解的速度。因此即使是溶解度很大的物質(zhì)，如蔗糖的塊狀結(jié)晶（俗稱冰糖）在無(wú)攪拌的靜止?fàn)顟B(tài)下的溶解速度也非常緩慢，提高溶解速度的方法是提高溶液流動(dòng)速度。
在清洗過(guò)程中，必須使清潔劑在的運(yùn)動(dòng)中與殘留物接觸。清潔劑與殘留物的相對(duì)運(yùn)動(dòng)從宏觀上可分解為垂直方向和水平方向的運(yùn)動(dòng)。相對(duì)運(yùn)動(dòng)可將已溶解的物質(zhì)迅速帶離溶質(zhì)表面，而水平方向的相對(duì)運(yùn)動(dòng)根據(jù)流體力學(xué)的基本原理，可分為層流和湍流兩類情況
圖2 流體在層流及湍流中的流速
(a)層流狀態(tài)；(b)湍流狀態(tài)
W0—最大流速；Wm—平均流速
層流指流體在導(dǎo)管中流動(dòng)時(shí)，所有質(zhì)點(diǎn)均沿著與管軸平行的方向流動(dòng)。此時(shí)流體的速度在管道軸心處的速度最大，自軸心至管壁速度逐漸減小至等于零。由此可以推斷，如果清潔劑在待清洗設(shè)備中形成了層流，會(huì)很迅速地在殘留物表面形成穩(wěn)定的飽和溶液層，殘留物的溶解速度會(huì)急劇下降，這與靜止?fàn)顟B(tài)下的溶解過(guò)程非常相似，從而清潔效率也隨之明顯下降。因此在清潔中應(yīng)避免層流的產(chǎn)生。流體以湍流形式流動(dòng)時(shí)，雖然宏觀上流體沿管道向一個(gè)方向流動(dòng)，但從微觀上看各質(zhì)點(diǎn)的運(yùn)動(dòng)速度在大小和方向上都隨時(shí)發(fā)生變化。總有部分質(zhì)點(diǎn)的運(yùn)動(dòng)方向相對(duì)垂直于管軸或管壁。這樣殘留物表面也就不會(huì)形成穩(wěn)定的飽和層，溶解的速度就大大提高了，清潔的效率也隨之提高。因此在清洗過(guò)程中，必須保證清潔液以湍流形式流動(dòng)，流體以何種形式流動(dòng)取決于流體雷諾系數(shù)Re的大小。
Re=dωρ/μ
式中，d為管道直徑；ω為流速；ρ為流體密度；μ為黏度。
當(dāng)Re＜2300時(shí)，為層流；Re＞10000時(shí)，為湍流；2300＜Re＜10000時(shí)，為層流和湍流的過(guò)渡階段。Re越大，表面湍流越劇烈，即質(zhì)點(diǎn)運(yùn)動(dòng)方向和速率的變化越大，殘留物溶解的速度越快。
在已確定清潔劑和淋洗液的情況下Re正比于管徑與流速的乘積；
Re∝dω
比較普遍的在線清洗過(guò)程都有清潔劑在泵的驅(qū)動(dòng)下在設(shè)備與管道循環(huán)的步驟。對(duì)已確定的系統(tǒng)，清潔流量V是固定的。根據(jù)液體的不可壓縮特性，在沒(méi)有平行管道和分叉的情況下，不管管徑如何變化，管內(nèi)各點(diǎn)的流量必然相同。
因V=ωS=ωπR2=π/4×ωd2，其中S為管道截面積，
則ω=4/π×V/d2
則Re∝V/d，如V為定值，
則Re∝1/d
由此可知，在系統(tǒng)中，管徑較大的部位或管徑由小變大的部位Re值較小，相對(duì)容易發(fā)生層流，較難被清潔。
對(duì)有多根平行管道尤其是管徑不同的系統(tǒng)，因各管道的流速變化、流量分配各不相同，通常將這些部位列為較難清潔的部位。
此外，切不可忽視那些似乎不直接接觸產(chǎn)品的部位，如復(fù)方氨基酸注射液配制系統(tǒng)一般需安裝防爆安全閥（膜）的歧管、排氣管、充氮管、抽真空管等。這些管道由于投料時(shí)物料微粒的飛揚(yáng)，或因?yàn)榕渲乒迌?nèi)霧化的小液滴隨充氮、抽真空等工藝過(guò)程四處飄散而可能被污染。有時(shí)這種污染很輕微，但如果清潔程序未能考慮這些管路，日積月累可能產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。
綜合而言，凡是死角、清潔劑不易接觸的部位如帶密封墊圈的管道連接處，壓力、流速迅速變化的部位如有歧管或岔管處、管徑由小變大處、容易吸附殘留物的部位如內(nèi)表面不光滑處等，都應(yīng)視為最難清潔部位。
乳化和化學(xué)反應(yīng)的機(jī)制在微觀上與溶解過(guò)程相似，都有清潔劑分子作用于殘留物表面，致其表面的分子脫離或反應(yīng)生成其他物質(zhì)進(jìn)而溶解，因此宏觀上不容易形成湍流的部位也是難清潔的部位。
按清洗位置對(duì)清洗方式分類，可將清洗方式分為在線清洗與離線清洗兩類。
按自動(dòng)/手動(dòng)清洗方式分類，可將清洗方式分為自動(dòng)清潔、手動(dòng)清潔兩類。
手動(dòng)清洗為了確保清潔程序的重現(xiàn)性，需要建立文件進(jìn)行詳細(xì)的過(guò)程描述，操作人員的培訓(xùn)、充分的監(jiān)控、清晰的書(shū)面清潔程序有助于確保手動(dòng)清潔的一致性。
自動(dòng)清洗通常不涉及人員介入，清洗系統(tǒng)通常對(duì)不同的清洗行程進(jìn)行編程，采用自動(dòng)清潔方式可對(duì)自動(dòng)清洗的行程和參數(shù)進(jìn)行一致、穩(wěn)定的監(jiān)控。
大型設(shè)備的清洗可以在設(shè)備的安裝位置進(jìn)行，一般與其用于生產(chǎn)時(shí)的布局非常相似，在線清潔可以是自動(dòng)或手動(dòng)清潔工藝。
在線清潔系統(tǒng)利用噴灑裝置將清潔劑覆蓋工藝設(shè)備表面，并通過(guò)物理沖擊除去殘留物，噴淋球可以是靜止的或運(yùn)動(dòng)的（如旋轉(zhuǎn)、擺動(dòng)），這些系統(tǒng)通常被用來(lái)清洗大件的設(shè)備，如混合罐、流化床、反應(yīng)器等。
溶劑回流清洗法，在反應(yīng)器中煮沸一些揮發(fā)性溶劑，當(dāng)溶劑的蒸汽在設(shè)備表面冷凝，可以溶解表面上的殘留物。
安慰劑清潔法這種方法需要選用一種不會(huì)對(duì)下批產(chǎn)品質(zhì)量造成不利影響的安慰劑，這種方法的原理是當(dāng)安慰劑在設(shè)備中流動(dòng)時(shí)，會(huì)將上批產(chǎn)品的藥物殘留和工藝殘留清除，這種方法的優(yōu)點(diǎn)是安慰劑在設(shè)備中的加工過(guò)程與實(shí)際生產(chǎn)的產(chǎn)品一樣，因此安慰劑與下批產(chǎn)品以同樣的接觸方式接觸表面，缺點(diǎn)是成本高，而且難以證明該清潔工藝的有效性。
對(duì)于安裝后較難清洗的設(shè)備小部件及便攜式工藝設(shè)備，通常拆卸后轉(zhuǎn)移到另一個(gè)指定的清洗間進(jìn)行自動(dòng)或手動(dòng)清洗，手工操作是離線清洗中不可缺的，一般需要在文件中詳細(xì)描述，并進(jìn)行相應(yīng)的培訓(xùn)。
不管采用何種清潔方式，都必須制定一份詳細(xì)的書(shū)面規(guī)程，規(guī)定每一臺(tái)設(shè)備的清洗程序，從而保證每個(gè)操作人員都能以相同的方式實(shí)施清洗，并獲得相同的清潔效果。這是進(jìn)行清潔驗(yàn)證的前提。
