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非無(wú)菌化學(xué)藥品及原輔料微生物限度研究技術(shù)指導(dǎo)原則（征求意見稿）
目錄
一、概述 3
二、非無(wú)菌原輔料微生物限度研究 3
1、微生物控制策略的建立 3
2、檢測(cè)方法的選擇 6
3、限度的制定 6
4、原輔料生產(chǎn)過(guò)程中的微生物控制 6
三、非無(wú)菌化學(xué)藥品微生物限度研究 7
1、微生物控制策略的建立 7
2、檢測(cè)方法的選擇 9
3、限度的制定 9
4、制劑生產(chǎn)過(guò)程中的微生物控制 10
5、制劑微生物控制的其他考量 12
四、微生物限度研究的其他關(guān)注點(diǎn) 12
1、微生物限度檢查的取樣量要求 12
2、方法適用性試驗(yàn)中產(chǎn)品具有抑菌性時(shí)的解決方案 13
3、微生物檢驗(yàn)替代方法的認(rèn)可 13
五、微生物限度申報(bào)資料要求 14
（一）申報(bào)資料涵蓋內(nèi)容 14
1、微生物限度檢測(cè)方法 14
2、方法適用性試驗(yàn)資料 14
3、微生物限度控制策略及制定依據(jù) 15
（二）申報(bào)資料的其他關(guān)注點(diǎn) 15
1、關(guān)于放行標(biāo)準(zhǔn)及貨架期標(biāo)準(zhǔn)中的微生物限度要求 15
2、穩(wěn)定性考察期間的微生物限度研究 16
3、微生物限度檢查的標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核及樣品檢驗(yàn) 16
六、名詞術(shù)語(yǔ) 16
七、參考文獻(xiàn) 17
非無(wú)菌化學(xué)藥品及原輔料微生物限度研究技術(shù)指導(dǎo)原則
（征求意見稿）
一、概述
對(duì)于非無(wú)菌化學(xué)藥品及原輔料，微生物限度是反映產(chǎn)品安全性和質(zhì)量可控性的重要指標(biāo)之一。為進(jìn)一步加強(qiáng)質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理在產(chǎn)品質(zhì)量控制中的應(yīng)用，提高非無(wú)菌化學(xué)藥品及原輔料微生物限度標(biāo)準(zhǔn)制定的科學(xué)性及合理性，明確申報(bào)資料中微生物限度研究及控制的相關(guān)要求，制定本指導(dǎo)原則。
本指導(dǎo)原則重點(diǎn)對(duì)非無(wú)菌化學(xué)藥品及原輔料微生物限度研究中的控制策略、檢測(cè)方法及限度的制定、生產(chǎn)過(guò)程控制及研究中的關(guān)注點(diǎn)進(jìn)行了系統(tǒng)闡述，對(duì)微生物限度申報(bào)資料要求進(jìn)行了明確。
本指導(dǎo)原則僅代表藥品監(jiān)管部門當(dāng)前的觀點(diǎn)和認(rèn)識(shí)，隨著科學(xué)研究的進(jìn)展，本指導(dǎo)原則中的相關(guān)內(nèi)容將不斷完善與更新。
二、非無(wú)菌原輔料微生物限度研究
1、微生物控制策略的建立
原輔料微生物限度研究應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法可以參考ICH Q9《質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理》推薦的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和管理工具，或者其他合理的方法。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需綜合考慮原輔料的性質(zhì)、物料性質(zhì)（包括起始物料、溶劑、試劑、催化劑等）、生產(chǎn)工藝、車間環(huán)境、設(shè)備清潔狀態(tài)、人員素質(zhì)、最差生產(chǎn)條件、歷史數(shù)據(jù)及趨勢(shì)等因素，參考ICH Q6A決策樹#6（原料藥和輔料的微生物限度檢查）制定微生物控制策略。需要指出的是，藥用輔料作為制劑的重要組成部分，其微生物控制對(duì)制劑具有重要影響，申報(bào)單位應(yīng)引起足夠的重視。
1.1首先判斷微生物能否在原輔料中生長(zhǎng)或存活，若有足夠的科學(xué)支持性數(shù)據(jù)表明微生物不能生長(zhǎng)或不能存活，結(jié)合風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果可不考慮對(duì)微生物限度進(jìn)行檢測(cè)。反之，應(yīng)進(jìn)行研究和檢查。
