內(nèi)容提要：重組膠原蛋白已經(jīng)逐漸進(jìn)入頂尖原料成分的行列。雖然市場(chǎng)前景廣闊，但也存在很多爭(zhēng)議，尤其作為醫(yī)療器械的主要成分審評(píng)過(guò)程存在許多難點(diǎn)。文章基于注冊(cè)審評(píng)的視角，對(duì)含重組膠原蛋白二類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品的常見(jiàn)審評(píng)共性問(wèn)題進(jìn)行思考羅列，并針對(duì)相關(guān)對(duì)策進(jìn)行探討，以期為科學(xué)監(jiān)管提供技術(shù)支撐。

關(guān) 鍵 詞：重組膠原蛋白 技術(shù)審評(píng) 對(duì)策探討 醫(yī)療器械

近年來(lái)，得益于醫(yī)美市場(chǎng)的崛起以及對(duì)醫(yī)美術(shù)后創(chuàng)面護(hù)理的需求不斷，我國(guó)醫(yī)用敷料市場(chǎng)呈現(xiàn)出強(qiáng)勁的增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)。其中，重組膠原蛋白由于具有良好的生物學(xué)相容性、細(xì)胞黏附性、促新細(xì)胞形成以及促進(jìn)皮細(xì)胞生長(zhǎng)等功能，且與源于動(dòng)物組織提取的膠原蛋白相比具有可加工性更高、無(wú)病毒隱患、水溶性好以及排異反應(yīng)低等優(yōu)點(diǎn)，成為目前敷料類(lèi)產(chǎn)品的熱門(mén)成分。隨著市場(chǎng)需求量增加，相關(guān)產(chǎn)品注冊(cè)申報(bào)數(shù)量驟增，產(chǎn)品型式多樣化，不僅單一主成分的產(chǎn)品，重組膠原蛋白與其他多種主要成分（如透明質(zhì)酸鈉）混合制成的復(fù)合產(chǎn)品申報(bào)量也大幅增加，相關(guān)產(chǎn)品的各種問(wèn)題也不斷凸顯。如果不加強(qiáng)對(duì)相關(guān)問(wèn)題的管控，不僅產(chǎn)品質(zhì)量得不到保障，嚴(yán)重時(shí)可能會(huì)導(dǎo)致不良事件的發(fā)生，危害使用者生命健康。因此，本文基于注冊(cè)審評(píng)的視角，對(duì)含重組膠原蛋白二類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品的審評(píng)共性問(wèn)題進(jìn)行思考羅列，并針對(duì)相關(guān)對(duì)策進(jìn)行探討，以期待為科學(xué)監(jiān)管提供技術(shù)支撐。