從保證清潔重現(xiàn)性及驗(yàn)證結(jié)果的可靠性出發(fā)，清潔規(guī)程至少應(yīng)對(duì)以下方面做出規(guī)定：
⑴ 清潔開(kāi)始前對(duì)設(shè)備必要的拆卸要求和清潔完成后的裝配要求；
⑵ 所用清潔劑的名稱和主要成分；
⑶ 清潔劑的配制方法；
⑷ 清潔劑接觸表面的時(shí)間、溫度、流速等關(guān)鍵參數(shù)；
⑸ 淋洗要求；
⑹ 生產(chǎn)結(jié)束至開(kāi)始清潔的最長(zhǎng)時(shí)間；
⑺ 連續(xù)生產(chǎn)的最長(zhǎng)時(shí)間；
⑻ 已清潔設(shè)備用于下次生產(chǎn)前的最長(zhǎng)存放時(shí)間。
清潔劑應(yīng)能有效溶解殘留物，不腐蝕設(shè)備，且本身易被清除，隨著環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)的提高，還應(yīng)要求清潔劑對(duì)環(huán)境盡量無(wú)害或可被無(wú)害化處理，滿足以上要求并且應(yīng)盡量廉價(jià)。根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于水溶性殘留物，水是首選的清潔劑。
從驗(yàn)證的角度，不同批號(hào)的清潔劑應(yīng)當(dāng)有足夠的質(zhì)量穩(wěn)定性。因此不宜提倡采用一般家用清潔劑，因其成分復(fù)雜、生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)微生物污染不加控制、質(zhì)量波動(dòng)較大且供應(yīng)商不公布詳細(xì)組成。使用這類清潔劑后，還會(huì)帶來(lái)另一個(gè)問(wèn)題，即如何證明清潔劑的殘留達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)。
應(yīng)盡量選擇簡(jiǎn)單、成分確切的清潔劑。根據(jù)殘留物和設(shè)備的性質(zhì)，企業(yè)還可自行配制成分簡(jiǎn)單效果確切的清潔劑，如一定濃度的酸、堿溶液等。企業(yè)應(yīng)有足夠靈敏的方法檢測(cè)清潔劑的殘留情況，并有能力回收或?qū)U液進(jìn)行無(wú)害化處理。
一般來(lái)說(shuō)，生產(chǎn)后清潔用到的清潔劑通常分為四類。
水通常用于藥品前淋洗、淋洗后和使用稀釋液的配制，但是對(duì)于水容易清洗的殘留物，水也可以直接作為清洗劑使用。清洗用的水包括自來(lái)水、軟化水、純化水、注射用水等，通常情況下，用于最終淋洗的水質(zhì)至少與藥品生產(chǎn)用水相當(dāng)，清潔用水的質(zhì)量還應(yīng)符合適用其用途的化學(xué)、微生物與內(nèi)毒素限度要求。
有機(jī)溶劑一般用于原料藥合成工藝中的清潔，溶劑的選擇基于殘留物在溶劑中的溶解性，與水不同之處在于，有機(jī)溶劑可以采用溶劑回流清洗法。但其存在安全環(huán)保等方面的影響，所以一般工廠會(huì)首選水作為清潔劑。
酸堿溶液的強(qiáng)酸堿性會(huì)促進(jìn)水解，對(duì)大分子有機(jī)物進(jìn)行水解破壞，使殘留物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)化易于清除。酸堿清潔劑有組分單一、價(jià)格低廉同時(shí)容易清除等優(yōu)點(diǎn)，但是市售清潔劑中，如氫氧化鈉，對(duì)于強(qiáng)烈吸附或干燥的殘留的清潔效果有限，并且還有一定的吸潮性和污物懸浮作用。
配方清潔劑含多種成分，利用不同的清洗機(jī)制，因此具有更廣泛有效的清潔作用，除了具有市售堿的堿性作用和水解作用外，配方洗滌劑可能提供更好的潤(rùn)濕和污物滲透性，乳化等相互作用。
應(yīng)在設(shè)備的清潔規(guī)程中規(guī)定一臺(tái)設(shè)備需要拆卸的程度，大多數(shù)設(shè)備，如大容量注射劑的灌裝機(jī)、固體制劑一步制粒機(jī)等在清潔前需要預(yù)先拆卸到一定程度，小針的灌裝機(jī)則幾乎可以說(shuō)是完全拆卸。應(yīng)有書(shū)面的、內(nèi)容清晰完整的拆卸指導(dǎo)，最好附有示意圖，以使操作人員容易理解。
預(yù)洗的目的是除去大量的（可見(jiàn)的）殘留產(chǎn)品或原料，為此后的清潔創(chuàng)造一個(gè)基本一致的起始條件。
由于清潔規(guī)程往往不是專用的，它需要適用于生產(chǎn)多種產(chǎn)品和濃度或劑量規(guī)格的通用設(shè)備，以簡(jiǎn)化管理及操作，因此需要進(jìn)行預(yù)洗。預(yù)洗的作用是確立一個(gè)相對(duì)一致的起始點(diǎn)，以提高隨后各步操作的重現(xiàn)性。
預(yù)洗所用水質(zhì)不必苛求，通常飲用水或經(jīng)一定程序凈化（如過(guò)濾）的飲用水已經(jīng)足夠，使用水管或手持高壓噴槍以新鮮的流水沖洗設(shè)備以除去殘留物。對(duì)于殘留物物理性質(zhì)差異較大的情況，有的企業(yè)希望制定一份產(chǎn)品與預(yù)洗參數(shù)如水溫、壓力、時(shí)間等一一對(duì)應(yīng)的對(duì)照表，由操作人員按實(shí)際產(chǎn)品選擇參數(shù)。這種方法在實(shí)施時(shí)并不十分理想。由于操作人員的素質(zhì)及習(xí)慣，從一大堆方案中去選擇應(yīng)當(dāng)采用的方案反而容易造成差錯(cuò)，比較簡(jiǎn)單而切合實(shí)際的方法是讓操作者檢查是否還有可見(jiàn)的殘留物，讓他們持續(xù)噴洗設(shè)備直至可見(jiàn)殘留物消失，以此作為預(yù)洗的終點(diǎn)。因此操作者判斷預(yù)洗完成與否的標(biāo)準(zhǔn)必須盡可能的明確，特別是應(yīng)檢查的部位。例如可在規(guī)程中作出這樣的規(guī)定，用熱的飲用水持續(xù)噴淋機(jī)器的所有表面，使所有可見(jiàn)的殘留顆粒消失，特別注意檢查不易清潔的部位。
清洗程序的操作參數(shù)（如清潔劑種類、濃度、接觸時(shí)間、殘留物的特性、污染條件），還包括清洗設(shè)備的特性，自動(dòng)化的清洗路徑，清潔環(huán)境的順序，每步的流速，在投入使用前都需要確認(rèn)。清潔程序每一步均包含4個(gè)參數(shù)，分別是時(shí)間、動(dòng)作、濃度及溫度。這四個(gè)參數(shù)是互相聯(lián)系的，且會(huì)對(duì)清潔周期中的每一階段的成功存在直接關(guān)系，比如通過(guò)對(duì)清潔劑的加熱以提高去污能力。作為清潔參數(shù)的變量需要確定，清潔參數(shù)的可接受范圍作為清潔程序開(kāi)發(fā)工作的一部分進(jìn)行建立。