需要說(shuō)明的是，某些情況下原輔料不支持微生物的生長(zhǎng)和繁殖，但仍需要對(duì)微生物限度進(jìn)行研究和控制。例如，一些水分活度低的原輔料不適宜微生物的生長(zhǎng)和繁殖，但如果原輔料的初始生物負(fù)載較高，某些耐受性較強(qiáng)的微生物仍可能存活并引入到終產(chǎn)品中。
1.2 若微生物可在原輔料中生長(zhǎng)或存活，需制定合理的微生物限度要求，同時(shí)還應(yīng)考察原輔料的合成/處理相關(guān)步驟是否會(huì)減少微生物。
①若合成/處理相關(guān)步驟能夠減少微生物，且有科學(xué)的研究結(jié)果證明相關(guān)步驟可使原輔料中生物負(fù)載小于可接受標(biāo)準(zhǔn)（且未檢出常見指示菌），基于足夠的支持性數(shù)據(jù)，可不考慮進(jìn)行微生物限度檢查；若檢測(cè)結(jié)果大于可接受標(biāo)準(zhǔn)（或檢出常見指示菌），需將微生物限度訂入貨架期/放行標(biāo)準(zhǔn)并逐批檢測(cè)。
②若合成/處理相關(guān)步驟不能減少微生物，則應(yīng)按照制定的微生物限度要求對(duì)樣品實(shí)施檢測(cè)。若多批次樣品的微生物檢測(cè)結(jié)果均小于可接受標(biāo)準(zhǔn)（且未檢出常見指示菌），可進(jìn)行定期抽樣檢測(cè)，抽樣頻率通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果確定；若出現(xiàn)微生物限度檢測(cè)結(jié)果大于可接受標(biāo)準(zhǔn)（或檢出常見指示菌）的情況，或微生物增長(zhǎng)趨勢(shì)明顯時(shí)，則需將微生物限度訂入貨架期/放行標(biāo)準(zhǔn)并逐批檢測(cè)。
③微生物限度逐批檢測(cè)和定期檢測(cè)的控制策略并不是一成不變的，如果產(chǎn)品采用逐批檢測(cè)，在多批次微生物限度檢測(cè)數(shù)據(jù)均符合要求的情況下，可根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果調(diào)整為定期檢測(cè)；如果產(chǎn)品采用定期檢測(cè)，但個(gè)別批次產(chǎn)品出現(xiàn)微生物檢測(cè)結(jié)果大于可接受標(biāo)準(zhǔn)（或檢出常見指示菌）的情況，或微生物增長(zhǎng)趨勢(shì)明顯時(shí)，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行原因調(diào)查并將控制策略調(diào)整為逐批檢測(cè)。申報(bào)單位應(yīng)充分重視生產(chǎn)過(guò)程中微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的結(jié)果，若出現(xiàn)物料工藝、人員設(shè)備、車間環(huán)境等因素的偏差，也應(yīng)及時(shí)將控制策略調(diào)整為逐批檢測(cè)。
控制策略的調(diào)整還應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品自身特點(diǎn)進(jìn)行，并參照《已上市化學(xué)藥品藥學(xué)變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》相應(yīng)要求進(jìn)行申報(bào)。需要注意的是，對(duì)于無(wú)菌制劑中（如，注射劑和滴眼劑等）使用的非無(wú)菌原輔料，應(yīng)將微生物限度訂入貨架期標(biāo)準(zhǔn)并逐批檢測(cè)；對(duì)于部分水活度較高的原輔料，建議微生物限度采用逐批檢測(cè)的控制方式。
對(duì)于制定控制策略時(shí)檢測(cè)微生物限度的樣品批次及數(shù)量，建議申報(bào)單位提供產(chǎn)品研發(fā)、批量放大、過(guò)程驗(yàn)證、商業(yè)化生產(chǎn)批次的微生物限度檢測(cè)數(shù)據(jù)（例如不少于20 批）。
2、檢測(cè)方法的選擇
一般情況下，應(yīng)參考中國(guó)藥典相關(guān)要求制定原輔料微生物限度的檢查方法。
在原輔料生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制或終產(chǎn)品放行過(guò)程中，當(dāng)經(jīng)典方法難以滿足質(zhì)量控制要求時(shí)，可根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，采用經(jīng)驗(yàn)證的替代方法進(jìn)行質(zhì)量控制，如基于微生物生長(zhǎng)信息的檢驗(yàn)技術(shù)、直接測(cè)定被測(cè)介質(zhì)中活微生物的檢驗(yàn)技術(shù)、基于微生物細(xì)胞所含有特定組成成份的分析技術(shù)等。