1.含重組膠原蛋白二類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀

當(dāng)前我國(guó)重組膠原蛋白市場(chǎng)格局較為分散，行業(yè)集中度低[1]。截至2024 年11 月，經(jīng)搜國(guó)家局?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)中國(guó)產(chǎn)二類(lèi)重組膠原蛋白類(lèi)產(chǎn)品共857 件，涉及企業(yè)300 余家，其中湖南、江蘇、黑龍江、山西的企業(yè)獲得注冊(cè)證數(shù)量較多。雖然產(chǎn)品數(shù)量較大，涉及企業(yè)數(shù)量較多，但其中多數(shù)企業(yè)原材料均依賴(lài)從第三方供應(yīng)商采購(gòu)實(shí)現(xiàn)，并沒(méi)有自己的原材料研發(fā)、生產(chǎn)工藝。而目前我國(guó)能夠?qū)崿F(xiàn)重組膠原蛋白原料規(guī)模化生產(chǎn)的企業(yè)主要包括山西錦波生物、陜西巨子生物、江蘇創(chuàng)健醫(yī)療以及江蘇聚源等。以江蘇省為例，現(xiàn)有注冊(cè)證128 張，涉及企業(yè)24 家，省內(nèi)能夠?qū)崿F(xiàn)原材料規(guī)模化生產(chǎn)的企業(yè)主要為江蘇創(chuàng)健醫(yī)療以及江蘇聚源，其中江蘇創(chuàng)健醫(yī)療以經(jīng)營(yíng)終端產(chǎn)品為主兼營(yíng)原料業(yè)務(wù)，獲證20 余張占比江蘇總獲證產(chǎn)品近20%。江蘇聚源作為全球最大的重組膠原蛋白原料供貨商，則以經(jīng)營(yíng)原料業(yè)務(wù)為主兼營(yíng)終端產(chǎn)品，江蘇省內(nèi)相關(guān)獲證產(chǎn)品多數(shù)原料采購(gòu)自江蘇聚源。在原料制備方面，國(guó)內(nèi)以大腸桿菌和畢赤酵母為主要表達(dá)體系，完成了重組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、ⅩⅦ型膠原蛋白原料的規(guī)模化、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，其中，江蘇創(chuàng)健以及江蘇聚源均以畢赤酵母為主要表達(dá)體系。由于合成技術(shù)水平受限，國(guó)內(nèi)外企業(yè)雖然能夠?qū)崿F(xiàn)全長(zhǎng)重組膠原蛋白的表達(dá)，但表達(dá)的全長(zhǎng)膠原蛋白多數(shù)無(wú)法形成穩(wěn)定的三螺旋高級(jí)結(jié)構(gòu)，目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上暫未出現(xiàn)重組人膠原蛋白器械產(chǎn)品[1]。

2.含重組膠原蛋白二類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品審評(píng)共性問(wèn)題及對(duì)策

自2021 年起，國(guó)家藥監(jiān)局先后發(fā)布了《重組膠原蛋白類(lèi)醫(yī)療產(chǎn)品分類(lèi)界定原則》（以下簡(jiǎn)稱(chēng)《界定原則》）《重組膠原蛋白生物材料命名指導(dǎo)原則》《重組膠原蛋白創(chuàng)面敷料注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》《重組人源化膠原蛋白原材料評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則》等一系列重組膠原蛋白相關(guān)指導(dǎo)性文件，原材料相關(guān)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1849-2022《重組膠原蛋白》、YY/T 1888-2023《重組人源化膠原蛋白》也相繼發(fā)布，相關(guān)敷料成品的標(biāo)準(zhǔn)化、不可吸收性試驗(yàn)研究工作也在進(jìn)行中，含重組膠原蛋白醫(yī)療器械產(chǎn)品的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)體系逐步完善，為注冊(cè)人申報(bào)和技術(shù)審評(píng)部門(mén)提供參考指明方向。實(shí)際審評(píng)中，由于該類(lèi)產(chǎn)品的特殊性、注冊(cè)申報(bào)企業(yè)水平的參差不齊，仍出現(xiàn)了很多共性問(wèn)題，同時(shí)，對(duì)于一些含有重組膠原蛋白的多主成分產(chǎn)品的相關(guān)問(wèn)題也不斷凸顯，本文將相關(guān)共性問(wèn)題進(jìn)行羅列，并對(duì)相關(guān)對(duì)策進(jìn)行探討。