被定義為清洗步驟的時(shí)間的長(zhǎng)短，在一個(gè)清洗步驟中，可以采用兩種方式來(lái)進(jìn)行定義和測(cè)量：直接法與間接法，直接法時(shí)可使用作為控制系統(tǒng)中的計(jì)時(shí)器測(cè)量時(shí)間。也可以通過(guò)間接法測(cè)量時(shí)間，例如在淋洗時(shí)，有時(shí)通過(guò)測(cè)量體積來(lái)代替測(cè)量時(shí)間，因?yàn)橥ㄟ^(guò)體積和流速可以確定時(shí)間。對(duì)于最終淋洗水，普遍會(huì)增加測(cè)試要求，如電導(dǎo)率。
被定義為清潔劑的流體動(dòng)作。如浸泡，洗滌，沖擊，湍流。攪動(dòng)能夠提高清潔劑的有效性和清潔工藝的效果。典型的手工清洗包括浸泡和擦洗，以達(dá)到清潔效果。自動(dòng)清潔程序通常采用沖擊流或湍流作為清潔動(dòng)作。清潔程序需明確清潔動(dòng)作。流速是清潔劑和清洗水在流經(jīng)設(shè)備時(shí)的重要參數(shù)，應(yīng)該在清潔工藝的每個(gè)步驟中規(guī)定流速并進(jìn)行確認(rèn)。噴淋裝備要具有最大和最小流量的要求，管道的淋洗流速要確保形成湍流。
直接影響清潔程序是否能夠成功，化學(xué)清洗劑可以是濃縮型的稀釋后使用。清潔效果與清潔劑的濃度有關(guān)系，清潔劑使用太少可能達(dá)不到清潔效果，使用太多來(lái)自清潔劑的殘留可能難以去除，并需要使用大量的淋洗。通常，對(duì)于堿性清潔劑達(dá)到最佳清潔效果的方法可以是在攪拌狀態(tài)下提高溫度或延長(zhǎng)湍流淋洗周期的時(shí)間。
化學(xué)清洗劑在采購(gòu)和處置方面，均會(huì)產(chǎn)生不小的資金投入，因此確定正確的濃度以保證清潔效果是極為重要的。清潔劑添加的自動(dòng)系統(tǒng)，必須具有可重現(xiàn)性。不管采用何種添加方式，確認(rèn)清潔劑濃度有助于證實(shí)該方式的一致性。對(duì)于自動(dòng)清潔程序，電導(dǎo)率測(cè)試是最容易測(cè)試強(qiáng)堿或強(qiáng)酸清潔劑濃度的方式。
應(yīng)能夠通過(guò)清潔劑的化學(xué)組成在線測(cè)試出清潔劑濃度的異常變化，例如一些清潔劑添加系統(tǒng)以體積進(jìn)行控制并采用電導(dǎo)率測(cè)試作為確認(rèn)方法。當(dāng)電導(dǎo)率超出預(yù)設(shè)值時(shí)，就會(huì)報(bào)警，允許的范圍需來(lái)自清潔程序開(kāi)發(fā)的數(shù)據(jù)。
清潔程序中不同步驟的最佳溫度范圍會(huì)有所不同，初始清潔劑典型的溫度為室溫，目的是最大程度的去除變性或降解產(chǎn)物和最大程度的稀釋產(chǎn)物。清潔劑經(jīng)過(guò)加熱以提高效果，最終清洗水可通過(guò)高溫以加快干燥速率和提高任何工藝及清潔劑殘留的溶解性。
所有驗(yàn)證活動(dòng)應(yīng)有計(jì)劃，清潔驗(yàn)證計(jì)劃的要求應(yīng)在主計(jì)劃或類似文件中規(guī)定和記錄，藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證主計(jì)劃的內(nèi)容原則上可能是相同。計(jì)劃應(yīng)描述職責(zé)、清潔驗(yàn)證計(jì)劃和清潔驗(yàn)證的實(shí)施情況。最好有一個(gè)詳細(xì)的清潔驗(yàn)證主計(jì)劃，該計(jì)劃在整個(gè)廠區(qū)驗(yàn)證主計(jì)劃中有所描述，清潔驗(yàn)證主計(jì)劃可能包含所有內(nèi)容。還有一種方法是準(zhǔn)備一個(gè)概述版的清潔驗(yàn)證主計(jì)劃，再準(zhǔn)備一個(gè)清潔驗(yàn)證執(zhí)行或項(xiàng)目計(jì)劃，詳細(xì)說(shuō)明清潔驗(yàn)證的要求。應(yīng)當(dāng)定期審核和更新這些實(shí)際存在的文件，定期編寫(xiě)計(jì)劃報(bào)告，總結(jié)計(jì)劃執(zhí)行過(guò)程中的重要活動(dòng)。
計(jì)劃應(yīng)說(shuō)明清潔驗(yàn)證程序的每個(gè)重要方面，主計(jì)劃的構(gòu)成及所需提供的適當(dāng)細(xì)節(jié)取決于特定設(shè)施的實(shí)際操作，主計(jì)劃的構(gòu)成包括但不限于以下主題。
清潔驗(yàn)證主計(jì)劃有助于公司管理層了解驗(yàn)證活動(dòng)所涉及時(shí)間、人員的安排，以及進(jìn)行相關(guān)確認(rèn)與驗(yàn)證活動(dòng)的必要性，有助于驗(yàn)證團(tuán)隊(duì)成員了解各自的職責(zé)，此外讓參與這個(gè)項(xiàng)目的人員以及檢查人員能夠從全局了解該工廠所使用的驗(yàn)證方法和所有的驗(yàn)證活動(dòng)。
清潔驗(yàn)證主計(jì)劃包括驗(yàn)證的一般原則，可接受標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算，分組（矩陣）和最差條件產(chǎn)品評(píng)估等方面的規(guī)定。
對(duì)驗(yàn)證過(guò)程中各部門的職責(zé)進(jìn)行詳細(xì)規(guī)定與描述。
通常情況下一條生產(chǎn)線會(huì)同時(shí)生產(chǎn)多個(gè)品種，每個(gè)品種由活性成分和輔料組成，在清潔驗(yàn)證中不必為所有殘留物制定限度標(biāo)準(zhǔn)并一一檢測(cè)，因?yàn)檫@是不切實(shí)際且沒(méi)有必要的。在一定意義上，清潔的過(guò)程是個(gè)溶解的過(guò)程，因此通常的做法是從各組分中確定最難清潔的物質(zhì)，作為目標(biāo)化合物即驗(yàn)證對(duì)象，目標(biāo)化合物一般要考慮其特性，如：
溶解性風(fēng)險(xiǎn)
毒性、藥理
難于清洗，如對(duì)設(shè)備表面材質(zhì)有一定附著力
配方中包含難以清洗的油脂、色料或矯味劑的產(chǎn)品（顏色、香味與味道）
生產(chǎn)量高的品種（生產(chǎn)頻率高的產(chǎn)品相應(yīng)的清洗頻率高）
清洗過(guò)程如果使用清洗劑，則其殘留物也應(yīng)視為標(biāo)記物
同一工序使用到的設(shè)備可能會(huì)有很多種，對(duì)于同一類型的設(shè)備，可以考慮對(duì)其分組并同時(shí)進(jìn)行驗(yàn)證。對(duì)于設(shè)備分組，以形式和功能為標(biāo)準(zhǔn)定義分組原則，對(duì)設(shè)計(jì)和功能相似，大小不同的設(shè)備可以分為一組。
化學(xué)殘留可接受限度
清潔劑殘留的確定
微生物水平的確定