3、限度的制定
在制定原輔料的微生物限度或生物負(fù)載標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，除可參考中國(guó)藥典相關(guān)要求外，還應(yīng)綜合考慮原輔料的特點(diǎn)、生產(chǎn)工藝和制劑的預(yù)期用途等因素，制定包括需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)、控制菌以及其它不可接受微生物等一項(xiàng)或多項(xiàng)的限度標(biāo)準(zhǔn)。
4、原輔料生產(chǎn)過(guò)程中的微生物控制
非無(wú)菌藥品中的原料藥和輔料是微生物污染的重要來(lái)源，特別是天然來(lái)源的、水分活度較高的、生產(chǎn)過(guò)程中使用水處理以及非潔凈環(huán)境下處理的原輔料。對(duì)于此類原輔料，不僅要關(guān)注終產(chǎn)品微生物限度制定的科學(xué)性和合理性，還需要關(guān)注生產(chǎn)過(guò)程中生物負(fù)載的監(jiān)測(cè)和控制，特別是可能會(huì)增加生物負(fù)載的生產(chǎn)步驟，例如中間體的儲(chǔ)存時(shí)限和儲(chǔ)存條件等。生產(chǎn)過(guò)程中生物負(fù)載的監(jiān)測(cè)和控制有助于最終產(chǎn)品微生物限度控制策略的制定。同時(shí)生產(chǎn)中還應(yīng)減少由水系統(tǒng)、設(shè)備儀器、生產(chǎn)環(huán)境、人員等因素引入的微生物污染風(fēng)險(xiǎn)。申報(bào)單位應(yīng)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果來(lái)制定研發(fā)和生產(chǎn)中微生物控制措施的相關(guān)質(zhì)量文件。
三、非無(wú)菌化學(xué)藥品微生物限度研究
1、微生物控制策略的建立
非無(wú)菌化學(xué)藥品微生物限度研究應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法可以參考ICH Q9《質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理》推薦的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和管理工具，或者其他合理的方法。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需綜合考慮產(chǎn)品特點(diǎn)、組成成份、生產(chǎn)工藝、車間環(huán)境、設(shè)備清潔狀態(tài)、人員素質(zhì)、最差生產(chǎn)條件、歷史數(shù)據(jù)及趨勢(shì)等因素，參考ICH Q6A決策樹#8（非無(wú)菌制劑的微生物限度檢查），制定產(chǎn)品的微生物限度控制策略。
1.1 當(dāng)制劑中含有抑菌劑或制劑本身具有抗微生物能力時(shí)，應(yīng)進(jìn)行如下研究：如含有抑菌劑，應(yīng)制定抑菌劑濃度可接受范圍，通過(guò)抑菌效力試驗(yàn)來(lái)證明低于或等于擬定的抑菌劑最低濃度時(shí)的有效性；或提供科學(xué)依據(jù)證明制劑本身具有抗微生物的能力。需制定合理的微生物限度可接受標(biāo)準(zhǔn)，并對(duì)微生物限度進(jìn)行逐批檢測(cè)。
①若每批微生物限度檢測(cè)結(jié)果均符合可接受標(biāo)準(zhǔn)，可進(jìn)行定期抽樣檢測(cè)，抽樣頻率通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果確定，或提供科學(xué)依據(jù)證明可不考慮進(jìn)行常規(guī)微生物檢測(cè)。
需要說(shuō)明的是，對(duì)于部分非無(wú)菌化學(xué)藥品如口服溶液劑、栓劑等中國(guó)藥典中明確需進(jìn)行微生物限度檢查的劑型，應(yīng)結(jié)合中國(guó)藥典相關(guān)要求將微生物限度訂入貨架期標(biāo)準(zhǔn)逐批檢測(cè)。
②若微生物限度檢測(cè)結(jié)果大于可接受標(biāo)準(zhǔn)或微生物增長(zhǎng)趨勢(shì)明顯時(shí)，則需將微生物限度訂入貨架期標(biāo)準(zhǔn)并逐批檢測(cè)。
③若定期抽樣檢測(cè)樣品出現(xiàn)微生物檢測(cè)結(jié)果大于可接受標(biāo)準(zhǔn)的情況，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行原因調(diào)查并將控制策略調(diào)整為逐批檢測(cè)。
