一、包蟲病簡介

　　包蟲病又名棘球蚴病，是一種古老的人畜共患性寄生蟲病，主要由人感染棘球絳蟲的幼蟲所致。該疾病分為囊型包蟲病和泡型包蟲病兩種，分別由細(xì)粒棘球蚴和多房棘球蚴感染引起。兩種絳蟲都必須在哺乳類動物體內(nèi)寄生才能完成生活史，細(xì)粒棘球絳蟲的終末宿主一般為犬和狼；多房棘球絳蟲的終末宿主一般為狐貍、犬和狼。

　　近年來，包蟲病呈全球性分布，我國包蟲病主要流行于西北牧區(qū)和半農(nóng)半牧地區(qū)，其中以新疆、西藏、寧夏、甘肅、青海、內(nèi)蒙古、四川7省最為嚴(yán)重。根據(jù)文獻(xiàn)報道，我國西部人群包蟲病的感染率為3.1%～ 31.5%，患病率為0.5%～5.0%，其中青藏高原部分地區(qū)人群患病率為5.0％～10.0％。據(jù)2010年原國家衛(wèi)生和計劃生育委員會“防治包蟲病行動計劃(2010—2015)”，我國西部地區(qū)包蟲病平均患病率為1.08％，受威脅人口約為6600萬，每年造成直接經(jīng)濟(jì)損失30億元。

　　二、包蟲病診斷依據(jù)

　　根據(jù)現(xiàn)行包蟲病診斷標(biāo)準(zhǔn)，包蟲病的臨床診斷要綜合考慮：流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、影像學(xué)檢查、實驗室檢查及病原學(xué)檢查幾個方面。

　　1.流行病學(xué)史

　　該部分主要考慮患者是否有在流行區(qū)的居住、工作、旅游或狩獵史，或與犬、牛、羊等家養(yǎng)動物或狐、狼等野生動物及其皮毛的接觸史；在非流行區(qū)有從事來自流行區(qū)的家畜運輸、宰殺、畜產(chǎn)品及皮毛加工等暴露史。

　　2.臨床表現(xiàn)

　　患者主要的臨床表現(xiàn)為棘球蚴的囊占位所致的壓迫、刺激、囊破裂引起的一系列癥狀，囊性包蟲病可發(fā)病全身多個器官，以肝、肺為常見；泡型包蟲病原發(fā)病灶幾乎都位于肝臟。

　　3.影像學(xué)檢查

　　主要為通過B超掃描、X線檢查、計算機斷層掃描或磁共振檢查發(fā)現(xiàn)占位性病變。

　　4.實驗室檢查

　　通過酶聯(lián)免疫吸附試驗、間接紅細(xì)胞吸附試驗、PVC膜快速ELISA、免疫印跡技術(shù)等方法對包蟲病相關(guān)的特異性抗體、循環(huán)抗原、免疫復(fù)合物進(jìn)行檢測。

　　5.病原學(xué)檢查

　　在手術(shù)活檢材料、切除的病灶或排出物中發(fā)現(xiàn)棘球蚴的囊壁、子囊、原頭節(jié)或頭鉤。此為包蟲病的確診方法。

　　三、相關(guān)檢測產(chǎn)品介紹

　　對來源于患者或疑似患者人體樣本中的包蟲病感染相關(guān)生物標(biāo)志物進(jìn)行檢測是輔助診斷包蟲病的重要手段。相關(guān)生物標(biāo)志物包括特異性抗體、循環(huán)抗原、免疫復(fù)合物、病原體核酸等。我國已批準(zhǔn)四個包蟲病抗體檢測試劑，產(chǎn)品信息見表1，已批準(zhǔn)產(chǎn)品均采用免疫學(xué)方法對樣本中的病原體抗體進(jìn)行檢測，免疫學(xué)檢測有其自身的局限性，一方面，由于細(xì)粒棘球蚴和多房棘球蚴兩種病原體自身抗原存在交叉的特點，導(dǎo)致應(yīng)用抗體檢測來區(qū)分囊型/泡型效果欠佳；另一方面，抗體檢測無法區(qū)分現(xiàn)癥感染與既往感染。隨著檢測技術(shù)的進(jìn)步，病原體核酸及其游離DNA（cfDNA）檢測為感染的輔助診斷提供新的思路。目前，國際上尚無包蟲病核酸檢測相關(guān)的產(chǎn)品，我國已有細(xì)粒棘球蚴和多房棘球蚴核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）產(chǎn)品獲批進(jìn)入國家藥監(jiān)局創(chuàng)新醫(yī)療器械特別審查程序，該產(chǎn)品臨床應(yīng)用的安全有效性仍然在驗證過程中。