如何確定殘留物限度是一個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的問(wèn)題，企業(yè)應(yīng)當(dāng)根據(jù)其生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實(shí)際情況，制定科學(xué)合理的，能實(shí)現(xiàn)并能通過(guò)適當(dāng)?shù)姆椒z驗(yàn)的限度標(biāo)準(zhǔn)。目前企業(yè)普遍接受的限度標(biāo)準(zhǔn)基于以下原則：以目檢為依據(jù)的限度；化學(xué)殘留可接受限度；微生物殘留可接受限度。
1.5.1. 以目檢為依據(jù)的限度
目檢要求不得有可見(jiàn)殘留物，在每次清洗完后都要求進(jìn)行檢查并對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行記錄，此項(xiàng)檢查應(yīng)該作為清潔驗(yàn)證接受限度的第一個(gè)接受標(biāo)準(zhǔn)。
1.5.2. 化學(xué)殘留可接受限度
計(jì)算化學(xué)殘留可接受限度有兩種方法，生物活性限度（最低日劑量的1/1000）和濃度限度(10ppm)。在考慮可接受殘留限度時(shí)，綜合考慮兩種方法，選擇最嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)作為清潔驗(yàn)證最終標(biāo)準(zhǔn)。
① 采用健康基礎(chǔ)數(shù)據(jù)的可接受標(biāo)準(zhǔn)
在可以獲得可接受日暴露水平（ADE）或允許日暴露量（PDE）值時(shí)，最大允許殘留（MACO）應(yīng)基于ADE計(jì)算。MACO計(jì)算的原則是基于ADE/PDE值，計(jì)算允許從上一個(gè)產(chǎn)品帶入下一個(gè)產(chǎn)品中的殘留量。
根據(jù)以下公司計(jì)算ADE值或PDE值，將結(jié)果用于MACO值的計(jì)算：
ADE=NOAEL×BW/（UFc×MF×PK）
根據(jù)以下公式從ADE值計(jì)算MACO值：
MACO=ADEprevious×MBSnext/TDDnext
ADE----可接受日暴露水平
MACO----允許最大殘留：從上一產(chǎn)品帶入下一產(chǎn)品的最大可接受量
BW----平均成人體重，UFc----組分不確定因子：反映單個(gè)變量之間、不同品種差異、亞急性折算為急性外推、最低可見(jiàn)損害作用水平到無(wú)可見(jiàn)損害作用水平的推斷，數(shù)據(jù)完整性等補(bǔ)償因素的綜合系數(shù)
MF----修正因子：用于表達(dá)未被其它因子覆蓋的不確定因素
MBSnext----下一產(chǎn)品的最小批量
TDDnext----下一產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)治療日服用劑量
② 生物活性的可接受限度：最低日治療劑量的1/1000
根據(jù)藥物的生物學(xué)活性數(shù)據(jù)---最低日治療劑量（MTDD）確定殘留物的限度是制藥企業(yè)普遍采用的的方法。一般取最低日治療劑量1/1000為殘留物限度，可以認(rèn)為即使存在很大個(gè)體差異，該殘留量也不會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生藥理反應(yīng)。因此高活性、敏感性的藥物宜使用本法確定殘留物限度。
一般表面計(jì)算公式如下：
L1/1000=MTDa/1000×Nb/MDDb×Sb
MTDa----清洗前產(chǎn)品最小日給藥劑量中的活性成分含量
Nb----清洗后產(chǎn)品的批量
MDDb----清洗后產(chǎn)品的最大日給藥劑量的活性成分含量
Sb----清洗后產(chǎn)品活性成分含量的百分比（%，W/W）
③ 濃度限度：十萬(wàn)分之一（10ppm）
在下一個(gè)產(chǎn)品中的殘留物數(shù)量級(jí)別應(yīng)不超過(guò)十萬(wàn)分之一（10ppm），該限度依據(jù)分析方法客觀能達(dá)到的能力而制定的，從控制微生物污染及熱原污染角度上看，也比較安全。一般除非是高活性、高敏感性的藥品，該限度的安全性是足夠的。
從殘留物濃度限度可以推導(dǎo)出設(shè)備內(nèi)表面的單位面積殘留物濃度（表面殘留物限度），假設(shè)殘留物均勻分布在設(shè)備內(nèi)表面上，在下批生產(chǎn)時(shí)全部溶解在產(chǎn)品中。
設(shè)備下批產(chǎn)品的生產(chǎn)批量為B(kg)，因殘留物濃度最高為10×10-6即10mg/kg，則殘留物總量最大為10B(mg)；單位面積殘留物的限度為殘留物總量除以測(cè)量的與產(chǎn)品接觸的內(nèi)表面積，設(shè)設(shè)備總內(nèi)表面積為SA（cm2），則表面殘留物限度L=10B/SA(mg/cm2)。為確保安全，一般應(yīng)除以安全因子F，則L=10B/(SA×F)( mg/cm2)
計(jì)算接受殘留限度需考慮的要素如下表（ 計(jì)算接受殘留限度考慮因素）
1.5.3. 微生物限度
清洗的微生物驗(yàn)證可以和清洗的化學(xué)驗(yàn)證同步進(jìn)行，微生物的特點(diǎn)是在一定環(huán)境條件下會(huì)迅速繁殖，數(shù)量急劇增加。而且空氣中存在的微生物能通過(guò)各種途徑污染已清潔的設(shè)備。設(shè)備清洗后存放的時(shí)間越長(zhǎng)，被微生物污染的幾率越大。因此，企業(yè)應(yīng)綜合考慮其生產(chǎn)實(shí)際情況和需求，自行制定微生物污染水平控制的限度及清洗后到下次生產(chǎn)的最長(zhǎng)貯存期限。
1.5.4. 殘留溶劑的限度標(biāo)準(zhǔn)
藥品生產(chǎn)和清潔中可能用到除水外的有機(jī)溶劑，ICH在《殘留溶劑指南》中將溶劑分為3個(gè)級(jí)別。
⑴ 一類溶劑
因其具有不可接受的毒性或?qū)Νh(huán)境造成公害，第一類溶劑在制藥生產(chǎn)中不應(yīng)該使用，如必須使用時(shí)按下表對(duì)殘留進(jìn)行控制，其名稱如下表（ 第一類溶劑濃度限度）
⑵ 二類溶劑
由于其毒性在制劑中應(yīng)予限制，并嚴(yán)格限制允許的每日攝入量，其名稱如下表 （第二類溶劑濃度限度）
⑶ 第三類溶劑
第三類溶劑屬于低毒，對(duì)人體危害很小，其名稱如下表（ 第三類溶劑濃度限度）
ICH《殘留溶劑指南》規(guī)定，一類、二類溶劑僅在不可替代的情況下用于藥品生產(chǎn)，但不能用作清潔劑。在無(wú)法避免時(shí)，三類溶劑可作為清潔劑，其在下批生產(chǎn)中允許的溶劑殘留濃度不應(yīng)超過(guò)初始溶劑濃度的0.5%。
設(shè)備最難清潔部位一般是根據(jù)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估進(jìn)行確定，考慮到在線清洗無(wú)法覆蓋的區(qū)域及手工清洗中無(wú)法拆卸的部件表面，另外對(duì)于設(shè)備中不同組成部分，使用到的不同材質(zhì)，需要對(duì)其進(jìn)行綜合考慮，確認(rèn)設(shè)備最難清潔部位。