2.1 不可吸收性問(wèn)題

《界定原則》指出，重組膠原蛋白類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品的管理屬性應(yīng)當(dāng)依據(jù)產(chǎn)品預(yù)期用途、作用機(jī)制等進(jìn)行綜合判定。重組膠原蛋白類(lèi)產(chǎn)品的管理類(lèi)別應(yīng)當(dāng)不低于第二類(lèi)，作為醫(yī)用敷料應(yīng)用時(shí)，若產(chǎn)品可部分或者全部被人體吸收，或者用于慢性創(chuàng)面，按照第三類(lèi)醫(yī)療器械管理；若產(chǎn)品不可被人體吸收且用于非慢性創(chuàng)面，按照第二類(lèi)醫(yī)療器械管理。而實(shí)際審評(píng)中“不可吸收性”成為審評(píng)的一大難點(diǎn)問(wèn)題。由于成品中成分復(fù)雜，原材料的分子量、成品的滅菌及加工工藝、與人體接觸的部位、預(yù)期接觸的創(chuàng)面類(lèi)型、預(yù)期接觸時(shí)間均影響產(chǎn)品的人體吸收性，加之目前沒(méi)有完全適用的可吸收性試驗(yàn)方法和具體評(píng)價(jià)指標(biāo)，目前沒(méi)有統(tǒng)一認(rèn)可的可吸收性執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)。申報(bào)企業(yè)多參考GB/T 27818-2011《化學(xué)品 皮膚吸收體外試驗(yàn)方法》中方法學(xué)人工制造創(chuàng)面后進(jìn)行試驗(yàn)，亦有部分企業(yè)參照GB/T 27825-2011《化學(xué)品 皮膚吸收 體內(nèi)試驗(yàn)方法》進(jìn)行相應(yīng)吸收試驗(yàn)，但由于該兩則標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)是針對(duì)化學(xué)品經(jīng)（完整）皮膚吸收測(cè)試的體內(nèi)、體外試驗(yàn)，其中體外試驗(yàn)法主要是化學(xué)物質(zhì)透過(guò)完整或部分厚度的動(dòng)物或人體皮膚達(dá)到預(yù)定的液體儲(chǔ)存空間，體內(nèi)試驗(yàn)法是對(duì)受試物通過(guò)皮膚進(jìn)入全身各部位的穿透性測(cè)定，而含有重組膠原蛋白二類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品基本應(yīng)用在破裂或損傷表面或黏膜，與該標(biāo)準(zhǔn)適用的場(chǎng)景不同且測(cè)試目的也不盡相同，相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)針對(duì)“透皮”、“穿透性”性測(cè)試，強(qiáng)調(diào)穿透性，而《界定原則》中強(qiáng)調(diào)的是“吸收性”。但由于目前沒(méi)有其他可參照的具體標(biāo)準(zhǔn)，申請(qǐng)企業(yè)仍然可以參照相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行試驗(yàn)，但需考慮產(chǎn)品具體聲稱(chēng)的適用范圍（包括接觸部位、具體創(chuàng)面類(lèi)型）以及具體的接觸時(shí)間進(jìn)行試驗(yàn)。

另外，由于大部分企業(yè)原材料來(lái)源于外購(gòu)，關(guān)于“原材料的不可吸收性報(bào)告是否可采納”問(wèn)題也是目前討論的焦點(diǎn)。從法規(guī)角度，《界定原則》中相關(guān)要求針對(duì)的是醫(yī)療器械成品而非原材料，同時(shí)，對(duì)于原材料后續(xù)的加工可能造成原材料的降解或改變，尤其是滅菌工藝。目前該類(lèi)產(chǎn)品常用的滅菌方式為濕熱滅菌以及輻照滅菌，這兩種滅菌方式均可能對(duì)重組膠原蛋白成分存在不同程度的影響。其中濕熱滅菌由于高溫、高濕的環(huán)境可能會(huì)造成重組膠原蛋白成分的降解等改變從而導(dǎo)致相關(guān)原材料的不可吸收性改變；而輻照滅菌部分生產(chǎn)企業(yè)表示對(duì)不同狀態(tài)下的該類(lèi)產(chǎn)品可能存在相反的影響，如輻照滅菌對(duì)于凍干狀態(tài)的產(chǎn)品可能會(huì)造成主成分的降解，而對(duì)于液體等多成分混合狀態(tài)的可能會(huì)導(dǎo)致聚合反應(yīng)。所以，相關(guān)試驗(yàn)應(yīng)當(dāng)結(jié)合產(chǎn)品臨床使用情況針對(duì)成品展開(kāi)，才能實(shí)際評(píng)價(jià)終產(chǎn)品中相關(guān)成分的可吸收性。由于上文中提及申報(bào)產(chǎn)品多僅參照GB/T 27818-2011 中的方法學(xué)，部分企業(yè)試驗(yàn)時(shí)僅計(jì)算接收液以及接收池清洗液中數(shù)據(jù)，未考慮實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)仍殘留在皮膚內(nèi)的數(shù)量，且由于成品中重組膠原蛋白含量本就較低，使用成品試驗(yàn)可能因接收池中含量過(guò)低而導(dǎo)致檢測(cè)不準(zhǔn)確。那么綜合上述情況，申請(qǐng)企業(yè)應(yīng)當(dāng)結(jié)合產(chǎn)品的實(shí)際情況，并綜合考慮到成分的配比、具體工藝等情況后選擇合適的試驗(yàn)方案。目前，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械標(biāo)準(zhǔn)管理中心已組織山東省醫(yī)療器械和藥品包裝檢驗(yàn)研究院或全國(guó)醫(yī)用防護(hù)器械標(biāo)準(zhǔn)化工作組（SWG30）開(kāi)展相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)預(yù)研工作，期待后續(xù)具體可執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布。

