腫瘤標志物定量檢測試劑產品種類豐富、數量眾多。已發布的《腫瘤標志物類定量檢測試劑注冊審查指導原則（2023年修訂版）》作為該類產品技術審評的主要依據，詳細地陳述了各部分資料的要求。本文結合上述指導原則的相關要求及申報資料的實際情況對該類產品的一些審評常見關注點進行進一步的介紹。

1.注冊申報資料格式關注點

《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告（2021年第122號）》中對于簽章和公證的要求中提到：“境內產品申報資料如無特別說明的，應當由注冊申請人簽章。進口產品申報資料如無特殊說明，原文資料均應當由注冊申請人簽章，中文資料由代理人簽章。進口產品申報資料中由境外注冊申請人提供的關聯文件、符合性聲明以及說明書、標簽應當提交由注冊申請人所在地公證機構出具的公證件。”[1]。簽章和公證文件的合規性，是審評的重點關注點。目前在申報資料中常遇到申報資料缺少簽章、進口產品的說明書及標簽未進行公證等情況，應注意申報資料格式的合規性要求。

2.性能研究資料中審評關注點

2.1正確度

根據《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導原則》中的描述，正確度指的是無窮多次重復測量所得量值的平均值與一個參考量值間的一致程度[2]。

參照《腫瘤標志物類定量檢測試劑注冊審查指導原則（2023年修訂版）》中的要求，該類試劑對于正確度的評價方法包括使用參考物質的正確度評價、方法學比對、回收試驗。不同的方法有各自的限制條件，采用參考物質進行正確度評價時，參考物質一般是指具有互換性的有證參考物質，公認的參考品、標準品，參考測量程序賦值的臨床樣本；采用方法學比對進行研究時，應納入濃度水平覆蓋申報試劑測量區間的臨床樣本，與同類試劑或者參考測量程序進行比較分析。與前兩種方法相比，采用回收方法進行正確度評價的限制條件較多，對于當前無該標志物參考物質及參考測量程序、且無已上市同類試劑，同時可獲得與被測量一致的純品的試劑，才可采用回收試驗進行正確度評價。上述三種不同的方法可根據限制條件及實際情況選擇合適的一種進行正確度評價。

在正確度研究中，常遇到的不符合目前審評要求的情況有采用校準品進行正確度驗證或者使用非標準物質進行回收試驗等情況，需要采用合適的方法重新研究并補充資料。

2.2 分析特異性

分析特異性研究中，除了常規要求外，也應根據產品自身特點對可能會造成干擾的物質進行評估。例如采用生物素-鏈霉親和素的檢測系統，由于近年來部分人群高劑量生物素攝入等狀況，血液樣本中存在代謝進入血液的生物素會與檢驗系統中的鏈霉親和素相結合，影響了檢測系統的正常反應，易引起檢測結果不準確進而導致不良事件，采用該類檢測原理的試劑在設計開發時需考慮到這些問題的存在及如何實施風險管控[3]。

2.3可報告范圍

可報告范圍也是決定檢測試劑能否滿足臨床需求的重要因素之一。以甲胎蛋白（AFP）檢測試劑為例，當其預期用途為原發性肝癌的治療監測時，可報告范圍應考慮到臨床上已確診為原發性肝癌患者AFP水平的范圍，一些文獻數據顯示研究中入組的原發性肝癌患者血清樣本中AFP水平高達41318.4 ± 14953 ng/mL（Mean ± SD） [4]。不同的腫瘤標志物在體內的表達水平也各有差異，預期用途不同時對產品可報告范圍的需求也不同。申報試劑能否準確檢測不同濃度的臨床樣本、是否涵蓋醫學決定水平、可報告范圍是否滿足申報預期用途等，應在試劑設計開發時進行充分考慮。

2.4適用機型

關于該類試劑如有多個適用機型時申報資料的準備，可以參照《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導原則》及已公布共性問題的要求。臨床前分析性能評估要求已明確為“應提交在不同機型上分別進行分析性能評估的資料”。是否需要針對不同機型分別提交臨床評價的資料，需要根據不同機型上反應體系等的差異及受益-風險情況進行評估。例如當不同適用機型上試劑和樣本加樣量均無差異或雖有差異，但最終反應體系中試劑、樣本加樣量比例相同時，一般無需分別針對不同機型進行臨床評價。

3.臨床評價申報資料中審評關注點

臨床評價申報資料中首要的關注點是臨床評價方式的選擇。對于臨床評價方式的選擇，可根據申報產品屬不屬于《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》進行判斷。如能夠證明申報產品與《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》中相應的產品具有等同性，申報產品可以免于進行臨床試驗進行評價，當然也可以選擇臨床試驗進行評價；當申報產品與上述目錄中的產品不具備等同性時，應進行臨床試驗。這里比較容易出現的問題是：與《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》中產品進行比較時，疏忽了預期用途的比較。腫瘤標志物定量檢測試劑根據標志物與腫瘤疾病進展的關系，預期用途可能會涉及輔助診斷、治療監測等不同情況，目前《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》中腫瘤標志物定量檢測試劑的預期用途均為治療監測/療效監測，其他預期用途不屬于免于臨床試驗的范圍。