確定最難清潔部位首先可以作為設(shè)備設(shè)計(jì)時(shí)的參考，其次能進(jìn)一步確認(rèn)清潔驗(yàn)證中取樣點(diǎn)，但這個(gè)過(guò)程僅適用于淋洗法取樣的方式。
清潔難清證取樣方法確認(rèn)可以參見(jiàn)下文取樣方法驗(yàn)證。
清潔驗(yàn)證時(shí)間計(jì)劃表
清潔驗(yàn)證日常監(jiān)測(cè)/維護(hù)要求
參考文件
附錄
風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估貫穿于產(chǎn)品整個(gè)生命周期，同樣適用于清潔驗(yàn)證過(guò)程，合理運(yùn)用風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估在清潔驗(yàn)證中能達(dá)到如下目的：
選出清潔驗(yàn)證目標(biāo)產(chǎn)品，有效的減少清潔驗(yàn)證工作量，提高清潔驗(yàn)證的適用性；
選出合適的清潔劑，更加高效且節(jié)省成本的達(dá)到清洗目的；
選出合適的檢測(cè)方法，如專屬性與非專屬性的方法分別適用于不同的工藝與設(shè)備；
選出取樣點(diǎn)位置并選擇合理的取樣方法，從而更高效的開(kāi)展清潔驗(yàn)證。
清潔和清潔驗(yàn)證可以從相關(guān)的工藝系統(tǒng)知識(shí)，污染物和設(shè)備清潔輔助系統(tǒng)中進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、確認(rèn)。這些系統(tǒng)要進(jìn)行設(shè)計(jì)審核，然后根據(jù)相關(guān)的可接受標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)，證明已經(jīng)達(dá)到系統(tǒng)的相關(guān)要求。在清潔驗(yàn)證執(zhí)行的過(guò)程中，有很多影響清潔驗(yàn)證不成功的因素，每個(gè)因素都存在著不同的潛在的風(fēng)險(xiǎn)，必須對(duì)每個(gè)因素進(jìn)行充分的分析、評(píng)估，確保清潔驗(yàn)證順利地進(jìn)行，下圖用魚(yú)骨圖分析確認(rèn)所有的影響因素。
圖3 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估魚(yú)骨圖
環(huán)境因素對(duì)清潔驗(yàn)證的影響至關(guān)重要，一個(gè)良好的環(huán)境能夠保證清潔驗(yàn)證順利的進(jìn)行。環(huán)境因素嚴(yán)重影響著清潔驗(yàn)證過(guò)程中的微生物殘留項(xiàng)目，不同級(jí)別的環(huán)境有不同的微生物和塵埃粒子要求，在進(jìn)行清潔驗(yàn)證之前，必須確保HVAC的性能確認(rèn)已完成，環(huán)境的溫濕度已經(jīng)符合要求。特別是對(duì)清潔后的設(shè)備的儲(chǔ)存條件，清潔后的設(shè)備必須儲(chǔ)存在干燥的環(huán)境中，需要進(jìn)行干凈設(shè)備保留時(shí)間和臟設(shè)備保留時(shí)間的驗(yàn)證，而這兩個(gè)時(shí)間驗(yàn)證主要是針對(duì)微生物殘留限度，因?yàn)榄h(huán)境因素如不能被有效控制，必定導(dǎo)致清潔驗(yàn)證失敗。
清潔驗(yàn)證執(zhí)行之前，必須完成與清潔驗(yàn)證相關(guān)的分析方法和取樣方法驗(yàn)證以及所有相關(guān)設(shè)備的清潔SOP。在設(shè)備清潔SOP中必須清楚的描述T.A.C.T（Temperature, Action,Concentration,Time）參數(shù)，確保清潔規(guī)程的可操作性。
對(duì)于參與的清潔驗(yàn)證的相關(guān)人員，特別是與清潔驗(yàn)證相關(guān)設(shè)備清潔的操作人員，必須對(duì)相關(guān)的清洗規(guī)程進(jìn)行嚴(yán)格的培訓(xùn)，保證設(shè)備清洗的一致性，必要時(shí)在清潔驗(yàn)證過(guò)程中可以采用不同的班組人員對(duì)設(shè)備進(jìn)行清洗，從而證明清潔SOP的耐用性。執(zhí)行清潔驗(yàn)證的人員必須全部通過(guò)清潔驗(yàn)證方案的培訓(xùn)，在執(zhí)行過(guò)程中，盡量選用有經(jīng)驗(yàn)的人員，尤其是取樣操作人員，必須通過(guò)回收率實(shí)驗(yàn)的培訓(xùn)，否則不能進(jìn)行取樣操作。
為了使設(shè)備的清洗達(dá)到一定的潔凈度，設(shè)備的清洗必須嚴(yán)格選用清潔劑和清潔工具，清潔劑必須采用成分單一和制藥行業(yè)允許的清潔劑，而且在清潔驗(yàn)證執(zhí)行的過(guò)程中要測(cè)定清潔劑殘留，清潔工具一定要選擇沒(méi)有任何脫落物質(zhì)的清潔工具，重要的清潔工具的變更可能導(dǎo)致清潔程序重新驗(yàn)證。設(shè)備清洗所采用水的質(zhì)量對(duì)于最終可接受標(biāo)準(zhǔn)的制定有著很大的影響，不同的水質(zhì)清潔代表著不同的潔凈要求，比如注射用水一般都是無(wú)菌制藥廠房中進(jìn)行，而純化水對(duì)設(shè)備的清潔一般都在非無(wú)菌制藥廠房中進(jìn)行，所以最終清潔用水的質(zhì)量好壞決定著清潔驗(yàn)證微生物限度制訂原則。
藥品生產(chǎn)過(guò)程中，每個(gè)公司的每個(gè)車間都會(huì)有很多品種和劑型藥品，由于在清潔驗(yàn)證過(guò)程中，要耗費(fèi)大量的人力和物力，我們不可能針對(duì)每個(gè)品種都要單獨(dú)的進(jìn)行清潔驗(yàn)證，為了降低成本和將復(fù)雜的清潔驗(yàn)證簡(jiǎn)單化，我們需要對(duì)車間所有的品種和劑型進(jìn)行分組分類，從中選擇最差條件的產(chǎn)品進(jìn)行清潔驗(yàn)證。
清潔驗(yàn)證過(guò)程中涉及的所有的設(shè)備的儀器儀表必須進(jìn)行校準(zhǔn)，確保獲得數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。考慮不同人員操作的差異性，取樣操作應(yīng)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)并能嚴(yán)格遵守規(guī)程的人員進(jìn)行，同時(shí)為保證樣品具有較好的重現(xiàn)性，取樣操作應(yīng)由完成回收率實(shí)驗(yàn)的人員進(jìn)行操作。棉簽使用前用取樣溶劑預(yù)先清洗，以防止纖維殘留在取樣位置表面。不同材質(zhì)的回收率實(shí)驗(yàn)在此方案進(jìn)行前必須完成，應(yīng)由同一人至少進(jìn)行3次操作，應(yīng)大于或等于50%，三次結(jié)果的RSD應(yīng)不大于20%，為確保產(chǎn)品的安全性，在計(jì)算殘留量時(shí)應(yīng)以最低的回收值代入，即算得最大可能殘留量。對(duì)于不同材質(zhì)的回收率結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，為最大程度地降低污染的風(fēng)險(xiǎn)，采取回收率最低的材質(zhì)作為最終回收率。
