高效液相色譜儀作為一種高精密分析科學儀器，如果使用過程中操作不當容易導致各種各樣的問題，其中最常見的也是關注度較高的問題是峰形異常的問題。之前我們已經講述過色譜峰前延、色譜峰拖尾等峰形異常問題的原因及解決方法，下面我們將著重討論另外一種常見的峰形異常問題-色譜峰分叉，即出現雙峰或肩峰，如下圖所示：

導致色譜峰分叉的因素有很多，我們來了解一下常見的幾種情況：

1、保護柱阻塞或被污染

復雜的樣品基質容易造成保護柱阻塞或污染，進而產生色譜峰分叉的現象。

解決方法

取下保護柱再進行分析，如有必要可更換保護柱。

2、分析柱阻塞或被污染

色譜柱在開始使用時沒問題，而使用一段時間后出現峰分叉的現象，很可能是由于色譜柱阻塞或者被污染引起。

解決方法

如果分析柱阻塞，一般入口被阻塞的可能性較大，建議更換篩板或更換色譜柱；若分析柱被強保留物質污染，根據污染物質的物化性質選擇適當的清洗再生措施。

3、色譜柱填料塌陷

色譜柱通常都有其適用的pH、溫度范圍，例如硅膠基質填料的色譜柱pH耐受范圍一般為2-8，推薦使用溫度不超過40℃，若使用不當會造成色譜柱填料塌陷，從而導致色譜峰分叉。

解決方法

由于柱填料塌陷引起的色譜峰分叉很難修復，建議更換新的色譜柱。

4、溶劑效應：樣品溶劑不溶于流動相

對于反相色譜，若使用100%有機溶劑或100%強溶劑，大體積進樣時將使色譜峰過早的洗脫出色譜柱，導致峰變形。

解決方法

改變樣品溶劑。如果可能，采取流動相作為樣品溶劑。

5、接頭連接不正確

如果連接色譜柱時選用的連接頭不配套，色譜柱雖能固定住但管線與柱頭仍有一定空間，渦流導致峰前延或分叉。

解決方法

更換配套的連接頭

6、樣品過載

進樣量超過柱容量時，尤其在使用小體積色譜柱時，也可能會出現峰分叉的現象。

解決方法

減小進樣量