導語：近期中國動物疫病預防控制中心發布了《養殖場非洲豬瘟病毒弱毒株防控技術指南》，指南中提到“采樣要使用聚丙烯材質拭子，避免使用頭部為棉花制品的拭子、含海藻酸鈣拭子以及木柄拭子”，詳見《養殖場非洲豬瘟病毒弱毒株防控技術指南》的使用說明。原博士曾在病毒采樣拭子的評估試驗初探 文章中通過實驗對不同材質的拭子對核酸檢測的影響進行了評估，實驗表明植絨材質的拭子更適合用于核酸檢測。但是，不同材質的拭子對抗體采樣檢測有什么影響呢？鳴捷生物左總的團隊開展了不同材質的拭子對抗體檢測影響的實驗，現分享給大家：
采樣作為檢測的第一個環節，采樣質量的好壞直接影響檢測結果的準確性，在原博士的研究中表示植絨拭子在核酸檢測的病毒釋放率和穩定性上均優于棉簽拭子，但是對于抗體檢測實驗中是否也有類似的情況，尚不清晰。本文通過吸水量及抗體釋放率兩項指標對比了植絨拭子和棉拭子在不同情況下對抗體檢測結果的影響，使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測試劑盒X3檢測溶液中的抗體含量，來確定抗體釋放水平的高低，檢測值越高，代表抗體釋放越多。其結果如下：
1.吸水量
吸水量體現的是不同材質的拭子的吸水能力，通常吸水能力越強越好。本實驗選擇一份背景清晰的非瘟陽性的血清分成兩份，將不同材質的拭子在相同體積的血清中充分浸泡，然后拿出拭子計算每種拭子的吸水量。
試驗結果：棉簽>植絨（與原博士結果一致）。
表1 植絨及棉拭子吸水量對比
討論：由于兩種拭子的拭子頭大小不一樣，棉簽的頭比較大所以吸水量也比較大，應該在相同大小的拭子頭下進行評估會更準確，但是每個廠家生產出來的本身就是大小不一，因此在選擇采樣工具時，本試驗結果仍具有參考性。
2.抗體釋放率
抗體釋放率體現的是不同材質的拭子吸附抗體后的釋放效率，抗體釋放率越高，采樣獲得的抗體越多。考慮到臨床采樣的多樣性，本次試驗對比了拭子完全濕潤的情況下和固定上樣量情況下，兩種拭子的抗體釋放率以及模擬了采樣后加保存液和不加保存液運輸或干燥后運輸的情況下的抗體釋放率，以期為后期臨床抗體檢測的采樣運輸環節提供參考。
2.1完全浸潤的抗體釋放率
本試驗在相同體積的血清中分別加入兩種拭子，使其充分浸泡吸取血清后，兩種拭子放入另一個等體積的稀釋液中浸泡并震蕩，充分混勻后使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測試劑盒X3檢測溶液中的抗體含量。
試驗結果：完全浸潤情況下抗體釋放率：植絨＞棉簽拭子。
表2 植絨及棉拭子完全浸潤下抗體釋放情況
討論：雖然棉簽的吸水量是植絨的1.3倍左右（原博士結果1.5倍），但是釋放結果上植絨好于棉簽，后續試驗評估了相同吸水量的情況下抗體釋放率。
2.2 固定上樣量情況下的抗體釋放率
本試驗將同一份血清取100 ul中分別滴到兩種拭子上，待兩種拭子都充分吸取血清后，將兩種拭子放入另一個等體積的稀釋液中浸泡震蕩，充分混勻后使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測試劑盒X3檢測溶液中的抗體含量。
試驗結果：同一上樣量情況下抗體釋放率：植絨略好于棉簽拭子。
表3 植絨及棉拭子固定上樣量的抗體釋放情況
討論：由于該組實驗是在加樣之后直接就放入稀釋液中浸泡，此時植絨拭子的抗體滴度略好于棉拭子，但可能不能完全模擬臨床的情況，因此后續試驗模擬了不同運輸條件下的抗體釋放率。
2.3 保存液運輸條件下及干燥運輸條件下的抗體釋放率對比
本試驗分為兩組，第一組待兩種拭子充分吸取血清后放入等體積稀釋液中運輸，第二組待兩種拭子充分吸取血清后放入空EP管運輸，運輸時長為3小時，常溫運輸，收到樣本后充分渦旋震蕩，瞬離后使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測試劑盒X3檢測溶液中的抗體含量。
試驗結果：保存液運輸條件下：植絨>棉簽；干燥運輸條件下：棉簽＞植絨。
表4 植絨及棉拭子不同運輸條件下的抗體釋放情況
討論：本試驗模擬臨床上血拭子樣本運輸條件對比了不同采樣材質和運輸條件下的抗體釋放率，結果顯示在濕潤條件下運輸植絨的抗體釋放率好于棉簽拭子，但是在干燥運輸條件下，由于棉簽吸水量更大，承載的抗體更多，在干燥條件下運輸更不容易揮發和損失，可能導致檢測結果高于植絨拭子，但是本次實驗因為條件限制未能充分對比兩種拭子采樣完全干燥后的抗體釋放率，后續補充了這一塊的內容。
2.4 干燥條件下的抗體釋放率
本試驗分為兩組，第一組對比充分浸潤的兩種拭子干燥后的抗體釋放率，第二組對比同一上樣量下（100 ul）兩種拭子干燥后的抗體釋放率，所有拭子干燥后用同一稀釋液浸泡5min使之充分釋放，同時設置對照組，即100 ul原液加500 ul稀釋液比較干燥后的抗體檢測值是否會受到較大影響，所有結果使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測試劑盒X3檢測，結果如下。
試驗結果：干燥后抗體釋放率：植絨>棉簽。
表4 植絨及棉拭子干燥后的抗體釋放情況
討論：本試驗模擬臨床上血拭子干燥后運輸，到實驗室再處理的場景，結果顯示，無論是充分浸潤還是固定上樣量條件下，徹底風干后（本實驗風干耗時2天） 植絨拭子的抗體釋放率都明顯優于棉拭子。此外，本結果中100 ul血清直接稀釋的結果和100 ul血清利用植絨作為載體運輸的結果差異不大，也說明植絨在臨床是非常好的采樣載體。
總結，原博士核酸釋放率試驗結果及本試驗抗體釋放率結果表明，在臨床采樣中植絨拭子相對于棉簽拭子更有利于提高檢出率。但是由于植絨拭子較棉簽拭子成本更高，臨床需要根據實際情況選擇合適的采樣拭子。
鳴捷生物為臨床非瘟抗體檢測特地研發了一款適合于尾根血拭子檢測非瘟抗體的試劑盒高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測試劑盒X3，相對于普通試劑盒能夠極其顯著的提高臨床復雜毒株感染的檢出率。
附：
高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測試劑盒X3抗體解讀如下：