1.2 如制劑中不含抑菌劑或制劑本身不具有抗微生物的能力，應(yīng)判斷制劑是否為固體制劑（如，口服固體制劑）。
①如制劑屬于固體制劑，且具有足夠的科學(xué)依據(jù)證明其具有抑制微生物生長(zhǎng)的特性，可不考慮進(jìn)行微生物限度檢查。
②如制劑不屬于固體制劑，或雖屬于固體制劑但沒有足夠的科學(xué)依據(jù)證明其具有抑制微生物生長(zhǎng)的特性，可參照1.1①、②、③執(zhí)行。
對(duì)于制定控制策略時(shí)檢測(cè)微生物限度的樣品批次及數(shù)量，建議申報(bào)單位提供產(chǎn)品研發(fā)、批量放大、過(guò)程驗(yàn)證、商業(yè)化生產(chǎn)批次的微生物限度檢測(cè)數(shù)據(jù)（例如不少于20 批）。
2、檢測(cè)方法的選擇
一般情況下，可參照中國(guó)藥典相關(guān)要求制定非無(wú)菌化學(xué)藥品微生物限度檢查方法（微生物計(jì)數(shù)及控制菌檢查）。
在藥品生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制或終產(chǎn)品放行過(guò)程中，當(dāng)經(jīng)典方法難以滿足質(zhì)量控制要求或?qū)嶋H需求時(shí)，可根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，采用經(jīng)驗(yàn)證的替代方法進(jìn)行質(zhì)量控制，具體方法可參見非無(wú)菌原輔料項(xiàng)下內(nèi)容。
3、限度的制定
3.1限度制定的一般原則
制定非無(wú)菌化學(xué)藥品微生物限度或生物負(fù)載標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，除參考中國(guó)藥典相關(guān)要求外，還應(yīng)綜合考慮原輔料來(lái)源、性質(zhì)、生產(chǎn)工藝條件、給藥途徑及微生物污染對(duì)患者的潛在危險(xiǎn)、目標(biāo)患者人群等因素，提出合理安全的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)。
對(duì)于特殊品種（如，小規(guī)格的吸入制劑）可考慮以最小包裝單位規(guī)定限度標(biāo)準(zhǔn)，從而提高檢驗(yàn)實(shí)操性并減少拆包裝混合樣品時(shí)的污染風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)藥品成份中含有動(dòng)物內(nèi)臟提取物、未經(jīng)提取的動(dòng)植物來(lái)源成分及礦物質(zhì)，或與上述產(chǎn)品共線生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)對(duì)沙門菌進(jìn)行檢測(cè)。必要時(shí)，某些藥品為保證其療效、穩(wěn)定性及避免對(duì)患者的潛在危害性，應(yīng)制定更嚴(yán)格的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)。
境外上市藥品申請(qǐng)進(jìn)口時(shí)，應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品具體劑型并關(guān)注中國(guó)藥典的要求，微生物限度標(biāo)準(zhǔn)原則上不低于中國(guó)藥典的要求，或根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果制定合理的控制策略。
3.2洋蔥伯克霍爾德菌群的控制
洋蔥伯克霍爾德菌群（Burkholderia cepacia complex，Bcc）是一類來(lái)源廣泛、由20余個(gè)伯克霍爾德菌屬的近緣種組成的革蘭氏陰性條件致病菌，具有較強(qiáng)的耐藥性，對(duì)于某些水性基質(zhì)非無(wú)菌化學(xué)藥品，Bcc是不可接受微生物。對(duì)于吸入用途的制劑以及口服、黏膜和鼻腔給藥的水溶液非無(wú)菌制劑，應(yīng)參照相關(guān)技術(shù)要求對(duì)洋蔥伯克霍爾德菌群進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)管理和控制研究，制定相應(yīng)的控制策略，必要時(shí)將Bcc訂入產(chǎn)品放行/貨架期標(biāo)準(zhǔn)。
4、制劑生產(chǎn)過(guò)程中的微生物控制