2.2 原材料問(wèn)題

原材料是醫(yī)療器械產(chǎn)品質(zhì)量的基礎(chǔ)，直接影響產(chǎn)品的安全性、有效性和穩(wěn)定性。由于目前多數(shù)含重組膠原蛋白醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)原材料均依賴(lài)從第三方供應(yīng)商采購(gòu)實(shí)現(xiàn)，因此優(yōu)質(zhì)的重組膠原蛋白原材料供應(yīng)商和穩(wěn)定的供應(yīng)鏈?zhǔn)轻t(yī)療器械生產(chǎn)的重要保障。由于重組基因片段的型別與序列的不同，表達(dá)體系的差異，致使獲得的產(chǎn)物不盡相同，與天然膠原蛋白相比，氨基酸組成、分子量大小和（或）結(jié)構(gòu)可能差異很大，甚至是個(gè)全新的蛋白質(zhì)。因此，宜對(duì)其進(jìn)行全面的特性分析，進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制。目前重組人源化膠原蛋白的生物合成主要在大腸桿菌和畢赤酵母中進(jìn)行，前者生產(chǎn)的膠原蛋白雖然產(chǎn)量高，但產(chǎn)物存在有內(nèi)毒素的風(fēng)險(xiǎn)，且發(fā)酵后處理較為繁瑣，而使用酵母生產(chǎn)膠原蛋白又存在發(fā)酵中使用甲醇誘導(dǎo)表達(dá)的問(wèn)題，存在一定程度的生產(chǎn)安全隱患[2]。應(yīng)通過(guò)成品檢測(cè)、過(guò)程控制和工藝驗(yàn)證相結(jié)合的方法，確保各類(lèi)雜質(zhì)已去除或降低至可接受水平。《重組膠原蛋白創(chuàng)面敷料注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》中規(guī)定“應(yīng)提供申報(bào)產(chǎn)品中重組膠原蛋白成分的質(zhì)量控制相關(guān)資料。建議參照YY/T 1849標(biāo)準(zhǔn)及其他相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求（如今后有適用的其他標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，應(yīng)參照?qǐng)?zhí)行），提供原材料相關(guān)質(zhì)控資料”[3]。申報(bào)產(chǎn)品需根據(jù)不同的預(yù)期用途及使用部位、不同生產(chǎn)工藝、預(yù)期使用效果和最終醫(yī)療器械的狀態(tài)，選擇適用的指標(biāo)；根據(jù)重組膠原蛋白原材料是否經(jīng)過(guò)化學(xué)修飾，宜提供修飾劑的殘留量、降解性能等的研究，提供相應(yīng)的研究報(bào)告。因此，對(duì)重組膠原蛋白原材料的控制是對(duì)該類(lèi)產(chǎn)品審評(píng)的核心要點(diǎn)。但是由于相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中，并未對(duì)具體指標(biāo)進(jìn)行要求，以純度、含量、細(xì)菌內(nèi)毒素指標(biāo)為例，不同企業(yè)或同一企業(yè)常常生產(chǎn)不同純度、含量、細(xì)菌內(nèi)毒素要求的原材料用于不同的用途，原材料價(jià)格相差較大，由于目前未有相應(yīng)要求在成品技術(shù)要求中控制原材料的具體性能指標(biāo)，可能導(dǎo)致部分企業(yè)在申請(qǐng)注冊(cè)時(shí)采用純度、含量較高，細(xì)菌內(nèi)毒素較低的原材料進(jìn)行檢驗(yàn)以及相關(guān)注冊(cè)申報(bào)工作，而后續(xù)生產(chǎn)中使用成分較低，純度、含量較低以及細(xì)菌內(nèi)毒素較高的原材料進(jìn)行生產(chǎn)，加大了后續(xù)監(jiān)管的難度，隨意更換核心原材料是目前該類(lèi)產(chǎn)品存在的一個(gè)較大風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，因此建議在成品技術(shù)要求中增加相應(yīng)原材料信息的要求可有效控制相應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于重組人源化膠原蛋白原材料應(yīng)按照《重組人源化膠原蛋白原材料評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則》展開(kāi)評(píng)價(jià)并提供相應(yīng)研究資料。