制藥生產(chǎn)中每個(gè)公司有不同的劑型，每個(gè)劑型使用的設(shè)備也各不相同，又存在著不同的產(chǎn)品，在清潔驗(yàn)證的執(zhí)行過(guò)程中，不可能對(duì)每個(gè)產(chǎn)品的設(shè)備鏈進(jìn)行驗(yàn)證，如果一個(gè)公司某劑型的產(chǎn)品非常多，那么清潔驗(yàn)證周期會(huì)很長(zhǎng)，浪費(fèi)大量的人力和物力資源。所以我們會(huì)根據(jù)產(chǎn)品使用的設(shè)備鏈和產(chǎn)品的相似性對(duì)設(shè)備鏈進(jìn)行分組驗(yàn)證，對(duì)于同一類別的設(shè)備鏈，只需要選擇最差條件設(shè)備鏈驗(yàn)證，只要最差條件設(shè)備鏈通過(guò)驗(yàn)證，那么其余的設(shè)備鏈也就不需要進(jìn)行驗(yàn)證了，大大減輕了清潔驗(yàn)證的負(fù)擔(dān)。
制藥生產(chǎn)過(guò)程中，由于設(shè)備的種類非常多，每個(gè)設(shè)備都有不同的幾何形狀，所以設(shè)備取樣點(diǎn)的選擇是非常重要的，所選擇的取樣點(diǎn)必須有很強(qiáng)的代表性，最終取樣點(diǎn)結(jié)果的合格證明該設(shè)備的清洗程序是適用的。
因?yàn)樵谇鍧嶒?yàn)證過(guò)程中主要的目的是證明上批產(chǎn)品的活性成分對(duì)下批產(chǎn)品沒(méi)有造成污染，所以對(duì)于有些沒(méi)有接觸到活性成分的設(shè)備，我們可以適當(dāng)?shù)刂贫ㄆ錅y(cè)試項(xiàng)目，并不是所有的測(cè)試項(xiàng)目都是一成不變的
清潔驗(yàn)證相關(guān)的分析方法一般包括分析方法驗(yàn)證與取樣方法驗(yàn)證，清潔驗(yàn)證中選擇一個(gè)合適的分析方法是非常必要的，適當(dāng)?shù)姆治龇椒☉?yīng)能夠充分檢測(cè)相關(guān)殘留物。可以從分析結(jié)果中得出什么結(jié)論也很重要（例如檢測(cè)的是產(chǎn)品還是清潔劑，結(jié)果是否合格），檢測(cè)結(jié)果決定了清潔方法是否可行或需要進(jìn)一步改進(jìn)。本章討論的內(nèi)容是怎樣選擇一個(gè)合適的測(cè)試方法，包括適用性和化學(xué)與微生物測(cè)試方法的信息，以及測(cè)試方法的驗(yàn)證。
專屬性是指其他物質(zhì)存在干擾的情況下，被分析物能準(zhǔn)確可靠檢測(cè)的能力。對(duì)于清潔驗(yàn)證來(lái)說(shuō)，干擾物包括降解物、輔料、取樣溶劑、取樣棉簽、清潔劑等干擾。
準(zhǔn)確度也稱為真實(shí)度，指真實(shí)值或認(rèn)可的參考值與測(cè)量值之間的相近程度，一般用回收率表示，綜合回收率要求不低于75%，回收率的RSD要求不大于10%，將測(cè)定的回收率中最低值作為校正因子f，樣品的測(cè)定結(jié)果除以校正因子表示樣品的實(shí)際量。
指在規(guī)定條件下對(duì)均質(zhì)樣品多次取樣進(jìn)行一系列檢測(cè)結(jié)果的接近程度，精密度可從三個(gè)層次考查：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性，精密度考察應(yīng)使用均質(zhì)的、可信的樣品，如果得不到，可人為配制樣品溶液進(jìn)行研究。
分析方法的線性是指在給定的范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果與樣品中被分析物的濃度（量）成比例關(guān)系的能力。范圍指能達(dá)到一定的準(zhǔn)確度、精密度和線性，測(cè)試方法適用的試樣中被測(cè)物的高、低限濃度或量。
分析方法的范圍是指樣品中被分析物的較高濃度和較低濃度的一個(gè)區(qū)間，并已證實(shí)在此區(qū)間內(nèi)，該方法具有合適的準(zhǔn)確性、精密度和線性。濃度范圍應(yīng)達(dá)到殘留物限度的50%~150%。
檢測(cè)限是指樣品中的被分析物能被檢測(cè)到的最低量，定量限是指能定量檢測(cè)樣品中被分析物的最低量。檢測(cè)限和定量限可采用直觀評(píng)價(jià)和信噪比的方法，或者采用響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率的方法進(jìn)行驗(yàn)證。
耐用性是指試驗(yàn)參數(shù)適當(dāng)?shù)陌l(fā)生細(xì)小改變時(shí)，測(cè)量保持不受影響的能力，可用于說(shuō)明正常使用時(shí)的可靠性。
耐用性測(cè)試是在改變其分析參數(shù)的條件下，分析方法的適用性，以HPLC方法為例典型變化的參數(shù)如下：流動(dòng)相PH值變化、流動(dòng)相組分變化、柱溫和流速變化
樣品在分析前放置于一定的儲(chǔ)存條件下，可能會(huì)發(fā)生降解和變化，在這些情況下，需要考察被分析物的穩(wěn)定性。使用同一份溶液，測(cè)定其預(yù)先選定的時(shí)間間隔里結(jié)果的差異，以此分析樣品的穩(wěn)定性。
定量檢測(cè)時(shí)應(yīng)制備2份對(duì)照品，對(duì)照品一致性檢查不大于5%，對(duì)照品的RSD不超過(guò)10%。
表1 檢驗(yàn)方法中限度檢查和定量檢查需驗(yàn)證的參數(shù)
取樣回收率研究通常需要證明采用適當(dāng)?shù)姆治龇椒ê腿映绦颍沙浞譁y(cè)量或量化設(shè)備表面的殘留物。這些研究為殘留物測(cè)量的取樣以及分析方法建立提供了科學(xué)依據(jù)。它的目的是建立一個(gè)可重現(xiàn)的設(shè)備表面回收率。以下探討三種類型的取樣回收率：擦拭取樣回收率，淋洗取樣回收率以及“目檢”回收率。對(duì)于擦拭以及淋洗取樣而言，回收率研究可以作為分析方法驗(yàn)證的一部分，或者一旦確定分析方法能夠檢測(cè)溶液中殘留物，可單獨(dú)進(jìn)行研究。取樣回收率研究是實(shí)驗(yàn)室研究，需要不同被取樣設(shè)備材質(zhì)（如不銹鋼、玻璃、PTFE 以及EPDM）試樣，并在上面涂布待檢測(cè)殘留物。