可從水分活度、生產(chǎn)工藝、中間產(chǎn)品存放時(shí)限和其他因素等多個(gè)方面關(guān)注制劑生產(chǎn)過(guò)程中的微生物控制。
4.1水分活度
非固體劑型（例如溶液劑、混懸劑、洗劑、乳膏劑、軟膏劑和凝膠劑等）比固體劑型具有更高的水分活度，支持微生物生長(zhǎng)的風(fēng)險(xiǎn)更高。水分活度是非無(wú)菌藥品的重要屬性，需關(guān)注原輔料自身水分活度、環(huán)境濕度、貯存條件、包裝系統(tǒng)等對(duì)水分活度的影響。
對(duì)于固體制劑、非水性基質(zhì)液體制劑，水分活度較低時(shí)，微生物不易生長(zhǎng)和繁殖，但制劑初始生物負(fù)載仍可能在有效期內(nèi)持續(xù)存在，因此，對(duì)原輔料進(jìn)行合理的微生物控制較為重要。
4.2 生產(chǎn)工藝
某些工藝步驟可能在提高或降低生物負(fù)載方面有較大影響。應(yīng)結(jié)合生產(chǎn)工藝的評(píng)估情況，對(duì)有微生物污染或生長(zhǎng)繁殖風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)鍵工藝步驟，如水分活度較高的工藝步驟（配液、制備包衣液等）或工藝時(shí)限較長(zhǎng)的工藝步驟進(jìn)行生物負(fù)載的研究。也可對(duì)能夠降低生物負(fù)載的工藝步驟進(jìn)行研究，通過(guò)研究證明微生物下降的程度（通常用下降對(duì)數(shù)值來(lái)表示），將有助于對(duì)工藝的理解和工藝參數(shù)的控制。
4.3 中間產(chǎn)品存放時(shí)限
應(yīng)對(duì)中間產(chǎn)品（如，可能更有利于微生物生長(zhǎng)和繁殖的水性基質(zhì)中間產(chǎn)品）的存放時(shí)限及環(huán)境條件進(jìn)行充分研究。必要時(shí)，應(yīng)制定中間產(chǎn)品生物負(fù)載的限度標(biāo)準(zhǔn)，以監(jiān)控工藝中微生物數(shù)量和種類變化，保證其生物負(fù)載可控。
4.4 其他因素
生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)減少由環(huán)境、設(shè)備、水系統(tǒng)、氣體、清潔和消毒劑、人員等因素引入的微生物污染風(fēng)險(xiǎn)。
對(duì)溶液劑、凝膠劑等高水分活度的制劑，申報(bào)單位應(yīng)加強(qiáng)對(duì)水系統(tǒng)（純化水）的檢測(cè)和控制，對(duì)Bcc等控制菌進(jìn)行生產(chǎn)過(guò)程管理，擬定合理的風(fēng)險(xiǎn)控制策略。
5、制劑微生物控制的其他考量
除生產(chǎn)過(guò)程中的評(píng)估因素外，還可考慮將組成成份、給藥途徑、適用人群納入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估范圍。
5.1 組成成份
藥品生產(chǎn)所用的原輔料可能是污染微生物的重要來(lái)源，應(yīng)確保其生物負(fù)載或微生物限度控制在一定水平之內(nèi)。應(yīng)關(guān)注處方中具有更高的污染風(fēng)險(xiǎn)的天然來(lái)源成份（如，以動(dòng)物、植物來(lái)源的天然組份，蛋白質(zhì)類等）。處方、工藝中使用的水應(yīng)進(jìn)行微生物控制。
5.2 給藥途徑
應(yīng)考慮制劑的給藥途徑，關(guān)注接觸該制劑的身體部位（如，皮膚、呼吸道、胃腸道或泌尿道等），如上述部位有損傷則更易引起用藥風(fēng)險(xiǎn)。
5.3 適用人群
應(yīng)考慮制劑的適用人群，對(duì)于外傷、手術(shù)、疾病或慢性病等所致的免疫缺陷患者，以及嬰兒和老人等特殊人群，微生物導(dǎo)致的用藥風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較大。
四、微生物限度研究的其他關(guān)注點(diǎn)
1、微生物限度檢查的取樣量要求
微生物限度檢查的取樣量要求應(yīng)參照中國(guó)藥典的相關(guān)要求。特殊檢驗(yàn)量可結(jié)合產(chǎn)品批產(chǎn)量、原輔料來(lái)源、生產(chǎn)工藝、微生物限度檢查歷史數(shù)據(jù)、國(guó)內(nèi)外藥典通則中的對(duì)取樣量的建議等進(jìn)行綜合評(píng)估，需保證取樣的代表性，并滿足檢驗(yàn)及標(biāo)準(zhǔn)判斷的需求，同時(shí)提供相關(guān)評(píng)估資料。
2、方法適用性試驗(yàn)中產(chǎn)品具有抑菌性時(shí)的解決方案