2.3 含防腐劑產(chǎn)品相關(guān)問(wèn)題

為了維持相關(guān)產(chǎn)品的穩(wěn)定性和延長(zhǎng)產(chǎn)品貨架有效期，許多非無(wú)菌狀態(tài)提供的含重組膠原蛋白二類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品常常添加防腐成分來(lái)抑制微生物的生長(zhǎng)，如尼泊金酯類(lèi)、苯氧乙醇，如產(chǎn)品添加相應(yīng)成分的添加量過(guò)高可導(dǎo)致產(chǎn)品可發(fā)揮抗菌/ 抑菌作用，由于通過(guò)發(fā)揮抗菌/ 抑菌作用而實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品預(yù)期用途的產(chǎn)品通常為藥械組合或不按醫(yī)療器械管理，因此，相關(guān)成分的不當(dāng)使用可能影響產(chǎn)品的類(lèi)別屬性甚至影響用械安全。對(duì)于含有防腐劑的相關(guān)產(chǎn)品，需提交所添加防腐劑種類(lèi)在其添加量下不發(fā)揮抗菌作用的研究資料或其他相關(guān)支持性資料。抗菌或抑菌作用可參考WS/T 650《抗菌和抑菌效果評(píng)價(jià)方法》試驗(yàn)，試驗(yàn)中染菌載體與樣品作用時(shí)間和說(shuō)明書(shū)一致。抑菌率<50%或殺菌率<90%時(shí)不產(chǎn)生抑菌或抗菌作用。參考《抗菌藥物藥代動(dòng)力學(xué)藥效學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，構(gòu)建符合臨床的感染動(dòng)物模型，用產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)指定方法上樣，計(jì)算最低抑菌/ 殺菌濃度，描繪時(shí)間- 殺菌曲線等。還可參考《抗菌藥物臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》進(jìn)行綜合判定[4]。需注意上述研究均針對(duì)含有防腐成分的產(chǎn)品進(jìn)行，對(duì)于一些強(qiáng)抗菌劑成分通常是不可添加的。