   表1 我國已批準(zhǔn)的包蟲病檢測試劑

　　四、病原體相關(guān)游離DNA（cfDNA）簡介

　　近年來，隨著對寄生蟲血漿游離DNA（cfDNA）的研究，cfDNA在寄生蟲病的檢測中得到了快速發(fā)展，目前已有應(yīng)用cfDNA檢測對瘧原蟲、弓形蟲、利士曼原蟲、錐蟲、血吸蟲等寄生蟲感染進(jìn)行輔助診斷的報道。針對寄生蟲感染后cfDNA的來源，可能是蟲體或蟲卵的細(xì)胞或碎片在增生、成熟、脫落、腐爛、崩解等過程中主動分泌或被動釋放出內(nèi)部的DNA進(jìn)入宿主體液循環(huán)系統(tǒng)產(chǎn)生；也有研究表明絳蟲主動分泌的外泌體是寄生蟲感染后患者體內(nèi)出現(xiàn)蟲源DNA的重要原因。基于上述研究，檢測樣本中細(xì)粒棘球蚴和多房棘球蚴兩種病原體游離DNA為該疾病的輔助診斷提供了理論基礎(chǔ)。

　　五、檢測游離DNA的考量

　　寄生蟲源cfDNA的檢測在臨床應(yīng)用中存在一定優(yōu)勢，一方面，可根據(jù)特異性的基因序列對兩種不同種類的病原體進(jìn)行分型，從而達(dá)到對疾病進(jìn)行分型的目的；另一方面，患者樣本中存在寄生蟲DNA在一定程度上可提示患者可能感染相關(guān)病原體。然而，作為一個新的標(biāo)志物，能夠應(yīng)用于臨床，在現(xiàn)有的理論基礎(chǔ)上，還應(yīng)進(jìn)一步研究。一是，應(yīng)進(jìn)一步明確患者不同疾病進(jìn)展階段血漿游離DNA濃度的變化，并以此為基礎(chǔ)，確定該標(biāo)志的臨床預(yù)期用途（如：疾病早篩、輔助診斷、鑒別診斷及治療監(jiān)測等）；二是，應(yīng)依據(jù)標(biāo)志物擬定的預(yù)期用途，進(jìn)一步對該標(biāo)志物進(jìn)行臨床驗證，臨床研究應(yīng)考慮入組人群、對照方法等，如該標(biāo)志用于疾病的鑒別診斷，則入組人群應(yīng)為包蟲病疑似人群，其中不同大小占位性病變病例、不同病灶退變（CE4、CE5）病例、不同基因型病例等均應(yīng)入組，此外還應(yīng)考慮非包蟲病病例的干擾。用于疾病鑒別診斷用途的臨床研究其對照方法應(yīng)為疾病確診的標(biāo)準(zhǔn)即病原學(xué)檢查。

　　六、總結(jié)

　　我國包蟲病防控形勢嚴(yán)峻，包蟲病流行區(qū)多為相對偏遠(yuǎn)、落后的地區(qū)，目前包蟲病的診斷很大程度上依賴于影像學(xué)和病原學(xué)，這不僅對臨床醫(yī)生專業(yè)技術(shù)水平要求較高，還存在一定程度的誤診、漏診的風(fēng)險。血漿游離cfDNA檢測操作較為簡便，結(jié)果易于解讀，如能按預(yù)期應(yīng)用于臨床，將對包蟲病的診斷起到積極作用。參考文獻(xiàn)：[1] 中國醫(yī)師協(xié)會外科醫(yī)師分會包蟲病外科專業(yè)委員會.肝兩型包蟲病診斷與治療專家共識（2015版） [J] . 中華消化外科雜志,2015,14( 4 ): 253–264.[2] 中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn). 包蟲病診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS 257–2006).[3] 何順偉，李曉燕，趙瑞雪等，體液游離寄生蟲DNA在寄生蟲病診斷中的研究進(jìn)展.中國人獸共患病學(xué)報.2017，33（2）：163–169.徐超 傅繼歡 供稿