進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)時(shí)，如產(chǎn)品具有抑菌性影響微生物回收率，可采用增加稀釋液或培養(yǎng)基體積、加入適宜的中和劑或滅活劑、采用薄膜過(guò)濾法、上述幾種方法的聯(lián)合使用，來(lái)消除產(chǎn)品或干擾物的抑菌性。若因沒有適宜的方法消除供試品中的抑菌作用而導(dǎo)致微生物回收的失敗，應(yīng)采用能使微生物生長(zhǎng)的更高稀釋級(jí)供試液進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)，并提供相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估資料。
在選擇更高稀釋級(jí)時(shí)，還應(yīng)考慮能夠符合限度標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)誤差、檢驗(yàn)條件環(huán)境背景的影響等因素，有必要的情況下可以通過(guò)增加接種量（試驗(yàn)平皿數(shù)）來(lái)降低檢驗(yàn)誤差。若采用允許的最高稀釋級(jí)供試液進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)還存在1株或多株試驗(yàn)菌的回收率達(dá)不到要求，那么應(yīng)選擇回收情況最接近要求的方法進(jìn)行供試品微生物限度的檢測(cè)，并提供相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估資料。
3、微生物檢驗(yàn)替代方法的認(rèn)可
當(dāng)替代方法應(yīng)用于藥品生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制時(shí)，其結(jié)果與經(jīng)典方法相比某些參數(shù)如準(zhǔn)確性等可能存在差異，但二者應(yīng)有明確的相關(guān)性。在進(jìn)行過(guò)程控制的微生物檢驗(yàn)時(shí)，鼓勵(lì)增加使用快速微生物檢驗(yàn)方法與傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法并行。經(jīng)過(guò)驗(yàn)證和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估后，可替代傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法。當(dāng)替代方法應(yīng)用于終產(chǎn)品放行時(shí)，其應(yīng)優(yōu)于或等同于經(jīng)典方法。
五、微生物限度申報(bào)資料要求
（一）申報(bào)資料涵蓋內(nèi)容
申報(bào)資料中應(yīng)包括微生物限度檢測(cè)方法、方法適用性試驗(yàn)資料、微生物限度控制策略及制定依據(jù)。
1、微生物限度檢測(cè)方法
應(yīng)提供詳細(xì)的微生物限度檢測(cè)方法，包括：①取樣量；②供試液制備方法；如使用的稀釋液藥典未收載，應(yīng)注明配制和滅菌方法；③檢驗(yàn)項(xiàng)目和具體試驗(yàn)方法。如使用平皿法還是薄膜過(guò)濾法，接種量是1ml還是10ml；如果使用薄膜過(guò)濾法，應(yīng)明確沖洗液和沖洗方式、濾膜的材質(zhì)和面積等；④檢驗(yàn)依據(jù)參照的藥典；⑤結(jié)果判定方法及限度要求。
2、方法適用性試驗(yàn)資料
應(yīng)對(duì)微生物計(jì)數(shù)法和控制菌檢查法進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)。
方法適用性試驗(yàn)資料中應(yīng)明確以下內(nèi)容：①試驗(yàn)?zāi)康募霸囼?yàn)依據(jù)；②試驗(yàn)用材料信息，包括產(chǎn)品信息、試驗(yàn)菌種、培養(yǎng)基、稀釋液及試劑信息；③試驗(yàn)方法，包括供試液的制備方法、微生物計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)的具體操作、控制菌檢查法適用性試驗(yàn)的具體操作；④試驗(yàn)結(jié)果，包括計(jì)數(shù)方法適用性中供試品對(duì)照組、菌液對(duì)照組生長(zhǎng)菌落數(shù)，試驗(yàn)組生長(zhǎng)菌落數(shù)、稀釋劑對(duì)照組生長(zhǎng)菌落數(shù)（如有）及回收率信息；控制菌檢查中樣品組、試驗(yàn)組、陰性對(duì)照的培養(yǎng)結(jié)果；如在試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品具有抑菌活性，應(yīng)提供抗菌活性的去除或滅活方法及后續(xù)試驗(yàn)結(jié)果；⑤試驗(yàn)結(jié)論，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，明確方法是否適用于產(chǎn)品的微生物限度檢查。