2.4 性能指標(biāo)相關(guān)問(wèn)題

《重組膠原蛋白創(chuàng)面敷料注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》中規(guī)定了該類(lèi)產(chǎn)品性能指標(biāo)要求，為了確保產(chǎn)品的安全有效、質(zhì)量可控，需結(jié)合產(chǎn)品的實(shí)際情況，對(duì)核心成分進(jìn)行必要的鑒別以及含量檢測(cè)，確保成品中重組膠原蛋白的添加情況，高質(zhì)量的鑒別可以提供產(chǎn)品的可靠性，合理的含量檢測(cè)方法可以確保產(chǎn)品的有效性。YY/T 1849標(biāo)準(zhǔn)中給出了重組膠原蛋白的鑒別方法，包括肽圖、末端氨基酸序列、分子量以及等電點(diǎn)，但由于成品中重組膠原蛋白含量較低，標(biāo)準(zhǔn)中鑒別指標(biāo)存在一定實(shí)現(xiàn)難度。陳永霞等[5]研究了重組膠原蛋白液體敷料中膠原蛋白的鑒別方法適用性，使用肽圖、末端氨基酸序列及等電聚焦電泳法對(duì)樣品中的重組膠原液體敷料進(jìn)行了鑒別，檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)肽圖法、N末端氨基酸序列法對(duì)該樣品具有適用性。而用現(xiàn)有的等電聚焦電泳法未發(fā)現(xiàn)有條帶檢出，該方法不適用。

除了YY/T 1849 標(biāo)準(zhǔn)中給出的鑒別方法，目前申報(bào)企業(yè)中還存在采用《中華人民共和國(guó)藥典》中凝膠電泳法、紅外分光光度法、明膠法以及福林酚法等鑒別方法，但上述鑒別方法特異性不高，并不能可靠實(shí)現(xiàn)對(duì)重組膠原蛋白成分的鑒別。重組膠原蛋白的鑒別方法較多，企業(yè)需要綜合考慮原料特性、產(chǎn)品定位以及設(shè)備條件等因素，確定合適的重組膠原蛋白鑒別方法。

對(duì)于含量指標(biāo)，YY/T 1849 標(biāo)準(zhǔn)中給出凱氏定氮法以及特征多肽法（高效液相色譜- 質(zhì)譜法）兩種試驗(yàn)方法，特征多肽法是一種新興方法，基于液相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，通過(guò)定量特征肽段實(shí)現(xiàn)精確定量，具有高特異性和準(zhǔn)確性[6]。張曉蕓等[7] 用高效液相色譜法實(shí)現(xiàn)了對(duì)重組膠原蛋白的精確測(cè)定，有較好的參考價(jià)值，但該方法容易受到空白輔料的影響，對(duì)于不同的產(chǎn)品普適性較差。由于凱氏定氮法相較于其他方法不需要標(biāo)準(zhǔn)樣品，操作相對(duì)比較簡(jiǎn)單、實(shí)驗(yàn)費(fèi)用較低，是目前已上市產(chǎn)品采用的主要含量檢測(cè)方法。但由于凱氏定氮法最終測(cè)定的是總有機(jī)氮，成品中添加不同成分的基材和輔料，會(huì)導(dǎo)致成品中氮含量具有不確定性，計(jì)算含量時(shí)需排除非蛋白氮的干擾，如敷料中常見(jiàn)敷料成分如三乙醇胺、乙二胺四乙酸均可能對(duì)成分中含量造成干擾，申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)采用的方法學(xué)進(jìn)行制定驗(yàn)證從而排除非蛋白氮的干擾。

另外，由于許多企業(yè)追逐“功效成分”，多主成分混合產(chǎn)品申報(bào)量逐漸增加，以透明質(zhì)酸鈉為例，目前同時(shí)含有重組膠原蛋白成分以及透明質(zhì)酸鈉的產(chǎn)品申報(bào)量占比也逐漸增加，由于透明質(zhì)酸鈉中含有非蛋白氮，且原料中常含有混合蛋白質(zhì)與多肽等雜質(zhì)，蛋白質(zhì)含量亦作為透明質(zhì)酸鈉原材料的常規(guī)控制指標(biāo)，會(huì)影響多成分成品中重組膠原蛋白含量的測(cè)定。吳倩倩等[8] 將鎢酸沉淀法進(jìn)行了改良，可以有效消除樣品中非蛋白氮的干擾，準(zhǔn)確測(cè)定產(chǎn)品中重組膠原蛋白的含量，該方法對(duì)于成品中成分含有非蛋白氮并且成分比較復(fù)雜的膠原蛋白樣品的質(zhì)量控制提供了重要參考。