擦拭回收率研究中，將已知濃度的殘留物溶液均勻涂布在材質(zhì)試樣上，自然晾干，采用一定的擦拭方法進(jìn)行取樣，選用合適的溶劑提取棉簽上的殘留，然后檢測(cè)提取液中殘留物的數(shù)量。回收量與材質(zhì)試樣上的加入量之比就是取樣百分回收率。由于擦拭屬于人工操作，通常每人需要重復(fù)三次回收率研究。每個(gè)殘留物和表面類型的組合至少需要兩個(gè)人進(jìn)行 擦拭回收率研究。研究建立的回收率可以通過(guò)不同的方式定義，但通常定義為任意一個(gè)擦拭取樣人員的最低平均回收率。一個(gè)可接受的拭子回收率取決于如何進(jìn)行拭子回收率試驗(yàn)。如果在回收率研究確認(rèn)取樣方法時(shí)，沒(méi)有對(duì)殘留限度或分析結(jié)果進(jìn)行修正，回收率通常要求70%或更高。如果回收率用于修正殘留物限度或分析結(jié)果，回收率一般要達(dá)到50%或以上。
淋洗法回收率研究同擦拭回收率相似，將目標(biāo)殘留物溶液涂布在材質(zhì)試樣上自然晾干。對(duì)于擦拭取樣的回收率，必須嚴(yán)格執(zhí)行預(yù)定擦拭步驟。與之相反對(duì)于淋洗取樣，無(wú)法在實(shí)驗(yàn)室中準(zhǔn)確地重復(fù)淋洗步驟（除了提取取樣的特殊情況）。然而在實(shí)驗(yàn)室中模擬淋洗程序是可行的。在可能的情況下，模擬淋洗的條件應(yīng)該同實(shí)際的設(shè)備淋洗條件相同，包括淋洗溶劑以及淋洗溶劑溫度的選擇。其他情況下，應(yīng)該選擇與設(shè)備淋洗相同或最差的淋洗條件，例如回收率研究中溶劑量與被取樣表面積之比應(yīng)該同設(shè)備淋洗時(shí)相同或更低。
這個(gè)過(guò)程實(shí)際上是確定一個(gè)定量的“目視檢測(cè)限”，如果目檢只是作為擦拭或沖洗取樣的補(bǔ)充，則可以但不要求確定“目視檢測(cè)限”。指定觀察條件下的目視檢測(cè)限可以通過(guò)在設(shè)備材質(zhì)試樣上涂布不同濃度（μg/cm2）的殘留物來(lái)確定。并需要一組訓(xùn)練有素的觀察者來(lái)確定表面殘留物明顯可見(jiàn)時(shí)的最低殘留水平。目視檢測(cè)限的意義在于，如果在清潔驗(yàn)證方案中，在同樣（或更嚴(yán)格）的觀察條件下確定設(shè)備表面已目檢潔凈，則可認(rèn)為實(shí)際殘留水平低于目視檢測(cè)限。適當(dāng)?shù)挠^察條件包括距離，光照以及觀察角度。目視檢測(cè)限取決于殘留物性質(zhì)，表面性質(zhì)（例如，不銹鋼對(duì)PTFE）以及觀察者的視力。文獻(xiàn)報(bào)道的典型的目視檢測(cè)限是 1-4μg/cm2。對(duì)于目視檢測(cè)限，不需要確定回收率。該研究的目的是確定殘留物明顯可見(jiàn)時(shí)的一個(gè)殘留物水平，這樣目視潔凈的任何表面上殘留水平都低于目視檢測(cè)限。
對(duì)于微生物取樣，不適合進(jìn)行回收率研究以確定表面回收率，原因之一是微生物檢測(cè)的計(jì)數(shù)問(wèn)題通常以“菌落形成單位”進(jìn)行計(jì)數(shù)而不是單個(gè)微生物。第二個(gè)原因是在一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的取樣回收率研究中，當(dāng)材質(zhì)試樣晾干時(shí)微生物會(huì)死亡或失去生存能力。第三個(gè)原因是不清楚選用哪種微生物進(jìn)行回收率研究。第四個(gè)原因是通常生物負(fù)載限度已明顯低于可能影響產(chǎn)品質(zhì)量或工藝性能（如在線滅菌）的水平，因此即使回收率低（<50%），不引入回收因子也不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量和/或工藝性能。
參照物質(zhì)或最難清潔物質(zhì)、最難清潔部位和取樣部位，如何制訂驗(yàn)證的合格標(biāo)準(zhǔn)即最大允許殘留清潔驗(yàn)證方案必須符合一般驗(yàn)證方案的共性要求。驗(yàn)證方案中最關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題為如何確定限度，用什么手段能準(zhǔn)確地定量殘留量，這包括取樣方法和檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證。
一般藥品都由活性成分和輔料組成。對(duì)于復(fù)方制劑，含有多個(gè)活性成分。所有這些物質(zhì)的殘留物都是必須除去的。在清潔驗(yàn)證中是否需要為所有殘留物都制定限度標(biāo)準(zhǔn)一一檢測(cè)呢？這是不切實(shí)際且沒(méi)有必要的。在一定的意義上，清潔的過(guò)程是個(gè)溶解的過(guò)程，因此通常的做法是從各組分中確定最難清潔（溶解）的物質(zhì)，以此作為參照物質(zhì)。通常相對(duì)于輔料，人們更關(guān)注活性成分的殘留，因?yàn)樗赡苤苯佑绊懴屡a(chǎn)品的質(zhì)量、療效和安全性。因此活性成分的殘留限度必須作為驗(yàn)證合格的標(biāo)準(zhǔn)之一。如當(dāng)存在兩個(gè)以上的活性成分時(shí)，其中最難溶解的成分即可作為最難清潔物質(zhì)論處。以復(fù)方18氨基酸注射液為例，它有18種氨基酸，均為活性成分。其中最難溶解的為胱氨酸，僅微溶于熱水，因此可將其作為最難清潔物質(zhì)。這樣一來(lái)，清潔驗(yàn)證就找到了殘留的“參照物”而不用考慮其他易溶解組分。
取樣點(diǎn)應(yīng)包括各類最難清潔的部位，及各種材質(zhì)的全面考慮。
清潔驗(yàn)證方案可用多種格式，其共同要求要素包括如下內(nèi)容：
① 目的
明確待驗(yàn)證的設(shè)備和清潔方法。
② 清潔規(guī)程
待驗(yàn)證的清潔方法的SOP即清潔規(guī)程應(yīng)當(dāng)在驗(yàn)證開(kāi)始前確定下來(lái)，在驗(yàn)證方案中列出清潔規(guī)程以表明清潔規(guī)程已經(jīng)制定。
③ 驗(yàn)證人員
列出參加驗(yàn)證人員的名單，說(shuō)明參加者所屬的部門和各自的職責(zé)，對(duì)相關(guān)操作人員的培訓(xùn)要求。
④ 確定參照物和限度標(biāo)準(zhǔn)
在本部分應(yīng)詳細(xì)闡述確定參照物的依據(jù)，確定限度標(biāo)準(zhǔn)的計(jì)算過(guò)程和結(jié)果。一般可將相關(guān)設(shè)備列表，計(jì)算總表面積，特殊表面面積；將相關(guān)產(chǎn)品列表，列入主要活性成分及其相關(guān)物理化學(xué)性質(zhì)，MTDD值等，確定參照物質(zhì)，計(jì)算限度標(biāo)準(zhǔn)。
⑤ 檢驗(yàn)方法學(xué)
本部分應(yīng)說(shuō)明取樣方法、工具、溶劑，主要檢驗(yàn)儀器，取樣方法和檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證情況等。
⑥ 取樣要求
用示意圖、文字等指明取樣點(diǎn)的具體位置和取樣計(jì)劃，明確規(guī)定何時(shí)、何地、取多少樣品，如何給各樣品標(biāo)記。這部分的內(nèi)容對(duì)方案的實(shí)施和保證驗(yàn)證結(jié)果的客觀性是至關(guān)重要的。