3、微生物限度控制策略及制定依據(jù)
應(yīng)提供非無(wú)菌原輔料/非無(wú)菌化學(xué)藥品制定的微生物限度控制策略，并提供控制策略的制定依據(jù)如風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估資料、方法的選擇、限度的制定、生產(chǎn)過(guò)程中的過(guò)程控制等。
（二）申報(bào)資料的其他關(guān)注點(diǎn)
1、關(guān)于放行標(biāo)準(zhǔn)及貨架期標(biāo)準(zhǔn)中的微生物限度要求
應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品特性，擬定放行標(biāo)準(zhǔn)及貨架期標(biāo)準(zhǔn)中微生物限度控制要求。如產(chǎn)品在貯存期間微生物有增長(zhǎng)風(fēng)險(xiǎn)（水分活度較高或含有天然來(lái)源的成份等），與貨架期標(biāo)準(zhǔn)相比，放行標(biāo)準(zhǔn)可考慮制定較嚴(yán)格的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)，并關(guān)注貨架期微生物數(shù)量的變化。
對(duì)于制劑而言，如該劑型在中國(guó)藥典劑型通則項(xiàng)下微生物限度屬于必檢項(xiàng)目，可將微生物限度在貨架期標(biāo)準(zhǔn)中單獨(dú)列出，也可涵蓋在“其他”項(xiàng)下；如微生物限度不屬于必檢項(xiàng)目，若申報(bào)單位經(jīng)研究采用的控制策略為逐批檢驗(yàn)，則應(yīng)將微生物限度在貨架期標(biāo)準(zhǔn)中單獨(dú)列出。
2、穩(wěn)定性考察期間的微生物限度研究
注冊(cè)批次穩(wěn)定性考察期間，應(yīng)合理設(shè)置微生物限度考察時(shí)間點(diǎn)，在穩(wěn)定性關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn)和穩(wěn)定性末期應(yīng)進(jìn)行微生物限度檢查，充分評(píng)估產(chǎn)品在考察期間的微生物生長(zhǎng)趨勢(shì)。
3、微生物限度檢查的標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核及樣品檢驗(yàn)
如微生物限度檢查訂入貨架期標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)對(duì)微生物限度檢查進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核及樣品檢驗(yàn)。如微生物限度檢查僅訂入放行標(biāo)準(zhǔn)，必要時(shí)可進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核及樣品檢驗(yàn)。
進(jìn)口品種、國(guó)內(nèi)外共線品種的菌種選擇建議執(zhí)行中國(guó)藥典《藥品微生物室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則》中的相關(guān)規(guī)定。申報(bào)單位需關(guān)注檢測(cè)方法與菌株來(lái)源的匹配性。
六、名詞術(shù)語(yǔ)
生物負(fù)載：非無(wú)菌原輔料、中間產(chǎn)品以及藥品中存活的微生物數(shù)量和種類。
微生物限度：非無(wú)菌藥品的質(zhì)量屬性之一，能夠保證患者安全的前提下需要控制非無(wú)菌藥品的污染微生物不得超過(guò)一定水平。
不可接受微生物：除藥典規(guī)定控制菌以外，能夠在藥品中生存或繁殖，可導(dǎo)致特定給藥途徑下用藥患者感染或威脅患者健康，或破壞該藥品的性質(zhì)及療效的微生物。
常見指示菌：藥典中收載的控制菌及其他不可接受的微生物。
水分活度（water activity，aw）：相同溫度下產(chǎn)品水蒸氣壓（P）與純水蒸氣壓（Po）的比值。在數(shù)值上等于封閉系統(tǒng)中由產(chǎn)品產(chǎn)生的相對(duì)濕度（RH）的1/100。是產(chǎn)品中微生物可利用水的量度，是影響微生物生長(zhǎng)的關(guān)鍵因素之一。
七、參考文獻(xiàn)
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