除了非蛋白氮的干擾問(wèn)題以外，多數(shù)企業(yè)在注冊(cè)申報(bào)制定含量檢測(cè)方法時(shí)未明確產(chǎn)品的氮轉(zhuǎn)換系數(shù)，常使用《中華人民共和國(guó)藥典》中默認(rèn)值6.25，未根據(jù)重組膠原蛋白原材料的氨基酸序列和異質(zhì)性狀態(tài)進(jìn)行測(cè)算與驗(yàn)證，從而確定凱氏定氮法中蛋白質(zhì)計(jì)算的氮轉(zhuǎn)換系數(shù)，氮轉(zhuǎn)換系數(shù)的不正確引用，也會(huì)影響成品中重組膠原蛋白含量的計(jì)算，因此，申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)提供氮轉(zhuǎn)換系數(shù)的確定過(guò)程，并在產(chǎn)品技術(shù)要求的檢驗(yàn)方法中予以明確，對(duì)于原材料外購(gòu)的企業(yè)，也應(yīng)根據(jù)原材料供應(yīng)商提供的相應(yīng)資料確定產(chǎn)品實(shí)際的氮轉(zhuǎn)換系數(shù)。

部分申報(bào)企業(yè)還采用《中華人民共和國(guó)藥典》中福林酚法、雙縮脲法等其他蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法，雙縮脲法快速但靈敏度低，由于成品中含量較低，并不能準(zhǔn)確測(cè)定成品中含量。對(duì)于福林酚法，雖然該法靈敏度較高，但反應(yīng)速度慢，且產(chǎn)生干擾的物質(zhì)較多，對(duì)雙縮脲反應(yīng)產(chǎn)生干擾的離子，同樣容易干擾福林酚反應(yīng)，且影響更大。如還原物質(zhì)、酚類(lèi)、枸櫞酸、硫酸銨、三羥甲基氨基甲烷緩沖液、甘氨酸、糖類(lèi)、甘油等均有干擾作用，選擇該法時(shí)需要考慮是否含有相應(yīng)干擾成分。考慮到該類(lèi)產(chǎn)品含有多種組成成分，產(chǎn)品中不同的成分可能對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾，因此產(chǎn)品技術(shù)要求中采用的具體檢驗(yàn)方法均應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證，從而保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

2.5 臨床評(píng)價(jià)相關(guān)問(wèn)題

含重組膠原蛋白二類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品經(jīng)判定屬于《免于臨床評(píng)價(jià)醫(yī)療器械目錄》中產(chǎn)品的，可以按照《列入免于臨床評(píng)價(jià)醫(yī)療器械目錄產(chǎn)品對(duì)比說(shuō)明技術(shù)指導(dǎo)原則》提供相應(yīng)資料，從基本原理、結(jié)構(gòu)組成、性能、安全性、適用范圍等方面，證明產(chǎn)品的安全有效性。對(duì)于不符合《免于臨床評(píng)價(jià)醫(yī)療器械目錄》的產(chǎn)品，應(yīng)按照《醫(yī)療器械臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》《醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范》等要求提交臨床評(píng)價(jià)資料，評(píng)價(jià)路徑包括同品種臨床評(píng)價(jià)路徑以及臨床試驗(yàn)路徑。目前申報(bào)產(chǎn)品多采用同品種臨床評(píng)價(jià)路徑。申請(qǐng)人在進(jìn)行同品種臨床評(píng)價(jià)時(shí)，需要評(píng)價(jià)申報(bào)產(chǎn)品與同品種的劑型狀態(tài)、滅菌情況、組成成分及比例、適用范圍、技術(shù)指標(biāo)等多個(gè)方面進(jìn)行比對(duì)，應(yīng)當(dāng)選擇與申報(bào)產(chǎn)品具有相同的適用范圍、技術(shù)特征和生物學(xué)特性的對(duì)比器械，劑型、成分以及適用范圍差異較大的不建議作為對(duì)比器械。適用范圍重點(diǎn)關(guān)注注冊(cè)證載明的預(yù)期用途，同時(shí)還要考慮適應(yīng)人群等信息。建議綜合考慮的內(nèi)容如下：①產(chǎn)品的適用部位對(duì)比產(chǎn)品預(yù)期使用部位是否一致；②臨床用量、使用頻次和累計(jì)時(shí)間；③與人體的接觸方式；④是否無(wú)菌提供；⑤是否一次性使用、配合使用的器械或藥品、對(duì)使用者要求等[9]。

