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嘉峪檢測網 2024-08-27 10:15
在科研探索的征途中,高效液相色譜儀(HPLC)作為實驗室的得力助手,其穩定運行直接關系到實驗數據的準確性與科研項目的進展。今天,我將結合個人經驗,深入分享幾點關于HPLC維護的關鍵心得,旨在通過實際案例增強內容的邏輯性和可讀性,助力各位同仁更好地掌握這一精密儀器的日常保養與故障排除技巧。
1. 濾頭的清洗藝術:預防堵塞,確保流暢
在HPLC的日常使用中,濾頭的清潔往往被忽視,卻直接關系到流動相的質量與實驗的穩定性。記得有一次,實驗結果顯示出峰時間異常,排查后發現竟是濾頭堵塞所致。這提醒我們,盡管產品手冊強調需定期更換并過濾流動相,實際操作中卻容易疏忽這一環節。特別是在高溫環境下,濾頭堵塞更為常見。
優化策略:我采用10%稀硝酸進行超聲清洗10分鐘,有效去除附著物,隨后用純水徹底沖洗,確保無殘留。建議設定定期清洗計劃,特別是當流動相中含有鹽分時,更應增加清洗頻率。此外,每次更換流動相前,都應檢查其過濾狀態,避免隔夜水直接使用。
2.泵的維護:壓力穩的秘訣
當實驗過程中發現壓力過高、波動較大時,那很有可能是泵的單向閥出問題了。我一般首先找一張干凈的A4紙,用扳手小心的把單向閥取出來放上面,注意單向閥的方向,一般廠家都會有個標記,注意不要弄反方向。
取出來之后用洗耳球吹一下,正常的情況應該是一邊可以吹透一邊不行,否則就是有問題了。清洗一般用甲醇超聲即可,要是問題嚴重的話可以先用5%稀硝酸超聲10min,接著用純水清洗干凈并超聲10min,最后再用甲醇超聲10min。
注意稀硝酸超聲后一定要用純水洗凈超聲才可用甲醇超聲。單向閥安裝之后要注意監測是否漏液,壓力是否正常。清洗瓶中的液體要經常查看和更換,若液體不夠會影響泵的清洗和儀器的自檢,實驗室的戴安U3000就有一次因為清洗瓶中異丙醇不夠,一直不能通過自檢,等到發現之后已經浪費了大半天的時間。
3. 檢測池的深度清洗
檢測池一般不用常拆,我之所有拆的經驗是因為樣品把管路堵了,系統壓力很高,通過一系列的排除發現其他地方沒有問題,于是把柱子卸掉,用注射器從流通池進口打溶劑,發現溶劑不能從出口出來,于是確定檢測池這塊有問題,叫工程師太費勁就自己拆了洗。
不同型號液相的具體構造不一樣,所以建議大家在動手之間把說明書多研究幾遍,拆的時候同樣準備一張干凈A4紙,兩個燒杯一大一小,里面放好甲醇。
依利特的檢測池比較容易拆開,把如上圖兩個螺絲小心擰松,就可以把檢測池拿出來,如下圖:
再小心把中間的螺絲擰松就可以完全把檢測池拿出來了,因為之間確定檢測池管路堵了,但是不確定是進口還是出口,所以接下來要把管路分別卸下來,注意用標記筆標明進出口的位置,以免安裝的時候弄混淆。
如下圖,朝上的拍出來的兩個孔是接檢測器電路的,我們在后續安裝完畢后務必保持這兩個位置的干燥,而沒有拍出來的兩個連接管路的孔是檢測池的進出口,我們需要標記。
其實初次拆開看到管路在檢測器上有繞圈我是充滿了疑問的,如下圖,其實這是進口管,為了確保被分析物質進入檢測池的時候和檢測池里面的溫度環境基本一致,廠家就會用到如此的設計,把進口管路在檢測池上纏繞幾圈,當我們拆的時候按照管路直接拆開即可。
這種耐高壓的不銹鋼連接管口徑很細,一般堵了就難以再生了,不過也正是因為口徑很細,堵的位置一般會比較靠前,所以通常的做法就是先剪掉5~10cm再從注射器試試是否依舊堵塞,若沒法辦就只能換管路了。
借著這個機會還可以把檢測池清洗一下,待把管路卸去后直接把整個檢測池放進甲醇超聲,若有需要還可以把檢測池拆開對立面進行超聲清洗。
但是進行這個步驟要注意不要在石英玻璃上留下刻痕,而且每個石英玻璃都有一個墊圈,清洗后注意要記得安裝否則會漏液,還有安裝的時候螺絲不要太緊,記住之前打開時候的力道,剛好就好,否則石英玻璃會被壓碎。當對上述各部件完成清洗之后就可以進行復原安裝了,要記得檢測池后面兩個接電路的孔要保持干燥,可以用吹風吹干。
另外由于出口管直接排廢液,我當時裝的時候就用了比較短的(大概10cm)不銹鋼管,然后隨便接上一根管路到廢液桶,結果出了如下問題:梯度洗脫的時候,當甲醇和水的比例跑到60%左右的時候,會出現一系列的有規律的大峰,明顯不是我的樣品峰。
由于之前做制備液相改短管路的時候遇到過,所以我很快的判斷這是因為我的出口管太短不耐壓所致。由于手上沒有多余的不銹鋼管所以我用了小口徑的PEEK管代替,為了確保足夠耐壓我用了足足50cm,安裝完畢,再次檢測,儀器恢復正常。
其實在做制備液相的時候為了提高組分接收的純度,我們經常會采取改短檢測器出口管路,但是這種做法帶來的結果就是容易產生氣泡,反而影響實驗結果。所以大家在更換檢測池出口管路的時候盡量維持管路原來的長度,要想減短可以用一個備壓管。
結語
HPLC出問題是正常的,每次遇到問題我總這么想,這么貴重的儀器只要按照說明做,一般的拆裝應該不會對儀器造成硬傷,所以自己經常動手,以上的一點心得拿出來分享希望對大家有幫助,謝謝各位的關注!
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