導讀

眾所周知，USP<231> 重金屬章節已經于2018年01月01日正式刪除，USP增加了<232>、<233>兩個通則用于控制元素雜質。此外還有ICH3D元素雜質也是這方面的指南。

1分析干擾 

2標準及試劑要求 

標準溶液主要用于標化儀器。用于配制樣品及標準溶液的所有試劑應不含有元素雜質。可以采用市售的單個元素或多個元素的標準溶液。用于微量分析的標準溶液的有效期是有期限的。一般與濃度、容器的類型、儲存條件等都有關系。濃度小于10ppm(W/V)有效期應不得過24小時（來源于USP<730>），除非另有驗證數據證明。

檢驗用水可以用實驗室制備的純化水，濃硝酸、鹽酸可以采用市售的專門用于微量元素分析的試劑。

3標準曲線校正 

校正標準溶液

用于校正的標準溶液應每日重新稀釋配制。所有校正標準使用50ml聚丙烯離心管，用2% HNO₃ / 1%鹽酸溶液稀釋至50ml。

校正范圍

對于每個目標元素，校準范圍至少應該是0.5 J到1.5 J。建議對所有元素進行校準小于0.5 J(即0.1 J和/或0.2 J必要的）。

J：元素限值/稀釋倍數；

一般情況下，校正曲線的標準溶液濃度應不得少于2個點，對于分析方法經過驗證的限度檢測，可以用單點校正法。

4樣品溶液的配制 

樣品溶液的配制方法由樣品本身性質決定，主要有以下四種配制方法：

一、直接法：主要適用于液體類樣品及其他無需處理樣品

二、直接水溶液：適用于溶于水的樣品

三、直接有機溶液：適用于溶于有機溶劑的樣品。該方法可能需要使用選擇性氣體。

四、間接溶液法：適用于不溶于水或有機溶劑的樣品。推薦總金屬提取得到間接溶液，樣品采用密閉容器消化等類似方式。

5樣品的消解 

一般情況下，大部分樣品可以用HNO3和HCl的混合酸消解完全，但是需要注意安全性問題。

6方法驗證 

根據USP<1225>分析方法驗證要求，方法可分為類別1（含量），類別2（定量雜質及限度測定），類別4（鑒別）。根據USP<1225>對不同類別的要求進行驗證。

準確度：

標準溶液：用標準溶液配制含50%J~150J 目標元素的標準溶液；

樣品溶液：在樣品消化或溶解之前，加標配制含50%J~150J 目標元素的樣品溶液；

接受標準：類別1：平均回收率在95.0~105.0%內。類別2：每個雜質的三份不同濃度的元素回收率均在70%~150%之間；

精密度

重復性：樣品溶液：6份樣品（相同批次），分別按照限度加入標準元素雜質；

接受標準：類別1：RSD%（N=6）應不得過5.0%。類別2：每種元素雜質的RSD%（N=6）應不得過20%。

中間精密度：由不同的實驗員，在不同的天或用不同的儀器，按重復性測定；（應至少包括3個不同因素，例如，1個實驗員分不同的3天分別按重復性測定；或者1個實驗員分2天采用2套儀器，分別按重復性測定；再或者3個實驗員用同一臺儀器分別測定）

接受標準：類別1：原料藥及制劑含量，RSD%應不得過8.0%；類別2：每種元素雜質的RSD%應不得過25%。

專屬性

方法應該能夠確保在樣本種，每個元素都能被明確的檢測出。

定量限

定量限QL=10份空白溶液的標準偏差×10。也可用其他合適的方法確定。

接受標準：應至少能夠定量準確分析至限度的50%。

線性

配制的線性溶液的濃度應至少包括2點標準溶液及空白（總共3點），線性濃度應包含需要檢測樣品的濃度，標準曲線應采用合適的統計學方法，例如最小二聚回歸。

接受標準：類別1：相關系數R不小于0.995；

類別2：相關系數R不小于0.99；

范圍

范圍應包括樣品的最高、最低濃度具有精密度、準確性、線性的要求。

接受標準：類別1：居中100.0%濃度的驗證范圍為80.0%~120.0%；非居中濃度的驗證范圍為：比下限低10%，比上限高10%。含量均勻度：70.0%~130.0%；類別2：驗證范圍為70.0%~130.0%；

備注：上述驗證指標均來自于USP<730>，藥典標準為法定最低標準。

耐用性

通過修改實驗參數來得到，應符合中間精密度的要求。

參考資料

USP<232>

USP<233>

USP<1225>

USP<730>

ICH3D元素雜質