為了保證申報(bào)產(chǎn)品的安全和有效性，技術(shù)指標(biāo)亦是臨床評(píng)價(jià)比對(duì)的重點(diǎn)項(xiàng)目，可參照《重組膠原蛋白創(chuàng)面敷料注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》中指標(biāo)要求展開(kāi)比對(duì)，申報(bào)產(chǎn)品相關(guān)指標(biāo)應(yīng)不低于已上市同類(lèi)產(chǎn)品的要求。重組膠原蛋白產(chǎn)品作為一種有效成分，劑量關(guān)系是非常明顯的，而且需要的“有效濃度”來(lái)實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品的有效性，同時(shí)由于醫(yī)療器械產(chǎn)品無(wú)按照添加量排序的強(qiáng)制要求，已上市產(chǎn)品中存在極其微量添加的情況，相應(yīng)成分添加量是否能夠達(dá)到預(yù)期的臨床效果需要打問(wèn)號(hào)，因此含重組膠原蛋白二類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品中重組膠原蛋白的含量也應(yīng)是臨床資料審評(píng)的重點(diǎn)。由于《重組膠原蛋白創(chuàng)面敷料注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》中規(guī)定“除非有充分資料證明重組膠原蛋白原材料的結(jié)構(gòu)特征等能夠給申報(bào)產(chǎn)品功能帶來(lái)額外獲益，產(chǎn)品名稱(chēng)不區(qū)分具體材料特征”，市場(chǎng)上產(chǎn)品不區(qū)分型別，在比對(duì)時(shí)無(wú)法獲知對(duì)照產(chǎn)品的型別信息，只能針對(duì)鑒別、含量指標(biāo)進(jìn)行廣泛的比對(duì)，所以不同型別原材料產(chǎn)品是否可進(jìn)行比對(duì)亦是目前審評(píng)過(guò)程中面臨的難點(diǎn)，對(duì)于特殊型別、特殊預(yù)期用途的產(chǎn)品應(yīng)考慮針對(duì)原材料的型別、鑒別等信息進(jìn)行比對(duì)，以此證明原材料的等同性。

3.小結(jié)和展望

重組膠原蛋白作為一類(lèi)新崛起的熱門(mén)成分，是近年來(lái)生物材料研究與應(yīng)用的熱點(diǎn)，也是少數(shù)由中國(guó)企業(yè)掌握話語(yǔ)權(quán)的原料賽道，已經(jīng)逐漸進(jìn)入頂尖原料成分的行列。雖然市場(chǎng)前景廣闊，但也存在很多爭(zhēng)議，尤其作為醫(yī)療器械主要成分，審評(píng)過(guò)程存在許多難點(diǎn)，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局先后頒布多項(xiàng)重組膠原蛋白行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及政策法規(guī)文件，對(duì)規(guī)范和監(jiān)管當(dāng)前已經(jīng)形成的行業(yè)業(yè)態(tài)的有序發(fā)展起到了重要作用。從審評(píng)角度對(duì)含重組膠原蛋白二類(lèi)醫(yī)療器械產(chǎn)品的一些共性問(wèn)題的對(duì)策進(jìn)行探討，以期通過(guò)對(duì)關(guān)鍵原材料的安全性和風(fēng)險(xiǎn)控制、提高對(duì)相應(yīng)性能指標(biāo)以及臨床評(píng)價(jià)的管理要求，更好地保障相關(guān)產(chǎn)品的安全性、有效性、可靠性，并促進(jìn)相關(guān)產(chǎn)業(yè)的規(guī)范發(fā)展。