原研藥上市后一般會給予5年的市場獨占期，孤兒藥獨占期為7年，兒科用藥獨占期為6個月，新劑型、新適應癥獨占期為3年；在市場獨占期內，FDA不會批準仿制藥企業上市相應的仿制產品，即使在該期限內專利過期，原研藥企業仍然可以單獨占領市場。除了原研藥有市場獨占期外，首仿藥也具有市場獨占期為180天。首仿藥即第一個仿制藥，最早可以在新藥上市后滿4年申報，因此，所有的仿制藥企業如果做好了充分的準備，都會在這一天爭相向FDA遞交自己的ANDA資料，一旦資料被受理，其首仿資格便會獲得確認。對于仿制藥公司，從長遠角度，要想維持企業的市場利益，也需持續向市場輸送新的、質量高的仿制產品。

大多數仿制藥是口服固體制劑(如片劑、膠囊機)，它們通常是有多種成分組成的，包括活性成分API和輔料，活性成分即具有藥理活性、能發揮藥效的成分；而輔料，雖然沒有臨床藥效作用，但從某種程度上講，它可能會影響到藥品的質量、安全性和有效性。如處方中的穩定劑，能提高產品的穩定性；緩釋制劑中的緩釋材料，對藥物的溶出有較大的決定性作用，進而影響體內吸收。因此，如果仿制藥能與RLD保存相同的輔料種類和用量、相同的晶型、相同的制劑工藝，無疑會大大提高仿制藥的成功率，并且縮短仿制時間。從某種程度上講，反向工程是一個科學的、經濟的、高效的仿制藥研發手段之一。

剖析處方成分

原研藥的處方一般可在FDA、PMDA、EMA、eMC等官方網站中找到，也可在其產品附帶說明書中查找到，也可在DailyMed(僅限FDA批準藥物)、原研廠家網站(不一定有)等網站上找到。有些輔料不僅對制劑成品的質量會產生作用，甚至會影響到體內的吸收(如SLS)，因此，與原研藥保持一致的處方成分，對產品開發的成功率有很大幫助。

處方成分定量研究

目前FDA沒有仿制藥口服制劑的輔料與RLD在用量上保持一致(parenteral drug需要Q1/Q2相同)，并且對于原研企業來說，處方組成用量越保密越好，尤其是一些關鍵性的輔料，如下圖1的Fortamet®，廠家將一些關鍵用量信息抹掉：

圖1  原研企業公布的Fortamet®處方示例

但是，如果一些關鍵輔料如緩釋材料、崩解劑、表面活性劑、潤滑劑等的用量能被確定，無疑對后期處方開發與研究有很大的幫助，同時也會節省很多資金(試想中試一批的費用大多要花好幾萬，如果是API貴的、工藝復雜的，一批成本可能達到幾十萬)。

輔料的定量具有挑戰性，主要的困難來自于產品中其它輔料或API的干擾，所以一般在對某種輔料進行定量前，會嘗試采用一些手段將其提取出來，如通過組分間溶解度的差異進行分離，或通過過濾方式分離。下圖2為用得較多的輔料定量檢測手段：

圖2  輔料含量測定常用方法

對于在處方中重量占比大的建議用重量法/沉淀法，而占比小的(如穩定劑、表面活性劑、pH調節劑)等建議采用HPLC或HPTLC法。

活性成分API的研究一般包括分子水平研究、粒徑、密度等。

API分子水平研究

API的分子水平研究包括晶型、水合物、溶劑化物、無定形態，這些可能會影響到溶解度、生產可行性、生物利用度和穩定性等問題。在仿制藥的研發過程中，API的多晶型是研究得最多的，也是最重要的。目前的法規并未要求仿制藥需與RLD保持一致的晶型，但若存在多種晶型時，原研藥一般會優先考慮最穩定性的晶型形態，以防止成品在生產過程中或在后期儲存中發生轉晶現象；而對于仿制藥企業，也最好是選擇與原研藥保持一致的晶型形態，以保證能與RLD具有相似的穩定性和溶出釋放相似性。但這里往往容易產生晶型專利問題。

目前監測晶型的方法有多種，如X射線粉末衍射(XRPD)、核磁共振(NMR)、Roman譜和近紅外(NIR)譜、熔點測定法、電子顯微鏡法、差示掃描熱量法(DSC)、密度法等。

API粒徑研究

API的粒徑是一個關鍵的研究點之一，尤其是對于難溶性藥物。API的粒徑分布（PSD）有時能直接影響到產品的溶出速率和生物利用度。難溶性藥物一般可采用粉碎法或微粉化法考察篩選出一個適合的粒徑范圍。但因制劑成品中的輔料干擾，常規檢測粒徑的技術不適合制劑成品，目前可能可行的方法只有顯微鏡法。也可以查閱相關文獻資料和專利獲取信息。

API的密度

API的密度檢測一般為退密度(BD,Bulk density)和振實密度(TD, Tapped density)，根據這兩組數據從而計算出Carr指數和Hausner指數，評估API的流動性，如下圖3為QbDIR模板中的案例：

圖3  QbDIR模板中對API密度的相關敘述

口服固體制劑一般采用濕法制粒、干法制粒、或者直接壓片形式，根據API的穩定性、API在成品中的占比、流動性和可壓性等進行選擇，比如流動性差的不會選擇直接壓片形式，而對濕敏感的API一般也不會選擇濕法制粒；同時，還需結合生產線上的設備進行最優的選擇。

另外，在EMA中查詢原料藥和制劑成品的工藝步驟也是一種方式，如下圖4為EMA中查詢到的鹽酸決奈達隆片的生產工藝步驟，依次為混合、濕法制粒、干燥、過篩、壓片、包衣。

圖4  EMA中查詢到的鹽酸決奈達隆片的生產工藝步驟示例

總而言之，仿制藥中的功能性輔料和API的理化性質(分子水平研究)是反向工程的重要步驟之一，甚至對仿制藥的成功起著決定性的作用。解析處方成分用量會減少小試研究的次數，從而更快地找到最優處方，同時也有利于提高生物等效性的成功率；而原料藥的形態學研究則有利于提高產品開發的可行度和后期產品的穩定性。對于仿制藥企業而言，對RLD進行深入反向解析，無疑是一件既經濟又省時的工作。

參考資料：

1. The Role of Reverse Engineering in the Development of Generic Formulations

2. EMA有你不知道的“秘密”

3. QbD速釋制劑模板