其次，臨床評價時對比試劑的選擇。選擇與已上市產品進行比較研究時，應選擇境內已批準上市、臨床普遍認為質量較好的同類產品作為對比試劑，不建議選擇性能劣于待評價試劑的試劑作為對比試劑。在進行臨床評價時，存在易疏忽卻可能導致臨床評價不合格的一些情況，例如評價過程中校準及質控未按試劑各自配套的校準品及質控品的說明使用、檢測儀器不屬于試劑的適用機型、使用的樣本及試劑未滿足各自的儲存條件和有效期的要求等等，需要避免這些問題的出現。

對于入組的受試者/樣本，除樣本量、樣本與數據的管理、數據溯源等基本要求外，入組的樣本應與該產品的預期適用人群一致，具有與該腫瘤標志物相關惡性腫瘤的臨床背景。例如在審評總前列腺特異性抗原（tPSA）檢測試劑時，常遇到申請人在進行臨床評價時僅納入前列腺增生等良性病變樣本，未包含前列腺惡性腫瘤患者樣本；由于申報產品的預期用途為惡性腫瘤患者的治療監測，良性病變患者非適用人群，該樣本入組情況未能反映實際使用情況，因此，需補充前列腺惡性腫瘤患者的樣本重新進行評價。

此外，對于既無同類上市產品也未納入免臨床目錄的全新產品，不符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法（國家市場監督管理總局令第48號）》規定的免于臨床試驗的情形，應采用臨床試驗方式進行臨床評價。這里需要注意的是，對于全新的腫瘤標志物定量檢測試劑的臨床試驗，應包含不少于100例受試者的縱向研究。

隨著科學發展和技術進步，多種全新的腫瘤標志物定量檢測試劑不斷涌現，正確選擇臨床評價路徑有助于降低成本及縮短注冊申報時間。

4.其他

其他的一些情形，主要有說明書中預期用途及檢驗結果的解釋等信息與研究資料是否嚴格對應，也是申報資料中的常見問題和審評的關注點。還有說明書內容是否根據研究資料及《體外診斷試劑說明書編寫指導原則（2023年修訂版）》進行規范。另外該類試劑為定量檢測試劑，檢測結果以具體量值呈現，在產品開發及注冊申報資料中也應注意量值呈現的有效數字，體現出測量的真實精度水平，不應隨意更改。

需要說明的是，以上內容闡述了該類試劑注冊申報資料中需普遍關注的一些情況。除此之外，申請人需參考《腫瘤標志物類定量檢測試劑注冊審查指導原則（2023年修訂版）》要求準備注冊申報資料。

小結

腫瘤標志物定量檢測試劑已在臨床上廣泛使用，如何確保申報產品的安全性與有效性仍是上市前技術審評的核心關注點。本文就該類試劑注冊申報資料技術審評時的一些常見關注點進行了介紹，以供相關行業人員進行參考。由于篇幅等限制，不能詳盡列舉所有的情形。建議相關人員關注國家藥品監督管理局以及國家藥品監督管理局醫療器械技術審評中心公布的其他規范性文件及技術文件，如《腫瘤標志物類定量檢測試劑注冊審查指導原則（2023年修訂版）》對該類試劑注冊申報資料的基本內容及重點內容均進行了詳細陳述，是該類產品技術審評的總體主要依據；《體外診斷試劑參考區間確定注冊審查指導原則》、《免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價技術指導原則》、《體外診斷試劑主要原材料研究注冊審查指導原則》、《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》等通用性技術指導文件更注重于部分內容更細化的要求；還有國家藥品監督管理局醫療器械技術審評中心官方網站不定期公布的各類共性問題及解答如“定量檢測體外診斷試劑的精密度試驗設計，是否要對各影響因素進行單獨評估”、“體外診斷試劑檢出限及線性研究中批次及機型應如何考慮”等等。上述文件均可以作為腫瘤標志物定量檢測試劑注冊申報資料準備或進行技術審評的依據，建議系統性地掌握。

參考文獻

[1] 國家藥監局.關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告（2021年第122號）. [EB]. 2021-09-30.

[2] 國家藥品監督管理局醫療器械技術審評中心. 國家藥監局器審中心關于發布定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導原則的通告(2022年第32號). [EB]. 2022-08-26.

[3] 國家藥品監督管理局醫療器械技術審評中心.《生物素-（鏈霉）親和素系統及其在體外診斷試劑中的應用》[EB].2024-02-28.

[4] Tianying Ren, Xu Hou, Xin Zhang, et al. Validation of combined AFP, AFP-L3, and PIVKA II for diagnosis and monitoring of hepatocellular carcinoma in Chinese patients[J]. Heliyon, 2023, 9(11): e21906 .