⑦ 可靠性判斷標(biāo)準(zhǔn)
在本部分應(yīng)規(guī)定為證明待驗(yàn)證清潔規(guī)程的可靠性，驗(yàn)證試驗(yàn)須重復(fù)的次數(shù)，一般至少連續(xù)3次試驗(yàn)，所有數(shù)據(jù)都符合限度標(biāo)準(zhǔn)方可。
清潔驗(yàn)證完成后該清潔方法即生效，清潔方法即進(jìn)入維護(hù)與再驗(yàn)證階段，企業(yè)應(yīng)當(dāng)對(duì)清潔驗(yàn)證狀態(tài)進(jìn)行持續(xù)維護(hù)，保證清潔方法持續(xù)可靠。
在日常生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)清潔方法進(jìn)行監(jiān)控的目的是進(jìn)一步考察清潔程序的可靠性，對(duì)于手工清洗過(guò)程來(lái)說(shuō)，監(jiān)控尤其重要，因?yàn)槠渲噩F(xiàn)性很在程度上取決于人員的培訓(xùn)和操作人員的實(shí)際操作技能。
監(jiān)控辦法為在日常清潔時(shí)，定期進(jìn)行抽樣檢測(cè)，確認(rèn)清潔過(guò)程的有效性與操作的重現(xiàn)性。通過(guò)日常監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)的回顧，以確定再驗(yàn)證的周期。
當(dāng)已經(jīng)驗(yàn)證的設(shè)備、清潔程序有任何變更以及產(chǎn)品處方、增加新產(chǎn)品等可能導(dǎo)致清潔規(guī)程或設(shè)備的變更，應(yīng)組織相關(guān)人員對(duì)變更情況進(jìn)行評(píng)估，確定是否需要進(jìn)行再驗(yàn)證，當(dāng)發(fā)生下列情形之一時(shí)，須對(duì)清潔程序進(jìn)行再驗(yàn)證。
① 清潔程序變化時(shí)
② 清潔劑變化時(shí)
③ 設(shè)備有重大變更時(shí)
④ 增加相對(duì)更難清洗的產(chǎn)品時(shí)
在實(shí)際生產(chǎn)中，一臺(tái)（組）設(shè)備用于多種產(chǎn)品的生產(chǎn)是非常普遍的現(xiàn)象。有時(shí)各種產(chǎn)品的物理、化學(xué)性質(zhì)有很大差異。這就給清潔規(guī)程制定者提出這樣的問(wèn)題：是否要為每個(gè)產(chǎn)品分別制定清潔規(guī)程呢？經(jīng)驗(yàn)告訴我們，為一臺(tái)（組）設(shè)備制定多個(gè)清潔規(guī)程并不可取：這不但由于為每個(gè)規(guī)程進(jìn)行難清潔驗(yàn)證的工作量過(guò)于龐大，更主要的是對(duì)操作者來(lái)說(shuō)要在多個(gè)規(guī)程中選擇適當(dāng)?shù)那鍧嵎椒ê苋菀自斐刹铄e(cuò)。比較可行的方法是在所有涉及的產(chǎn)品中，選擇最難清潔的產(chǎn)品為對(duì)照產(chǎn)品，以所有產(chǎn)品/原料中允許殘留量最低的限度為標(biāo)準(zhǔn)（最差條件），優(yōu)化設(shè)計(jì)足以清除該產(chǎn)品/原料以達(dá)到殘留量限度的清潔程序。驗(yàn)證就以該程序?yàn)閷?duì)象，只要證明其能達(dá)到預(yù)定的要求，則該程序能適用于所有產(chǎn)品的清潔。當(dāng)然，從環(huán)保和節(jié)約費(fèi)用的角度考慮，如果實(shí)踐證明該清潔程序?qū)Υ蠖鄶?shù)產(chǎn)品而言過(guò)于浪費(fèi)，也可再選擇一個(gè)產(chǎn)品進(jìn)行上述規(guī)程制定和驗(yàn)證工作。這是在規(guī)程中必須非常明確地規(guī)定該方法適用于哪些產(chǎn)品，還須明確為防止選擇時(shí)發(fā)生錯(cuò)誤需要采取的必要的措施。
參照產(chǎn)品的選擇原則如下：
① 將所有產(chǎn)品列表。
② 確定產(chǎn)品的若干物理、化學(xué)性質(zhì)為評(píng)價(jià)項(xiàng)目：如主要活性成分的溶解度，黏度，吸附性等，其中最主要的性質(zhì)為溶解度。
③ 對(duì)每個(gè)產(chǎn)品的評(píng)價(jià)項(xiàng)目打分。如將溶解度分為1/2/3/4級(jí)，依次表示難溶/微溶/可溶/易溶。
④ 根據(jù)經(jīng)驗(yàn)和產(chǎn)品性質(zhì)，擬定適當(dāng)?shù)那鍧崉┓N類。
⑤ 計(jì)算各產(chǎn)品的最大允許殘留限度。
⑥ 將表格按照溶解度由小到大排序，選擇溶解度最小的產(chǎn)品作為參照產(chǎn)品。
⑦ 如果表格中使用的清潔劑可分為水/水溶性清潔劑（包括酸、堿溶液）和有機(jī)溶劑兩類，應(yīng)分別選擇一種參照代表產(chǎn)品。
⑧ 將表中允許殘留限度最小的數(shù)值確定為驗(yàn)證方案的允許殘留物限度標(biāo)準(zhǔn)。
⑨ 將與參照產(chǎn)品對(duì)應(yīng)的清潔劑確定為清潔方法使用的清潔劑。
某設(shè)備生產(chǎn)產(chǎn)品統(tǒng)計(jì)表（已按溶解性排序）
從表中可見(jiàn)，產(chǎn)品丙、丁、乙、戊，可用水溶性清潔劑清潔，應(yīng)選最難溶的產(chǎn)品丙為參照產(chǎn)品，清潔劑1%NaOH熱水溶液，允許殘留限度定為1.5μg/cm2。產(chǎn)品甲、己用乙醇為清潔劑，可另算一類，應(yīng)選擇產(chǎn)品甲為代表產(chǎn)品，清潔劑為95%乙醇，允許殘留限度定為2.5μg/cm2。根據(jù)設(shè)備的情況、已確定的清潔劑和殘留限度，設(shè)計(jì)清洗方法。在生產(chǎn)后依法清洗并驗(yàn)證。
清潔驗(yàn)證試驗(yàn)至少進(jìn)行3次，每批生產(chǎn)后按清潔規(guī)程清潔，按驗(yàn)證方案檢查清潔效果，取樣并檢驗(yàn)。重復(fù)上述過(guò)程3次，3次試驗(yàn)的結(jié)果均應(yīng)符合預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。如果出現(xiàn)個(gè)別化驗(yàn)結(jié)果超標(biāo)的情況，必須詳細(xì)調(diào)查原因。如果有證據(jù)表明結(jié)果超標(biāo)是因?yàn)槿印⒒?yàn)失誤等原因造成，可將此數(shù)據(jù)從統(tǒng)計(jì)刪除。否則應(yīng)判驗(yàn)證失敗。不得采用重新取樣再化驗(yàn)直至合格（Testing until clean）的做法。驗(yàn)證失敗意味著清潔規(guī)程存在缺陷，應(yīng)當(dāng)根據(jù)化驗(yàn)結(jié)果提供的線索修改清潔規(guī)程，隨后開(kāi)展新一輪的驗(yàn)證。
來(lái)源：Internet
